抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-BMP15
中文名稱 骨形態(tài)發(fā)生蛋白15抗體
別 名 BMP 15; BMP-15; BMP15; BMP15_HUMAN; Bone morphogenetic protein 15; GDF 9B; GDF-9B; GDF9B; Growth/differentiation factor 9B; ODG2; POF4.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 發(fā)育生物學(xué) 染色質(zhì)和核信號 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 生長因子和激素 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 14kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BMP15
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是骨形態(tài)發(fā)生蛋白15抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
Thalassospirapermensis現(xiàn)貨,ATCC菌株
Maritimibacteralkaliphilus培養(yǎng),ATCC菌株
Herbaspirillumcanariense保存,ATCC菌株
Herbaspirillumaurantiacum售價,ATCC菌株
Herbaspirillumsoli現(xiàn)貨,ATCC菌株
Sphingomonasyunnanensis培養(yǎng),ATCC菌株
Massiliaaerilata保存,ATCC菌株
多黏類芽孢桿菌售價,ATCC菌株
甘肽受體2(GALR2)ELISA Kit for Galanin Receptor 2 (GALR2)規(guī)格:48T/96T
原鈣黏素β13(PCDHβ13)ELISA Kit for Protocadherin Beta 13 (PCDHb13)規(guī)格:48T/96T
輸入蛋白11(IPO11)ELISA Kit for Importin 11 (IPO11)規(guī)格:48T/96T
抑絲蛋白4(PFN4)ELISA Kit for Profilin 4 (PFN4)規(guī)格:48T/96T
磷甘露糖酶1(PMM2)ELISA Kit for Phosphomannomutase 2 (PMM2)規(guī)格:48T/96T
突觸融合蛋白12(STX12)ELISA Kit for Syntaxin 12 (STX12)規(guī)格:48T/96T
天冬酰轉(zhuǎn)移酶(ATCase)ELISA Kit for Aspartate Carbamoyltransferase (ATCase)規(guī)格:48T/96T
Tafazzin蛋白(TAZ)ELISA Kit for Tafazzin (TAZ)規(guī)格:48T/96T
羧肽酶D(CPD)ELISA Kit for Carboxypeptidase D (CPD)規(guī)格:48T/96T
連接蛋白2(JPH2)ELISA Kit for Junctophilin 2 (JPH2)規(guī)格:48T/96T
N-酰轉(zhuǎn)移酶5(NAT5)ELISA Kit for N-Acetyltransferase 5 (NAT5)規(guī)格:48T/96T
二肽基肽酶9(DPP9)ELISA Kit for Dipeptidyl Peptidase 9 (DPP9)規(guī)格:48T/96T
膜粘連蛋白5抗體Cinchonain Ia中文名:金雞納素Ia別名:分子式:C24H20O9
重組膜粘連蛋白5抗體Cinchonain Ib中文名:金雞納素Ib別名:分子式:C24H20O9
銜接蛋白α-Adaptin抗體3-O-Methylgancaonin P中文名:3-O-甲基甘草寧P別名:6-Prenylquercetin 3-methyl ether分子式:C21H20O7
凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)Gancaonin O中文名:甘草寧O別名:6-Prenylluteolin分子式:C20H18O6
凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端)Pinobanksin 3-(2-methyl)butyrate中文名:別名:分子式:C20H20O6
骨形態(tài)發(fā)生蛋白15抗體 Actinomucor│elegans種屬:Actinomucor│elegans
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:制腐乳。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0014
生長條件:25-28℃
存儲條件:真空冷凍干燥法雅致放射毛霉