"NUGC-3細胞：人胃癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：６傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
LC2/Ad細胞系相關產(chǎn)品：RCM1細胞、McG-1細胞、Hep II細胞
P3JHR-1細胞系相關產(chǎn)品：SV40-MES13細胞、NCI-H920細胞、SKNBE細胞
NuTu 19細胞系相關產(chǎn)品：RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞
MOLT-3細胞系相關產(chǎn)品：HKBML細胞、NE1-E6E7細胞、BEL-7402細胞
MILE SVEN1細胞系相關產(chǎn)品：3T3-A31細胞、HuH7細胞、IFRS1細胞
Hep-G2細胞系相關產(chǎn)品：Emory University-2細胞、FK81細胞、CCC-HSF-1細胞
TSCCa細胞系相關產(chǎn)品：UWB1-289細胞、Hs 863.T細胞、OCI-LY-8細胞
PA1細胞系相關產(chǎn)品：Nb2a細胞、EJ-1細胞、K-562細胞
H2023細胞系相關產(chǎn)品：SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞
Swiss 3T3細胞系相關產(chǎn)品：JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞
Caki-1細胞系相關產(chǎn)品：NPA-87細胞、NCIH929細胞、GM-3573細胞
MPP89細胞系相關產(chǎn)品：HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞
Soleus clone 8細胞系相關產(chǎn)品：Rat Glomerular Endothelial細胞、HT 1080細胞、OCI-LY-10細胞
NCIH847細胞系相關產(chǎn)品：SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞
H322T細胞系相關產(chǎn)品：H676B細胞、MV-522細胞、U138MG細胞
NIH3T3-L1細胞系相關產(chǎn)品：KE 37細胞、Hs294細胞、HCC38細胞
COLO 680N細胞系相關產(chǎn)品：SVG(P12)細胞、J45.01細胞、5637細胞
U-251_MG細胞系相關產(chǎn)品：SKGT4細胞、MDA-MB-134VI細胞、A673細胞
Hs343T細胞系相關產(chǎn)品：Colon 26細胞、HPDLF細胞、FAO-1細胞
GB1細胞系相關產(chǎn)品：COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞
Hmy.2 CIR細胞系相關產(chǎn)品：Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞
SK-RC 52細胞系相關產(chǎn)品：BLO11細胞、McCoy細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞
Tn 5B1-4細胞系相關產(chǎn)品：H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞
HMCB細胞系相關產(chǎn)品：Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MDCKII-WT細胞、NPC-TW 01細胞
Ketr3細胞系相關產(chǎn)品：HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞
H647ell細胞系相關產(chǎn)品：SMMC-7721細胞、C3H10T1/2細胞、OCIAML4細胞
624細胞系相關產(chǎn)品：MCMEC細胞、D10.G4.1細胞、CMT 64細胞
HCC-1588細胞系相關產(chǎn)品：H-2087細胞、ARH77細胞、KU 19-19細胞
Sf21細胞系相關產(chǎn)品：U-251_MG細胞、NHRF細胞、HT-3細胞
NCI.H522細胞系相關產(chǎn)品：PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞
SKRC20細胞系相關產(chǎn)品：C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞
HCE-2 [50.B1]細胞系相關產(chǎn)品：G-401細胞、HRA-19細胞、NCIH378細胞
NE1細胞系相關產(chǎn)品：LS 180細胞、OV-2008細胞、MEC-1細胞
CL34細胞系相關產(chǎn)品：HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞
MESSA細胞系相關產(chǎn)品：M109細胞、KYSE-70細胞、L1210細胞
RS(4;11)細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞系相關產(chǎn)品：L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞
H-226細胞系相關產(chǎn)品：RSC96細胞、CAL 62細胞、NCI-H28細胞
H-1404細胞系相關產(chǎn)品：RPMI.8226細胞、CCC-HSF-1細胞、HTR-8細胞
Vero 76 clone E-6細胞系相關產(chǎn)品：SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞
H1838細胞系相關產(chǎn)品：DCS細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDAMB157細胞
MEC-1細胞系相關產(chǎn)品：HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞
LA 4細胞系相關產(chǎn)品：T/G HA-VSMC細胞、Fao細胞、BC3H-1細胞
NCIN87細胞系相關產(chǎn)品：H1876細胞、NCIH841細胞、NCI-H2405細胞
JS1細胞系相關產(chǎn)品：786-O RCC細胞、GM07404A細胞、CHP-126細胞
KPL-1細胞系相關產(chǎn)品：GM2219C細胞、WC00044細胞、Hs 940.T細胞
P3HRI細胞系相關產(chǎn)品：SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞
MDCK-2細胞系相關產(chǎn)品：Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞
Daudi細胞系相關產(chǎn)品：SW 837細胞、SK-Mel 1細胞、NKM1細胞
UPCI:SCC154細胞系相關產(chǎn)品：PTK1細胞、Lu99A細胞、HSC3細胞
T 98 G細胞系相關產(chǎn)品：FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞
SupB15W細胞系相關產(chǎn)品：SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞
NCIH2030細胞系相關產(chǎn)品：DoHH-2細胞、RH-30細胞、GP2-293細胞
MT-4細胞系相關產(chǎn)品：HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞
JOSK-M細胞系相關產(chǎn)品：SKNO-1細胞、Colo699細胞、HcaF細胞
CRFK細胞系相關產(chǎn)品：TCC-PAN2細胞、JVM3細胞、NCI.H522細胞
HPAF-II細胞系相關產(chǎn)品：Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞
NCIH1876細胞系相關產(chǎn)品：OP-9細胞、HO1-N1細胞、NCI H2106細胞
CL1.0細胞系相關產(chǎn)品：COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
LS174細胞系相關產(chǎn)品：HIBEC細胞、33604細胞、H1838細胞
SJCRH30細胞系相關產(chǎn)品：SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
ECC12細胞系相關產(chǎn)品：HEK-EBNA細胞、U-118 MG細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞
S91細胞系相關產(chǎn)品：EFM192細胞、Walker-256細胞、MDAMB134細胞
Hs 863.T細胞系相關產(chǎn)品：CHO-Lec1細胞、A431細胞、WEHI-231細胞
PL11細胞系相關產(chǎn)品：BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞
MIN6細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1568細胞、10RGB細胞、LS 123細胞
PC-9/GR細胞系相關產(chǎn)品：PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞
OCI-AML2細胞系相關產(chǎn)品：COLO320DM細胞、Panc02.03細胞、HNE1細胞
Hep G2/C3A細胞系相關產(chǎn)品：HeLa-229細胞、GM05887細胞、SK-MEL28細胞
HCC9204細胞系相關產(chǎn)品：BEL 7402細胞、RKO_AS45細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞
RH7777細胞系相關產(chǎn)品：KALS-1細胞、HPAF-2細胞、H-716細胞
Tu-686細胞系相關產(chǎn)品：HEK-AD 293細胞、HEM細胞、P30-OHKUBO細胞
NuTu 19細胞系相關產(chǎn)品：RGE細胞、SK-ChA1細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞
D10細胞系相關產(chǎn)品：ECGI10細胞、Bx-PC3細胞、MCAEC細胞
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