抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-ABCB5
中文名稱 ATP結(jié)合蛋白家族5抗體
別 名 ATP-binding cassette sub-family B member 5; ABCB 5; ABCB5alpha; ABCB5beta; ATP binding cassette sub family B (MDR/TAP) member 5; ATP binding cassette sub family B member 5; EST422562; P glycoprotein ABCB5.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 通道蛋白 糖蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 89/138kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ABCB5 C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是ATP結(jié)合蛋白家族5抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
玫瑰產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomycesroseochromogenes(Jensen)WaksmanetHenrici
珊瑚色諾卡氏菌 Nocardiacoralline(Bergeyetal.)WaksmanetHenrici
云芝 CoriolusVersicolor(L.:Fr.)Quel
雞腿蘑(毛頭鬼傘) Coprinuscomatus(Mull.exFr.)Gray
忍冬木層孔菌 Phellinuslonicerinus(Bond)BondetSing.
蜜粘褶菌=革裥菌 Gloeophyllumtrabeum(Pers.)Murr.=Lenzitestrabea(Pers.)Fr.
臥孔菌 Poriasp.
蛹蟲草(北冬蟲夏草、北蟲草) Cordycepsmillitaris(L.exFr.)Link
杏鮑菇 Pleurotuseryugii(DC.:Fr.)Quel.
平蓋靈芝(樹舌) Ganodermaapplanatum(Pers.exWullr)Pat.
性葡萄糖苷酶β(GβA)ELISA Kit for Glucosidase Beta, Acid (GbA)規(guī)格:48T/96T
鈉/鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶β1肽(ATP1β1)ELISA Kit for ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 1 Polypeptide (ATP1b1)規(guī)格:48T/96T
胱天蛋白酶1(CASP1)ELISA Kit for Caspase 1 (CASP1)規(guī)格:48T/96T
孕X受體(PXR)ELISA Kit for Pregnane X Receptor (PXR)規(guī)格:48T/96T
肌鈣蛋白T(TNT)ELISA Kit for Troponin T (TNT)規(guī)格:48T/96T
中性鞘磷酶(NSMASE)ELISA Kit for Neutral Sphingomyelinase (NSMASE)規(guī)格:48T/96T
前腦啡肽(PENK)ELISA Kit for Proenkephalin (PENK)規(guī)格:48T/96T
外核苷焦磷酶/磷二酯酶2(ENPP2)ELISA Kit for Ectonucleotide Pyrophosphatase/Phosphodiesterase 2 (ENPP2)規(guī)格:48T/96T
質(zhì)膜膜泡關(guān)聯(lián)蛋白(PLVAP)ELISA Kit for Plasmalemma Vesicle Associated Protein (PLVAP)規(guī)格:48T/96T
Discs大同源物4(DLG4)ELISA Kit for Discs, Large Homolog 4 (DLG4)規(guī)格:48T/96T
整合素關(guān)聯(lián)蛋白(IAP)ELISA Kit for Integrin Associated Protein (IAP)規(guī)格:48T/96T
骨骼肌慢肌肌鈣蛋白I(TNNI1)ELISA Kit for Troponin I Type 1, Slow Skeletal (TNNI1)規(guī)格:48T/96T
去整合素樣金屬蛋白酶12Tryptophol中文名:別名:分子式:C10H11NO
磷酸化乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體5-Hydroxy-2-pyrrolidinone中文名:別名:分子式:C4H7NO2
膜粘連蛋白2受體抗體Coixol中文名:薏苡素別名:6-Methoxy-2(3H)-benzoxazolone分子式:C8H7NO3
晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體Dihydroperaksine中文名:別名:19(S),20(R)-Dihydroperaksine分子式:C19H24N2O2
α2C-AR腎上腺素能受體抗體10-Hydroxydihydroperaksine中文名:別名:10-Hydroxy-19(S),20(R)-dihydroperaksine分子式:C19H24N2O3
ATP結(jié)合蛋白家族5抗體 Talaromyces│ruber種屬:Talaromyces│ruber
分離基物:植物塊根
提供形式:凍干物
安全等級(jí):1
模式菌株:yes
應(yīng)用領(lǐng)域:分類學(xué)研究。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0077
生長(zhǎng)條件:25℃
存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法紅色籃狀菌