"NCI-H2170細胞：人肺鱗癌細胞系
細胞背景資料：該細胞１９８９年建系，源自一位患有肺鱗狀細胞癌的男性，該患者不吸煙
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３—１：６傳代，３—５天換液１次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?br /> 在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
H1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-14細胞、QGY7703細胞、NE1-E6E7細胞
SKCO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞
Mel-RM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB436細胞、DR2R1610細胞、SCC 4細胞
786.O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2347細胞、Caov-3細胞、NCIH1838細胞
Balb/c 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞
WSU-DLCL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞
TK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞
WM-266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-966SK細胞、T-HSC細胞、MCF-7/ADR-RES細胞
P3HR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU119細胞、KYSE 450細胞、Clone 166細胞
NCI-H510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1755細胞、BE(2)M17細胞、BI-Mel細胞
LC1sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞
SUDHL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞
CAL51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB231細胞、HEK/293細胞、HSC細胞
AML-EOL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS1細胞、FAK+/+細胞、NCI-H2009細胞
HCS2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM-1細胞、CHP126細胞、H-2227細胞
N2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞
N2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞
SNU216細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa 2059細胞、DI-TNC1細胞、HeLa細胞
bEND.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞
HCC9724細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU87細胞、MRAEC細胞、T-47D細胞
CTV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid細胞： No. 6細胞、NEC細胞、PANC.1細胞
MHCC97H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melanoma 14細胞、M-O7e細胞、H2030細胞
HL-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-813細胞、CX-1細胞、KNS62細胞
3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞
ATN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR 10細胞、GM-215細胞、H-727細胞
CCLP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS0578T細胞、P3X63-Ag8.653細胞、F442-A細胞
NCI-H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-1細胞、MHCC97L細胞、NCI-H1668細胞
WM 239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞
C-28I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPPVEC細胞、H-1650細胞、NCI-H1993細胞
EFM19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC78細胞、MC3T3細胞、SKRC-52細胞
SEG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞
KMB-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞
U118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞
SNU-398細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOZ細胞、LICR-HN-6細胞、NF639細胞
L-6 myoblast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30-OHKUBO細胞、SKCO-1細胞、TALL-104細胞
UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCFB（HCF）細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞
N-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK15細胞、MSF細胞、CG4細胞
NCIH2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-62細胞、hTERT-HME-1細胞、SUDHL10細胞
BT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞
Blotchy fibroblast-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mevo細胞、OCI-AML-3細胞、UMC11細胞
MCCAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGHAVSMC細胞、U266 B1細胞、H1437細胞
IAR 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG-108-15細胞、N9細胞、293 F細胞
C33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞
RCC 786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM95細胞、NCI-H1869細胞、T-84細胞
697細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC3細胞、CCD 841 CoN細胞、NCI-H841細胞
HT-1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM1細胞、NCI-H716細胞、KBM7細胞
Hi5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞
Clone 15 HL-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578Bst細胞、CW-2細胞、KU-19-19細胞
NCI-H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 1細胞、HuH-6細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞
SK-N-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDCP-1細胞、NCI N87細胞、CCRF細胞
MDA-MB361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-53細胞、LA4細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞
373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OEC19細胞、MAVER1細胞、NCIH295R細胞
CG4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988s細胞、PLC/PRF/5細胞、HCC1954-BL細胞
Reuber H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞
T-ALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H716細胞、NCIH2342細胞、ReNcell CX細胞
N1E-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：87MG細胞、MDA-MB-175-VII細胞、AML193細胞
CCD 19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞
L929(NCTC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-26細胞、GP-293細胞、AHH1細胞
IBMF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC/mHSC細胞、SW954細胞、L5178-R細胞
4-1st細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HL 60細胞、NCI H548細胞
CV 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hADSCs細胞、BALL-1細胞、Z310細胞
NCL-H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM13細胞、HH [Human lymphoma]細胞、BEAS 2B細胞
HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
NCI H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞
NCI-H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM 637細胞、NT2-D1細胞、PK13細胞
HUCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO細胞、SUD-4細胞、HT-29/CX-1細胞
University of Arizona Cell Culture-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2132細胞、SKBr3細胞、Sp2/O細胞
ME 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、RD 2細胞、IR 983F細胞
BEL-7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
MDCC-MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞
HT144mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB435細胞、RIMEC細胞、Hep3B細胞
GB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 680N細胞、H-1092細胞、OCI-Ly18細胞
Mel-RM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB436細胞、HN6細胞、A-204細胞
DV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)n細胞、BJ [Human fibroblast]細胞、NCI-H1648細胞
"