"KNS-81細胞：人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
GLAG-66細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm 13細胞、RPMI7666細胞、SV-HUC-1細胞
130-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞
293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞
CWR22R-V1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE-SRA-01/04細胞、NG-108-15細胞、CAL12T細胞
C4-2 Bone metastatic細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-82細胞、SW-527細胞、NBL-7細胞
UCLA SO M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞
HMrSV5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL11細胞、NCIH1437細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞
JM-Jurkat細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK-1細胞、TE85細胞、Hs274T細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞
H-2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞
Murine Lung Epithelial-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞
A 172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A427細胞、BEAS2B細胞、Tissue Culture-1細胞
293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc327細胞、BC3 H1細胞、C4-2 B細胞
Intestinal Epithelioid細胞： No. 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx-147細胞、H510A細胞、NIH:OVCAR3細胞
Mel526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-MS細胞、KCL-22細胞、KRC/Y細胞
KE39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT8810細胞、ChaGo K-1細胞、HBE 135-E6/E7細胞
KE39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT8810細胞、ChaGo K-1細胞、HBE 135-E6/E7細胞
TE-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞
C1R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293細胞、UMNSAH-DF1細胞、NOR 10細胞
H2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber H-35細胞、LP-1細胞、NCI-Hut 125細胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞
H-2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML4細胞、HCC827細胞、H-128細胞
293-GP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG 44細胞、SKES1細胞、Panc2.03細胞
SKNO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞
PG-4(S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞
Centre Antoine Lacassagne-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞
P3-x63-Ag8 653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞
AAV293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS1細胞、MLE12細胞、NCIH2171細胞
HS-695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV29細胞、SCC 25細胞、L M (TK-)細胞
NS-1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H661細胞、Tb1Lu細胞、OUMS27細胞
RPMI1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞
MHHCALL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞
HCC1359細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞、LL/2 (LLC1)細胞
CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、HEK-293H細胞、H740細胞
OP-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB-106細胞、RERF-LCMS細胞、Y3-Ag1.2.3細胞
LC1-Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCI1細胞、NBL-2細胞、Pa17C細胞
CT-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Immortal Pig Intestinal-2I細胞、Hs-606-T細胞、A2780/Taxol細胞
BAR-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293F細胞、H22-H8D8細胞、CWR-22rv1細胞
CMT167細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1/1-Ag4.1細胞、LIM-1215細胞、MC/CAR細胞
Swiss 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞
OLN 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co320細胞、NCI-H2452細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞
Balb/3T3-4-Cl31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-5細胞、Tb1.Lu細胞、CHG5細胞
Pa17C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-345細胞、2B4-L細胞、HT 1197.T細胞
NOR 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan1細胞、CTX TNA2細胞、Hut292細胞
PG13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS細胞、MDST8細胞、FRTL-5細胞
NCI-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL12T細胞、GFP-Olig2細胞、MKN-7細胞
ZR75_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞
H-1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞
SW 480細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c 3T3細胞、CAL120細胞、NCI/ADR-RES細胞
CAL-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞
SK-UT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-14細胞、3-LL細胞、HPAEpiC細胞
UPCI:SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha-TC1.6細胞、HP615細胞、EFM-19細胞
CCD1112Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB1RGB細胞、BL6細胞、MV-4:11細胞
MN-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞
AN3CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB 157細胞、C6661細胞、Rat podocyte細胞
RT4-D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye(P-2003)細胞、IAR 20細胞、QSG-7701細胞
RT4-D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye(P-2003)細胞、IAR 20細胞、QSG-7701細胞
SW 1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2817細胞、CBRH7919細胞、MDA231細胞
AML-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU878細胞、KYSE 30細胞、Kelly細胞
DV90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞
AKR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU S細胞、RS 4;11細胞、184A1細胞
MCF7-CTRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞
MDAPC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M07e細胞、H2106細胞、SF539細胞
H4IIEC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、MM1-S細胞、HCC2108細胞
U-2 OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL 1-0細胞、HSAS3細胞、MMQ細胞
RPMI-8226S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCSMC細胞、C32 mel細胞、HT115細胞
RMS 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞
TE-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-20細胞、C33A細胞、HEC1A細胞
WM451細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB 17細胞、EFM19細胞、OCI/AML3細胞
RAMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞
Panc-05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1353細胞、IM-95細胞、DMS79細胞
SK-RC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ34細胞、Huh 7.5.1細胞、GM03571細胞
293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADRRES細胞、JVM3細胞、V-79-4細胞
CORL88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL1細胞、P3-X63Ag8.653細胞、Henrietta Lacks cells細胞
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