抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱(chēng) Anti-ASIC1/BNaC2/ASIC1A
中文名稱(chēng) 酸敏感離子通道1抗體
別 名 Acid-sensing ion channel 1; ASICs1; Acid sensing ion channel 1; Acid sensing ion channel 1a protein; Acid sensing ion channel; AI843610; Amiloride sensitive cation channel 2 neuronal; ASIC; ASIC1; ASIC1A; B530003N02Rik; BNAC2; Brain sodium channel 2; Cation channel amiloride sensitive neuronal 2; hBNaC2.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Horse
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 58kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ASIC1 C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
下列是酸敏感離子通道1抗體 的相關(guān)熱銷(xiāo)產(chǎn)品:
蘇云金芽孢桿菌猝倒亞種 Bacillusthuringiensissubsp.Sotto
蘇云金芽孢桿菌戈?duì)査沟伦兎N Bacillusthuringiensisvar.kurstakideBarjacetBonnefoi
蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種 Bacillusthuringiensissubsp.galleriaeHeimpel
枯草芽孢桿菌深黑變種 BacillussubtilisVar.aterrimus(LehmannetNeumann)Smithetal.
嗜熱肪芽孢桿菌 BacillusstearothermophilusDonk
日本根霉 RhizopusjaponicusVuillemin
臺(tái)灣根霉 RhizopusformosensisNakazawa
裂褶菌 Schizophyllum commune Fr.
醋酸菌 Acetobacter sp.
蘇云金芽孢桿菌 BacillusthuringiensisBerliner
膽鹽乳瓊培養(yǎng)基250克DHL Agar沙門(mén)氏菌和志賀氏菌的分離培養(yǎng)
慶大霉素瓊250克Gentamycin Agar用于霍亂弧菌的分離培養(yǎng)
抗生素1號(hào)培養(yǎng)基(PH6.5-6.6)250克Antibiotic Agar NO.1磺卞素等的效價(jià)測(cè)定
抗生素1號(hào)培養(yǎng)基(PH7.8.0)250克Antibiotic Agar NO.1鏈霉素、卡那霉素、慶大霉素、克拉霉素、妥布霉素、阿米卡星紅霉素、阿奇霉素等效價(jià)測(cè)定
抗生素3號(hào)培養(yǎng)基250克Antibiotic Agar NO.3藤黃八疊球菌懸液的制備
抗生素4號(hào)培養(yǎng)基250克Antibiotic Agar NO.4兩性霉素B等的效價(jià)測(cè)定
MH瓊250克MHA抗菌素藥物敏感性試驗(yàn)
MH肉湯250克MHB用于抗菌素藥物敏感性試驗(yàn)
抗生素2號(hào)培養(yǎng)基(PH6.5-6.6)250克Antibiotic Agar NO.2四環(huán)素、土霉素等的效價(jià)測(cè)定
抗生素2號(hào)培養(yǎng)基(PH7.8.0)250克Antibiotic Agar NO.2克林霉素、林可霉素等的效價(jià)測(cè)定
抗生素5號(hào)培養(yǎng)基250克Antibiotic Agar NO.5抗生素微生物的效價(jià)測(cè)定
抗生素6號(hào)培養(yǎng)基250克Antibiotic Agar NO.6黏菌素等的效價(jià)測(cè)定
釉基質(zhì)蛋白抗體Ectoine中文名:四氫嘧啶別名:分子式:C6H10N2O2
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體Veratramine中文名:藜蘆胺別名:分子式:C27H39NO2
磷酸化雄激素受體抗體Nicotinic acid中文名:別名:分子式:C6H5NO2
錨定蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白激酶ANKK1抗體Norchelerythrine中文名:去甲基白屈菜紅堿別名:去甲白屈菜紅堿分子式:C20H15NO4
膜粘連蛋白11抗體Aspyridone A中文名:別名:分子式:C19H23NO4
酸敏感離子通道1抗體 RhizopusnigricansEhrenberg種屬:RhizopusnigricansEhrenberg
安全等級(jí):1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:17
生長(zhǎng)條件:25-28℃黑根霉
關(guān)鍵字: 酸敏感離子通道1抗體 ;Anti-ASIC1/BNaC2/ASI;100μg/200μg; 1mg/1ml ;一抗;