抗體反應的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,如有適當濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應最適溫度。
芳香化酶/細胞色素P450/雌激素合成酶抗體 別 名 Cytochrome p450 19A1; Estrogen synthetase; ARO 1; ARO; ARO1; CPV; CYPXIX; Cytochrome P450 19A1; Cytochrome P450 family 19 subfamily A polypeptide 1; MGC104309; P 450AROM; P450AROM.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-Aromatase
中文名稱 芳香化酶/細胞色素P450/雌激素合成酶抗體
研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學 細胞凋亡 合成與降解
蛋白分子量 predicted molecular weight: 20/24/40/57kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Aromatase N-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復,在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進行復染,脫水,透明。
14、選擇適當?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應法相仿。
含試劑:
1、一抗(應用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標記二抗工作液:生物素標記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
伴放線放線桿菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
哈氏弧菌培養(yǎng),ATCC菌株
解藻弧菌(溶藻弧菌)保存,ATCC菌株
Hydrotaleaflava售價,ATCC菌株
血鏈球菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
醋酸醋桿菌培養(yǎng),ATCC菌株
伊氏李斯特氏菌保存,ATCC菌株
英諾克李斯特氏菌售價,ATCC菌株
Bcl2相關(guān)髓細胞白血病序列1(MCL1)ELISA Kit for Myeloid Cell Leukemia Sequence 1, Bcl2 Related (MCL1)規(guī)格:48T/96T
非受體型蛋白酪磷酶1(PTPN1)ELISA Kit for Protein Tyrosine Phosphatase, Non Receptor Type 1 (PTPN1)規(guī)格:48T/96T
抗酒石性磷酶(ACP5)ELISA Kit for Acid Phosphatase 5, Tartrate Resistant (ACP5)規(guī)格:48T/96T
90kDa熱休克蛋白β1(HSP90β1)ELISA Kit for Heat Shock Protein 90kDa Beta 1 (HSP90b1)規(guī)格:48T/96T
多巴受體D3(DRD3)ELISA Kit for Dopamine Receptor D3 (DRD3)規(guī)格:48T/96T
胰淀素(IAPP)ELISA Kit for Islet Amyloid Polypeptide (IAPP)規(guī)格:48T/96T
血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA Kit for Angiotensin I Converting Enzyme (ACE)規(guī)格:48T/96T
凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA Kit for Factor Related Apoptosis Ligand (FASL)規(guī)格:48T/96T
胱天蛋白酶3(CASP3)ELISA Kit for Caspase 3 (CASP3)規(guī)格:48T/96T
血紅素氧合酶2(HO2)ELISA Kit for Heme Oxygenase 2, Decycling (HO2)規(guī)格:48T/96T
神經(jīng)介素B(NMB)ELISA Kit for Neuromedin B (NMB)規(guī)格:48T/96T
淋巴細胞趨化因子(Lptn)ELISA Kit for Lymphotactin (Lptn)規(guī)格:48T/96T
活性依賴的神經(jīng)保護肽抗體2,4,6,6-Tetramethyl-3(6H)-pyridinone中文名:別名:分子式:C9H13NO
α1酸性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體Crebanine中文名:克班寧別名:8,9-Dimethoxy-1,2-methylenedioxyaporphine分子式:C20H21NO4
α1酸性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2)Glycozolinine中文名:別名:6-Methyl-9H-carbazol-3-ol; Glycozolinol分子式:C13H11NO
核突觸蛋白抗體Sinoacutine中文名:青風藤堿別名:分子式:C19H21NO4
β-肌動蛋白/β-Actin 抗體(內(nèi)參抗體)Pterolactam中文名:別名:5-Methoxy-2-pyrrolidinone分子式:C5H9NO2
芳香化酶/細胞色素P450/雌激素合成酶抗體 Lactococcus lactis種屬:Lactococcus lactis
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:no
應用領(lǐng)域:生產(chǎn)酸牛奶。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0044
生長條件:30℃
存儲條件:真空冷凍干燥法乳酸乳球菌