抗體反應特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應法相仿。
ATP5A抗體 別 名 CF6; ATP synthase, H+ transporting, mitochondrial F0 complex, subunit F6; ATP synthase-coupling factor 6, mitochondrial; ATP5; ATP5A; ATPase subunit F6; ATPM; F6.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-ATP5A/ATP5J
中文名稱 ATP5A抗體
研究領域 細胞生物 免疫學 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 13kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ATP5j C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
抗體反應的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,如有適當濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應最適溫度。
含試劑:
1、一抗(應用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標記二抗工作液:生物素標記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復,在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進行復染,脫水,透明。
14、選擇適當?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
小威氏曲霉屬 Welomyces sp.
小諾卡氏菌 Nocardia parvus
小菌核屬菌種 Sclerotium sp.
小囊菌屬 Micorascus sp.
小棘 Penicillium spinulosum
多態(tài)生絲單胞菌 Hyphomonas polymorpha
達氏擬諾卡氏菌 Nocardiopsis dassonvillei
柴油食烷菌 Alcanivorax dieselolei
強酒海桿菌 Marinobacter vinifirmus
霍米海角海源菌 Idiomarina homiensis
緩激肽(BK)ELISA Kit for Bradykinin (BK)規(guī)格:48T/96T
神經(jīng)肽Y(NPY)ELISA Kit for Neuropeptide Y (NPY)規(guī)格:48T/96T
巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP1α)ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha (MIP1a)規(guī)格:48T/96T
氧化低密度蛋白(OxLDL)ELISA Kit for Oxidized Low Density Lipoprotein (OxLDL)規(guī)格:48T/96T
血管生成素樣蛋白1(ANGPTL1)ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 1 (ANGPTL1)規(guī)格:48T/96T
檸檬合酶(CS)ELISA Kit for Citrate Synthase (CS)規(guī)格:48T/96T
血管生長素(ANG)ELISA Kit for Angiogenin (ANG)規(guī)格:48T/96T
血管內(nèi)皮生長因子C(VEGFC)ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor C (VEGFC)規(guī)格:48T/96T
組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1)規(guī)格:48T/96T
Ⅱ型膠原(COL2)ELISA Kit for Collagen Type II (COL2)規(guī)格:48T/96T
組織因子通道抑制因子2(TFPI2)ELISA Kit for Tissue Factor Pathway Inhibitor 2 (TFPI2)規(guī)格:48T/96T
多配體蛋白聚糖1(SDC1)ELISA Kit for Syndecan 1 (SDC1)規(guī)格:48T/96T
砷酸鹽耐藥蛋白ARS2抗體Neotuberostemonine中文名:新對葉百部堿別名:分子式:C22H33NO4
芳香基硫酸酯酶1抗體Adenosine中文名:腺苷別名:分子式:C10H13N5O4
砷酸鹽轉(zhuǎn)運三磷酸腺苷酶抗體N-Demethylechitamine中文名:別名:分子式:C21H26N2O4
精氨酸t(yī)RNA的蛋白轉(zhuǎn)移酶1抗體Triacetonamine中文名:三丙酮胺別名:2,2,6,6-Tetramethyl-4-piperidinone分子式:C9H17NO
共濟失調(diào)蛋白7樣1抗體Neostenine中文名:別名:分子式:C17H27NO2
ATP5A抗體 Proteus│vulgaris種屬:Proteus│vulgaris
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0002
生長條件:30℃
存儲條件:真空冷凍干燥法普通變形菌