"SK-MEL-5細(xì)胞：人惡性黑色素瘤細(xì)胞系

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞傳代方法：１：３-１：６傳代，２-３天換液１次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過(guò)２０%，因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足，過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購(gòu)買(mǎi)的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。

正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢？沒(méi)錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來(lái)復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開(kāi)始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類(lèi)型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類(lèi)型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類(lèi)型，日期，凍存人等信息，并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō)，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。

細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明：成纖維細(xì)胞：來(lái)自胎兒傳代５０次后衰老死亡，來(lái)自成人傳代２０次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān)；來(lái)自小鼠傳代１４--２８次后衰老死亡，來(lái)自烏龜傳代９０--１２５次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過(guò)程中會(huì)發(fā)生一系列的變化，包括：蛋白質(zhì)合成速度降低，已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化，特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí)，細(xì)胞核，線(xiàn)粒體，膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因，尚無(wú)定論，出現(xiàn)過(guò)好幾種理論與假說(shuō)，其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說(shuō)”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正常現(xiàn)象，常見(jiàn)的細(xì)胞死亡形式有３種：壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中，因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵，導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去，稱(chēng)為細(xì)胞的病理死亡，或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡；細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件，不依賴(lài)于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理，如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況，一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長(zhǎng)、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分；似乎帶有“犧牲局部，保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡，明顯地受遺傳控制，稱(chēng)為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡，是機(jī)體清除無(wú)用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過(guò)程，無(wú)論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來(lái)說(shuō)，都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用，在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象，凋亡失控的結(jié)果將是可怕的：凋亡不足時(shí)，易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過(guò)量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病，如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。

BMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK10細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞、N9細(xì)胞

AN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi 1細(xì)胞、alpha TC1 clone 6細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞

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NCI-H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3396細(xì)胞、H-1417細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞

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SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-104細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞

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WEHI164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 13細(xì)胞、BL2141細(xì)胞、HCC0202細(xì)胞

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NCIH295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TI-73細(xì)胞、NCIH1755細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞

H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：639 V細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞、NOK細(xì)胞

KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1299細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞、C6細(xì)胞

RS4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細(xì)胞、Colo741細(xì)胞、D10G41細(xì)胞

Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW756細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞

BCECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC403細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞

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SHSY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666細(xì)胞、MEF細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞

18G3.cl 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-216細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞

Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21細(xì)胞、VP 267細(xì)胞、KBM5細(xì)胞

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SU-DHL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCoEpiC細(xì)胞、Oka-C1細(xì)胞、TMD8細(xì)胞

Nthy-ori 3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL 1-5細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞

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P-3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE14細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞

SKNEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-LH7細(xì)胞、BV173細(xì)胞、HT3細(xì)胞

GTL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35 Reuber細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞、Colo205細(xì)胞

SW839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-2細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞、SNU182細(xì)胞

2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細(xì)胞、T-47D細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞

CaSki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF2細(xì)胞、EL 4細(xì)胞、KMS26細(xì)胞

OCILY7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-520細(xì)胞、PT-67細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞

TSCC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-756細(xì)胞、M4e細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞

L M (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UT-7細(xì)胞、FRTL-5細(xì)胞、58F細(xì)胞

H69/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo 59J細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞、HFT-8810細(xì)胞

D341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2405細(xì)胞、U20S細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞

McG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞、ECV-304細(xì)胞

RL952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-4:11細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞

RCC-10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2細(xì)胞、HCC0038細(xì)胞、NHLF細(xì)胞

Human Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1975細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞、H-1876細(xì)胞

343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fox/NY細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞

SCC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ls-174-T細(xì)胞、TU 686細(xì)胞、A2780/CP70細(xì)胞

HEK 293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞

TOV112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKHEP-1細(xì)胞、DU145細(xì)胞、Hs683細(xì)胞

SNU-354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 20細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞

NCI-H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepaRG細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞、McA-RH7777細(xì)胞

A9(Hamprecht)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-15細(xì)胞、HCC-1359細(xì)胞、PC-14細(xì)胞

Hs683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1836細(xì)胞、PBL細(xì)胞、HTori3細(xì)胞

SNK6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B1細(xì)胞、H69C細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞

JJN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DrG細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞

SUM190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 780細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞、SCC15細(xì)胞

PC3-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 611.T細(xì)胞、H-647細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞

SCC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1048細(xì)胞、TE7細(xì)胞、SUM-149PT細(xì)胞

ST 486細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-B4G12細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞、BMF細(xì)胞

HEK-293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32Dcl3細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞、BALB/3T3 clone A31細(xì)胞

HS-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-F細(xì)胞、HEK293細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞

APRE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuTu-80細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞

NCI-H1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCSUP細(xì)胞、H1703細(xì)胞、LYR細(xì)胞

H-2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S-16細(xì)胞、hOMF細(xì)胞、BCaP 37細(xì)胞

MDA-MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-126細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞、TW-039細(xì)胞

CHP 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1806細(xì)胞、H-1155細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞

BPH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H711細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞、Hs-746T細(xì)胞

SUIT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRMECs細(xì)胞、PG-4(S+L-)細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞

SU8686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL3A細(xì)胞、PANC-28細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞

Pan02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.5細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞、EHEB細(xì)胞

Malme-3 M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-62細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞

P3X63NS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 30細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞、VP 267細(xì)胞

Leukemia 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293T細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞、U-2OS細(xì)胞

CHG5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2-M17細(xì)胞、OCI-Ly1細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞

MUVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-25細(xì)胞、SHP-77細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞

COLO 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192C細(xì)胞、A427細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞

FRTL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-675-T細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞、HEp-2細(xì)胞

BSC40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATOIII細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞

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