"3LL細胞：小鼠肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當(dāng)他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風(fēng)機不能過大，風(fēng)機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
MCF/Adr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞
HuH6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞
H524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN-60細胞、H1781細胞、GM3569細胞
ARPE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞
Panc 10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373-MG細胞、CMT-93細胞、SNUC2A細胞
AMO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞
R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
FRTL-5 Cl 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8.653細胞、HUCEC細胞、MCF-7/AdrR細胞
KYSE30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7/WT細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、HCA7細胞
HUCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO細胞、SUD-4細胞、HT-29/CX-1細胞
VM-CUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞
J774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LuCL4細胞、SKM1細胞、H-2066細胞
MM1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞
K1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H 10T1/2細胞、Hs 742.T細胞、LI7細胞
NCI-H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 1細胞、HuH-6細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞
OCI-Ly 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32Dc3細胞、LA 4細胞、SR-786細胞
OCI-Ly 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32Dc3細胞、LA 4細胞、SR-786細胞
TR-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞
DHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KASUMI6細胞、C22細胞、LM(TK-)細胞
190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888.T細胞、OCM1A細胞、Calu 3細胞
Panc02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞
Karpas299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞
WEHI 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
TGW細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞
U937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi-6細胞、Rat Lung-65細胞、SF 126細胞
Calu-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-378細胞、OP-9細胞、Hs 611.T細胞
Jiyoye(P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞
TGBC-11-TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI7951細胞、J82 COT細胞、LC-1 sq細胞
MRC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞
FLC-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 F10細胞、B95-8細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞
Z310細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI660細胞、NCI-H2122細胞、TE354.T細胞
Vero E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML4細胞、T84細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞
NIT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA 87細胞、Co-115細胞、HCC202細胞
OCI-LY-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-18Co細胞、A-427細胞、NCIH2452細胞
Panc-03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞
A375-SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1623細胞、H-719細胞、OVSAHO細胞
C4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BpRc1細胞、D-341 Med細胞、Hs 888.Lu細胞
MGC803細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780-CP細胞、SK-GT-4細胞、CEM細胞
CWR22-R1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bat lung細胞、MCF-7B細胞、LS-411細胞
Hs742T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo741細胞、CEM-C7細胞、SUM190PT細胞
NCI-H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞
P3JHR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC7細胞、ECC-10細胞、JB6Cl30細胞
Hs 606.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-16細胞、TM3細胞、HDSMC細胞
WEHI-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2170細胞、CCC-HPF-1細胞、SW-900細胞
SHG 44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD-LM-2細胞、Hs840T細胞、RT4-D6P2T細胞
HS-729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、SKNMC細胞、RPMI 6666細胞
Huh-7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-H細胞、NCI-H510細胞、MA104細胞
MB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K2細胞、BT325細胞、HEK-293A細胞
H-1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD15細胞、H-2135細胞、OCI/AML2細胞
L cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C38細胞、CHO-K1細胞、Hep-G2細胞
Beta-TC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞
MDAPCa-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞
Hep 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA細胞、HEK 293FT細胞、HOSEpiC細胞
RPMI No. 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2081細胞、MDA-MB-231 #4175細胞、SK-OV-3細胞
Tu212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞
WIL2 Secreting細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-441細胞、SNU-1細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞
SKNEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-LH7細胞、BV173細胞、HT3細胞
NBLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEF細胞、RT-BM 1細胞、RK 13細胞
NCI-H748細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH 77細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、COR-L26細胞
TE353.SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞
293c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞
CCD-1112sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞
Nakata-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2172細胞、JVM-2細胞、NCIADRRES細胞
143B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM2細胞、Hs-695-T細胞、V 79-4細胞
Hs742T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo741細胞、CEM-C7細胞、SUM190PT細胞
WM-239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞
NCIH1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞
HM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1143細胞、P388D1細胞、SK-Mel 1細胞
SRS-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC-1細胞、Ca9-22細胞、143TK-細胞
Hep 3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JKT-1細胞、H2330細胞、ST486細胞
H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUASMC細胞、NCI-HUT-125細胞、Hmy.2 CIR細胞
OVCA420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML3細胞、NCIH524細胞、UMR106細胞
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