"NCI-H727細胞：人肺支氣管良性腫瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：每周換液２次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
接收細胞相關(guān)問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復(fù)蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導(dǎo)致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液。【吹打分散細胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液。【分裝稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
SNU668細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Malme-3M細胞、H-446細胞、DU 4475細胞
H1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFSF細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、HBE細胞
NCI-H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 212細胞、LS 174T細胞、WEHI3細胞
CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL120細胞、NOMO-1細胞、Farage OL細胞
HN 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2細胞、EFM-192A細胞、NCI-H1915細胞
MFD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞
L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12PM6細胞、HANK-1細胞、Hs.27細胞
GL261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131細胞、SK-N-MC細胞、HuH-1細胞
786-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞
CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU 1細胞、MARC-145細胞、HCC0827細胞
C41細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
PG-4(S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞
L-540細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO 81-2細胞、NCI-H2405細胞、RL-95-2細胞
COLO320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞
THLE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：7860細胞、SCC90細胞、SNK-6細胞
PF382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5 Cl 2細胞、RWPE1細胞、PC 61 5.3細胞
L 540細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JKT1細胞、RWPE-2細胞、UACC 893細胞
C-Lu65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-2細胞、RCC10細胞、NCIH2009細胞
2PK-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC-3-VGH細胞、MLA 144細胞、A 2780 CP細胞
JiyoyeP-2003細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA SO M14細胞、B5537SKIN細胞、Panc813細胞
LOU-NH-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/AdrR細胞、SUP-M2細胞、C-33-A細胞
E.L.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL9217細胞、HEL299細胞、SVHUC細胞
G-292, clone A141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766.T細胞、SCC-1395細胞、MT4細胞
RH-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
SMA 560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-II細胞、H2444細胞、I90細胞
HEL92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLMEC細胞、MDA157細胞、GM05372細胞
BL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL62細胞、Hs729細胞、HemECs細胞
DrG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1373細胞、OAW42細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞
H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-6細胞、L-929細胞、SW 756細胞
HCT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-295細胞、CNE1細胞、SK.MEL.28細胞
SCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 201細胞、SMA 560細胞、Pt K2細胞
COLO-320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-12細胞、LLCMK2細胞、SSP-25細胞
NCIH2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs840T細胞、Mino細胞、IEC6細胞
C26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞
H22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 70細胞、Y3Ag1.2.3細胞、Glioma 261細胞
H1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB.4細胞、HPBALL細胞、HuTu 80細胞
HOS-MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB1細胞、HUC細胞、H187細胞
CBRH7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞
SK LU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EMT6細胞、LA-N-6(OAN)細胞、NCIH1836細胞
HEI193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD1細胞、138MG細胞、UMNSAH/DF-1細胞
FT-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B104 [Rat neuroblastoma]細胞、ARH-77細胞、NPA87-1細胞
SRS-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC-1細胞、MDA-MB415細胞、UMNSAH-DF-1細胞
LC1sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞
Rat-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞
H-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP-1細胞、UPCI-SCC090細胞、CPAE細胞
BJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞
IAR-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞
1E8-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 7666細胞、RBSMC細胞、LNCaP細胞
Hs 695.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞
RPMI-8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuperTube細胞、ABE­8.1/2細胞、HDMEC細胞
PL9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞
Scott細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS3細胞、SCC 4細胞、SW1116細胞
RPMI-7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQP1細胞、SBC-3細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞
KP-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ES-2細胞、IR983F細胞、P-19細胞
HCC2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞
NCI-H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞
MC3T3-E1 Subclone 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCF細胞、H184A1細胞、CAL 148細胞
MS751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1細胞、EJ 138細胞、HEK-293 c18細胞
SBC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M[TK-]細胞、RPE1細胞、WERI Rb-1細胞
Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞
NUGC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞
293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMC-1細胞、HEK (AD293)細胞、MSB-1細胞
NCI-H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞
RD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACCLM細胞、PANC-10-05細胞、COLO-HSR細胞
OVCAR-432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE細胞、SKMEL24細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞
JIMT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞
Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LU-1細胞、NRK 52E細胞、HT 144細胞
LM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1500細胞、UCLA-SO-M14細胞、H-35細胞
SNU398細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
CAL12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞
Porcine Kidney-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801C細胞、GM03570E細胞、SK UT 1細胞
CHO Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2/BBe細胞、SKNEP細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
NCI-H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 212細胞、A375-SM細胞、SK-MEL-28細胞
HEK-293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2/ATCC細胞、T.T細胞、AU-565細胞
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