"NCI-H1915細(xì)胞：人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：每周換液２—３次
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題，見(jiàn)到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，這里說(shuō)一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)，因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過(guò)近３００種細(xì)胞，常用于做實(shí)驗(yàn)的，累積有百余種，可以說(shuō)遇到過(guò)許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開(kāi)始做我的篇專題，并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題，我就拋磚引玉，下面幾點(diǎn)拙見(jiàn)，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究，得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn)，也見(jiàn)到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細(xì)節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識(shí)，如果不對(duì)之處，歡迎指正，總結(jié)下來(lái)，細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細(xì)胞來(lái)源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問(wèn)題，很多時(shí)候bottleneck沒(méi)有找到，雖然通過(guò)其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?，總覺(jué)得自己沒(méi)有經(jīng)驗(yàn)，而忽視試劑，溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量，后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的問(wèn)題。
NB19-RIKEN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MODE-K細(xì)胞、NCI-H2342細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞
B35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-3細(xì)胞、NCI-H1688細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞
CFPAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PJ34細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞、G-402細(xì)胞
Hs1.Tes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hCMEC/D3細(xì)胞、UT7細(xì)胞、RPTEC/TERT 1細(xì)胞
SVEC4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx147細(xì)胞、CORL88細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞
MM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225細(xì)胞、Rabbit Kidney 13細(xì)胞、C3A細(xì)胞
YT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞、SKNMC細(xì)胞
H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu-1細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞
CORL279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN1細(xì)胞、SR細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞
BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC細(xì)胞、H1581細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 134VI細(xì)胞、HOS細(xì)胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞
SF126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMH-2細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞、MKN 7細(xì)胞
AN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373MG細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞、HCM細(xì)胞
B16BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI193細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、MSF細(xì)胞
NCI-H1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-647細(xì)胞、RBL細(xì)胞、RKO細(xì)胞
MES-SA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-12A細(xì)胞、SUNE 1細(xì)胞、6-10B細(xì)胞
MES-SA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-12A細(xì)胞、SUNE 1細(xì)胞、6-10B細(xì)胞
NCIH1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-451Lu細(xì)胞、HUT-125細(xì)胞、OVCAR 433細(xì)胞
COLO320-DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuO9細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞
HeLa-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293T/17細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞
A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341Med細(xì)胞、38C13細(xì)胞、CATHa細(xì)胞
H-441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：769-P細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞、SUM-190PT細(xì)胞
SK MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Colon細(xì)胞、NP69細(xì)胞、HREC細(xì)胞
B16BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI193細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、MSF細(xì)胞
HPMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞
H1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DCS細(xì)胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞、MDAMB157細(xì)胞
HeLa.S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ND7/23細(xì)胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞、BT474細(xì)胞
MIHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS-2/8細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞
HTori3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637A細(xì)胞、MDA330細(xì)胞、P30/Ohkubo細(xì)胞
HEK-293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP-69細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞
Hs 343.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TN5B14細(xì)胞、HKC細(xì)胞、V79-1細(xì)胞
GalK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、HEB細(xì)胞、WiDr細(xì)胞
EOL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2126細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞
NB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HREC細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞、F98細(xì)胞
P3J-HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF1細(xì)胞、HIEC6細(xì)胞、MCF7-GFP細(xì)胞
RS411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2-D1細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞、HEK293-FT細(xì)胞
Turbot Embryonic細(xì)胞：細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAOEC細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞
CCD-841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPF細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞
Lu99A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F1細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞、MBT2細(xì)胞
RPMI 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN8細(xì)胞、CMT64細(xì)胞、TE85細(xì)胞
H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-273細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1376.T細(xì)胞、OVCAR 433細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞
M619細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H498細(xì)胞、PC-10細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞
H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H522細(xì)胞、MEF (CF-1)細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞
H1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T3細(xì)胞、AML193細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞
WM266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT 5A細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞
IPEC-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2細(xì)胞、Det. 562細(xì)胞、ACC-M細(xì)胞
PaTu 8988 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02細(xì)胞、PLC細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞
Nb2-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2444細(xì)胞、L-363細(xì)胞、MFE 280細(xì)胞
R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H510細(xì)胞、Murine Thymic Epithelial細(xì)胞： 1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞
SW-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B35細(xì)胞、RH35細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞
LSECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞、DHL10細(xì)胞
GM03570細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Onda 11細(xì)胞、NIHOVCAR3細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞
HUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FK81細(xì)胞、HuT78細(xì)胞、OSK-1細(xì)胞
C28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO/dhFr-細(xì)胞、Hos TE-85細(xì)胞、526 mel細(xì)胞
ARH77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-9細(xì)胞、SNU407細(xì)胞、P19細(xì)胞
ARH77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-9細(xì)胞、SNU407細(xì)胞、P19細(xì)胞
H-650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC103H細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞
Nakata-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2172細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞
Hep G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa-229細(xì)胞、GM05887細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞
RS4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1688細(xì)胞、H-292細(xì)胞、C-643細(xì)胞
H-1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-28細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞、PT67細(xì)胞
Capan 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-K1細(xì)胞、NCI-H128細(xì)胞、ACC-3細(xì)胞
Balb/c 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACCM細(xì)胞、NRK細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞
SKLMS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC-21H細(xì)胞、PLA 802細(xì)胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞
PK136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS60細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞
AU565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV2細(xì)胞、COLO-741細(xì)胞、RL-952細(xì)胞
RMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB-I細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞、HuT102細(xì)胞
A10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL2細(xì)胞、alphaTC clone 6細(xì)胞、OV90細(xì)胞
RKO-AS-45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC996細(xì)胞、SuDHL 5細(xì)胞、Vero 76 clone E6細(xì)胞
MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Lung細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞
A253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-hTERT細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞
CFPAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PJ34細(xì)胞、SK-NSH細(xì)胞、SACC-83細(xì)胞
P3-X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW403細(xì)胞、TPC1細(xì)胞、Colo699細(xì)胞
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