抗體反應特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結合;
2.可逆性:抗原與抗體結合形成抗原抗體復合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質的含量時,化學比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應法相仿。
絲氨酸抑制蛋白激酶C底物抗體 別 名 A kinase (PRKA) anchor protein (gravin) 12; A kinase Anchor Protein 12; A kinase anchor protein 250kDa; AKAP 12; AKAP 250; AKAP250; DKFZp686M0430; DKFZp686O0331; Gercelin; Gravin; Kinase scaffold protein gravin; Myasthenia gravis autoantigen gravin; Srcs5; SSeCKS; Tsga12.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog
產品類型 一抗
英文名稱 Anti-AKAP12/Gravin
中文名稱 絲氨酸抑制蛋白激酶C底物抗體
研究領域 神經生物學 信號轉導 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 185kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from the middle of human AKAP12
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
抗體反應的因素:
1.電解質 :抗原抗體特異結合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質影響,如有適當濃度的電解質存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚,于是出現明顯的凝集或沉淀現象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應最適溫度。
含試劑:
1、一抗(應用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標記二抗工作液:生物素標記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復,在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進行復染,脫水,透明。
14、選擇適當的封片劑封片。
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
大孢綠僵菌=金龜子綠僵菌大孢變種 Metarhiziummajarosporae=Metarhiziumanisopliaevar.Majus
平沙綠僵菌 MetarhiziumpingshaenseChenetGuo(1986)
中華根霉 RhizopuschinensisSaito
厚孢根霉 RhizopuschlamydosporusBoedijn
哈茨木霉 Trichoderma harzianum Rifai
平展米曲霉(米曲霉平展變種) Aspergillusoryzaevar.effuses(Tirahoschi)Ohara
大麗花輪枝孢 Verticillium dahliae Klebahn
天藍色鏈霉菌 Streptomycescoelicolor(Müller)WaksmanetHenrici
淡天藍色鏈霉菌 Streptomycescoelicolor(Preobrazhenskaya)Pridham.HesseltineetBenedict
黃直絲鏈霉菌 StreptomycesflavorectusYanetal.
組蛋白H3(H3)ELISA Kit for Histone H3 (H3)規(guī)格:48T/96T
載蛋白A5(APOA5)ELISA Kit for Apolipoprotein A5 (APOA5)規(guī)格:48T/96T
多巴轉運蛋白(DAT)ELISA Kit for Dopamine Transporter (DAT)規(guī)格:48T/96T
神經生長因子(NGF)ELISA Kit for Nerve Growth Factor (NGF)規(guī)格:48T/96T
胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP2)ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 2 (IGFBP2)規(guī)格:48T/96T
血小板生成素(TPO)ELISA Kit for Thrombopoietin (TPO)規(guī)格:48T/96T
白介素18(IL18)ELISA Kit for Interleukin 18 (IL18)規(guī)格:48T/96T
三葉因子2(TFF2)ELISA Kit for Trefoil Factor 2 (TFF2)規(guī)格:48T/96T
補體因子B(CFB)ELISA Kit for Complement Factor B (CFB)規(guī)格:48T/96T
干細胞因子(SCF)ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF)規(guī)格:48T/96T
胎蛋白(αFP)ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP)規(guī)格:48T/96T
心鈉肽(ANP)ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP)規(guī)格:48T/96T
激活素受體相互作用蛋白1抗體Clauszoline M中文名:別名:分子式:C13H9NO3
蛋白激酶AKT1,2,3抗體Demethylmurrayanine中文名:別名:3-Formyl-1-hydroxycarbazole分子式:C13H9NO2
肌萎縮側索硬化蛋白2抗體Clausine D中文名:別名:分子式:C18H17NO2
腺嘌呤核苷酸轉運蛋白1、2、3、4抗體Rauvotetraphylline C中文名:別名:分子式:C28H34N2O7
腺苷三磷酸結合盒轉運體12抗體Clausine I中文名:別名:分子式:C14H11NO3
絲氨酸抑制蛋白激酶C底物抗體 Eupenicillium│brefeldianum種屬:Eupenicillium│brefeldianum
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:yes
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0072
生長條件:25℃
存儲條件:真空冷凍干燥法布雷正青霉
關鍵字: 絲氨酸抑制蛋白激酶C底物抗體 ;Anti-AKAP12/Gravin;100μg/200μg; 1mg/1ml ;一抗;