抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-ADORA1/Adenosine A1 Receptor
中文名稱 腺苷A1受體抗體
別 名 A1AR; A1R; AA1R; AA1R_HUMAN; Adenosine receptor A1; ADORA 1; ADORA1; RDC 7; RDC7; Ri.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞膜受體 G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號(hào)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 37kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Adenosine A1 Receptor
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
下列是腺苷A1受體抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
流感嗜血桿菌 Haemophilusinfluenzae
陰道加德納氏菌 Gardnerella vaginalis
乳酸乳球菌葉蟬亞種 Lactococcuslactissubsp.hordniae
小片球菌 Pediococcusparvulus
格氏乳球菌 Lactococcusgarvieae
麻疹孿生球菌 Gemellamorbillorum
莫拉卡他莫拉菌 Moraxellacatarrhalis
脲氣球菌 Aerococcusurinae
腐皮鐮孢菌 Fusariumsolani
擴(kuò)展 Penicilliumexpansum
3.5% NaC1鳥(niǎo)脫羧酶發(fā)酵管20支3.5% NaC1鳥(niǎo)脫羧酶發(fā)酵管BR
精脫羧酶對(duì)照發(fā)酵管20支精脫羧酶對(duì)照發(fā)酵管BR
賴脫羧酶肉湯發(fā)酵管20支賴脫羧酶肉湯發(fā)酵管BR
3% NaC1賴脫羧酶發(fā)酵管20支3% NaC1賴脫羧酶發(fā)酵管BR
MR-VP發(fā)酵管20支MR-VP發(fā)酵管BR
尿素酶發(fā)酵管20支尿素酶發(fā)酵管BR
3% NaC1精脫羧酶發(fā)酵管20支3% NaC1精脫羧酶發(fā)酵管BR
3.5% NaC1精脫羧酶發(fā)酵管20支3.5% NaC1精脫羧酶發(fā)酵管BR
3.5% NaC1賴脫羧酶發(fā)酵管20支3.5% NaC1賴脫羧酶發(fā)酵管BR
色肉湯發(fā)酵管20支色肉湯發(fā)酵管BR
明膠發(fā)酵管20支明膠發(fā)酵管BR
木糖-明膠培養(yǎng)基發(fā)酵管20支木糖-明膠培養(yǎng)基發(fā)酵管BR
錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體Colchicine中文名:秋水仙堿別名:秋水仙素分子式:C22H25NO6
磷酸化有絲分裂激酶B/C抗體Rhynchophylline中文名:鉤藤堿別名:分子式:C22H28N2O4
磷酸化腺泡Acinus蛋白抗體Lappaconitine hydrobromide中文名:氫溴酸高烏甲素別名:分子式:C32H45BrN2O8
APS抗體Topotecan hydrochloride中文名:鹽酸拓?fù)涮婵祫e名:分子式:C23H24ClN3O5
磷酸化A-Raf抗體Fumitremorgin C中文名:別名:FTC分子式:C22H25N3O3
腺苷A1受體抗體 Aspergillus│candidus種屬:Aspergillus│candidus
提供形式:凍干物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:釀酒糖化菌。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0076
生長(zhǎng)條件:28-30℃
存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;定期移植法白曲霉