"TE-11細胞：人食管癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
GM00637B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neukoplast細胞、L-M(TK-)細胞、alphaTC1 Clone 6細胞
MDAMB330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sarcoma OSteogenic-2細胞、OsA-CL細胞、MADISON LUNG TA-109細胞
SKG3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞
SCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175-VII細胞、SO-RB50細胞、NCI-H1581細胞
RPMI No. 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2081細胞、MDA-MB-231 #4175細胞、SK-OV-3細胞
SUDHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98-G細胞、NEC-8細胞、KP 4細胞
H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞
HCT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-295細胞、CNE1細胞、SK.MEL.28細胞
Me-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM細胞、HO1-N-1細胞、SW837細胞
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞
HEK 293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞
MAntle cell VERona-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL88細胞、PASMCS細胞、Tu686細胞
SUM-149細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAMOS2G64C10細胞、HMEC-1細胞、KYSE-150細胞
H-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
CEM/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2106細胞、DH-82細胞、NK-92.05細胞
NCI-H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞
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BSC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta-519細胞、SNU-119細胞、H69/P細胞
NCIH647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
Capan-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞
KYSE 450細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞
CAL39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-UT-1細胞、RBE細胞、BT-20細胞
KU-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞
Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞
MS 751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA5細胞、BALB 3T3 clone A31細胞、NCI-H520細胞
L 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE-1細胞、HPAF-II/CD18細胞、H711細胞
ssMCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細胞、NCI.H522細胞、AZ 521細胞
JROECL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞
LLC-PK(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Leydig Tumor細胞：-1細胞、mRTEC細胞、HLMVEC細胞
McArdle RH-7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞
C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HaCaT細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、Hs445細胞
Jurkat細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞
PA I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞
HT144-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 436細胞、C6細胞、IHH細胞
HEM-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞
J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
MUM2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞
NPA'87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis-Lung細胞、HBZY1細胞、87 MG細胞
MAVER-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-193細胞、NCI-H2170細胞、SNU-520細胞
COLO 320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞
BMSC/hBMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-398細胞、H-820細胞、251MG細胞
LIPF155C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞
Panc-10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA432_Bast細胞、GP2-293細胞、Rat1細胞
CAL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1846細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、F-81細胞
F442-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞
KYSE50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMVEC細胞、OCI-Ly10細胞、EJ-1細胞
H-1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞
SUM190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞
H-1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞
SKMEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞
OsACL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞
CCRF SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞
Jurkat Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2Z細胞、D-324MED細胞、RIN-m細胞
NCTC1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞
NCTC1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞
NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
Pt K2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse podocyte細胞、MHCC 97-H細胞、KM12細胞
ECGI10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CG4細胞、BDCM細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞
H-2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL-2細胞、Y-79細胞、RN-c細胞
Pt K2 (NBL-5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP69SV40T細胞、Cor L88細胞、NCIH1650細胞
H-2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞
PFSK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC 2.4細胞、Hs-274-T細胞、TK 10細胞
CAL85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞
H-446細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞
G292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb 2細胞、HS940細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞
H-740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 812細胞、H-1436細胞、HNE-2細胞
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C-33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PVEC細胞、NCIH1184細胞、Panc-08.13細胞
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