"NCI-H747細胞：人盲腸癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２—１：４傳代，每周換液２次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞傳代培養(yǎng)(消化法)標準操作規(guī)程【原理】細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續(xù)生長，同時也將細胞數(shù)量擴大，就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶?！静牧虾驮噭浚?無菌生理緩沖液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分裝于１５ ml無菌離心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回溫；３)新鮮培養(yǎng)基；４)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準備操作】１)預熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴鍋內(nèi)預熱；２)用７５％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；３)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；４)點燃酒精燈：注意火焰不能太小；５)準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；６)取出預熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)；７)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞；８)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。
MM1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞
OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：578T細胞、Epstein-Barr-1細胞、BJA-B1細胞
TE9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569細胞、NCIH838細胞、RPMI-6666細胞
P-36細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT_116細胞、Chinese Hamster Ovary細胞、VM-CUB-1細胞
SPC-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM.C1細胞、BC-024細胞、751細胞
KATO 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WTRL1細胞、L929細胞、HCC1438細胞
Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SSP-25細胞、H6c7細胞、HANK細胞
HuNS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞
Lu-99A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 Ag8細胞、HPAF II細胞、CHO K1細胞
HEM-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞
OCI-LY-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-251細胞、SK-ES-1細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞
AMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Th17細胞、SSP-25細胞、VP303細胞
CL-40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-3細胞、HIBEC細胞、NG108-15細胞
KYSE180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC-96細胞、SU4細胞、JROECL21細胞
Gerner 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 821.T細胞、RT 112細胞、HEK 293A細胞
JAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA-1細胞、BL1339細胞、HEL-92.1.7細胞
JAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA-1細胞、BL1339細胞、HEL-92.1.7細胞
MILE SVEN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-A31細胞、HuH7細胞、IFRS1細胞
RL95-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 166細胞、GM03570細胞、Molm 13細胞
GA10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-322細胞、HCT116/L細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
NCL-H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM13細胞、HH [Human lymphoma]細胞、BEAS 2B細胞
HCT FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞
NG-108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1 [Mouse lung]細胞、CL11細胞、BNL CL.2細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
H-647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225/K6細胞、P3X63 AG 8.653細胞、NRK49F細胞
SKMES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE2細胞、HcerEpic細胞、hFOB1.19細胞
C643細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VCaP細胞、CL1細胞、Hepa1-6細胞
HS-683細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori3細胞、OK-WT細胞、HCC 38細胞
THLE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、EBC-1細胞、NPC-TW039細胞
P19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞
RCC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC4細胞、H2108細胞、P116細胞
AC16 [Human hybrid]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86.86細胞、L2細胞、L23/P細胞
CEM-CCRF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC-8024細胞、A7r5細胞、COLO 320HSR細胞
NCI H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞
VP267細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adult Retinal Pigment Epithelial細胞：-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞
OCM1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：686LN-M4e細胞、C-Lu-65細胞、HUT 226細胞
Pt K2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse podocyte細胞、MHCC 97-H細胞、KM12細胞
LL/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞
KOPN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
Natural Killer-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL15細胞、BEL7405細胞、H-865細胞
BV173細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC-5細胞、RBL.2H3細胞、HS-445細胞
Rat Glomerular Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH747細胞、JeKo-1細胞、NCI747細胞
HuTu-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞
C-33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH740細胞、CEM-T4細胞、PC3M-IE8細胞
CMT-64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞
H-2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3細胞、A549細胞、CCRF CEM細胞
HCS-2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 c18細胞、PVEC細胞、GM03570細胞
NCI H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB9細胞、NK-92.05細胞、J45.01細胞
NTERA-2 clone D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H226細胞、H-226細胞、C81-61細胞
BE2_C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH30細胞、HN4細胞、AE1201細胞
CORL51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1299細胞、CF Pac1細胞、Hs746-T細胞
HCC1359細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞、LL/2 (LLC1)細胞
U-266細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA.hy 926細胞、NCI H508細胞、HCC-1500細胞
MV(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC12(高分化)細胞、WISH細胞、451-LU細胞
PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1838細胞、H157細胞、SK 1細胞
BGC-823細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa17C細胞、7404細胞、H-2106細胞
OSKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞
HELA-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞
GFP-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-RPE細胞、AML 12細胞、NCIH1618細胞
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞
MALME.3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞
GM02132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞
LS-513細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1792細胞、OCIAML4細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞
SVEC 4-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-711細胞、RMG-1細胞、GLC-82細胞
GM637A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910 PM細胞、686LN-M4e細胞、Hs 746.T細胞
EA.Hy926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1770細胞、SCCVII細胞、P36細胞
COLO824細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87MG細胞、G422細胞、H146細胞
DU_145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ETCC-007細胞、FT-293細胞、RCC 7860細胞
Merwin Plasma Cell tumor-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAI細胞、SUM 190細胞、MCF12A細胞
AML-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL 299細胞、HO1N1細胞、NKM1細胞
KU1919細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC9細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、CAKI 1細胞
TE9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569細胞、MDA MB 453細胞、SKMES細胞
TEV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1155細胞、C-4-I細胞、GM02219D細胞
"