抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-APBB1/Fe65 protein
中文名稱 鐵蛋白Fe65抗體
別 名 Adaptor protein FE65a2; Amyloid beta (A4) precursor protein binding family B member 1; Amyloid beta A4 precursor protein binding family B; Amyloid beta A4 precursor protein binding family B member 1; Amyloid beta precursor protein binding family B member 1; APBB 1; APBB1; FE 65; Fe65 protein; MGC 9072; MGC9072; Protein Fe65; RIR; Stat like protein; Fe-65 Protein; APBB1_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 生長(zhǎng)因子和激素 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 新陳代謝
蛋白分子量 predicted molecular weight: 77kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Fe65 protein N-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
下列是鐵蛋白Fe65抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
Sphingomonasfennica Sphingomonasfennica
嗜肺軍團(tuán)菌 Legionellapneumophilasubsp.pneumophila
類干酪乳? .. Lactobacillusparacaseisubsp.paracasei
Methylophagamurata Methylophagamurata
Hyphomonasjohnsonii Hyphomonasjohnsonii
Hyphomonasrosenbergii Hyphomonasrosenbergii
Halobacillussp. Halobacillussp.
盲腸腸球菌 Enterococcuscecorum
海氏腸球菌 Enterococcushirae
耐久腸球菌(堅(jiān)韌鏈球菌) Enterococcusdurans(Streptococcusdurans)
肝腎骨堿性磷酶(ALPL)ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Liver/Bone/Kidney (ALPL)規(guī)格:48T/96T
白蛋白(ALB)ELISA Kit for Albumin (ALB)規(guī)格:48T/96T
β,4-半乳糖轉(zhuǎn)移酶1(β4GALT1)ELISA Kit for Beta,4-Galactosyltransferase 1 (b4GALT1)規(guī)格:48T/96T
酪羥化酶(TH)ELISA Kit for Tyrosine Hydroxylase (TH)規(guī)格:48T/96T
干細(xì)胞因子(SCF)ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF)規(guī)格:48T/96T
胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 2 (IGFBP2)規(guī)格:48T/96T
載蛋白C2(APOC2)ELISA Kit for Apolipoprotein C2 (APOC2)規(guī)格:48T/96T
二?;视?DAG)ELISA Kit for Diacylglycerol (DAG)規(guī)格:48T/96T
神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)ELISA Kit for Nerve Growth Factor (NGF)規(guī)格:48T/96T
調(diào)節(jié)激活正常T-細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES)ELISA Kit for Regulated On Activation In Normal T-Cell Expressed And Secreted (RANTES)規(guī)格:48T/96T
尿激酶型纖溶酶原激活因子受體(uPAR)ELISA Kit for Plasminogen Activator, Urokinase Receptor (uPAR)規(guī)格:48T/96T
聯(lián)素受體1(ADIPOR1)ELISA Kit for Adiponectin Receptor 1 (ADIPOR1)規(guī)格:48T/96T
磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體1-Cinnamoylpyrrole中文名:別名:分子式:C13H11NO
去整合素樣金屬蛋白酶9抗體Apparicine中文名:別名:分子式:C18H20N2
Rho GTP酶激活蛋白20抗體Cyclo(D-Phe-L-Pro)中文名:別名:分子式:C14H16N2O2
含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族10抗體Cyclo(L-Ala-L-Pro)中文名:別名:Cyclo(alanylprolyl)分子式:C8H12N2O2
乙醛脫氫酶1蛋白家族L1抗體5,6-Dihydropyridin-2(1H)-one中文名:別名:分子式:C5H7NO
鐵蛋白Fe65抗體 Paenibacillus│lactis種屬:Paenibacillus│lactis
提供形式:凍干物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)β-淀粉酶。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0002
生長(zhǎng)條件:28℃
存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法乳酸類芽孢桿菌