"CAL-27細胞：人舌鱗狀上皮細胞癌細胞系
細胞背景資料：該細胞１９８２年由J. Gioanni建系，源自一位５６歲白人男性的舌頭中倍的病變部位，角蛋白強陽性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：６傳代，２—３天換液一次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。
細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學實驗，細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導致細胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復延X軸Y軸分別水平搖動3次。
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
MLFC細胞系相關產(chǎn)品：Murine Carcinoma-38細胞、Karpas422細胞、MM1細胞
RASMC細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞
Mv.1.Lu細胞系相關產(chǎn)品：YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞
SK-N-DZ細胞系相關產(chǎn)品：A-1847細胞、EC109細胞、BEL 7405細胞
MESSADX5細胞系相關產(chǎn)品：MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞
PLC細胞系相關產(chǎn)品：Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞系相關產(chǎn)品：Hs600T細胞、NCI-SNU-182細胞、NRK clone 52E細胞
HC11 Mammary Epithelium細胞系相關產(chǎn)品：F98細胞、H-1734細胞、4T1.2細胞
HEC-251細胞系相關產(chǎn)品：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
BALL1細胞系相關產(chǎn)品：Wien 133細胞、HEH2細胞、UCLA-SO-M21細胞
HEC-251細胞系相關產(chǎn)品：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
EoL-1 cell細胞系相關產(chǎn)品：Hs746-T細胞、NGP細胞、143BTK-細胞
HBE 135-E6/E7細胞系相關產(chǎn)品：FHL-124細胞、SCC 9細胞、HPMC細胞
L-02細胞系相關產(chǎn)品：H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞
SK-N-BE(2)C細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB157細胞、NCI-H64細胞、J-111細胞
NCI-H647細胞系相關產(chǎn)品：HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid細胞： No. 6細胞
NCI-H647細胞系相關產(chǎn)品：HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid細胞： No. 6細胞
NB-19細胞系相關產(chǎn)品：HREC細胞、PGLH7細胞、F98細胞
SJ-RH30細胞系相關產(chǎn)品：SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞
OKT3細胞系相關產(chǎn)品：TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞
JVM3細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞
MDA436細胞系相關產(chǎn)品：UMR106細胞、HCE-T細胞、Anip 973細胞
NCIH2405細胞系相關產(chǎn)品：H-865細胞、SHG 44細胞、143TK-細胞
SK-GT-2細胞系相關產(chǎn)品：D-407細胞、KP-N-RT-BM-1細胞、H-774細胞
PK-136細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞
Hs-852-T細胞系相關產(chǎn)品：U-343MG細胞、H-295R細胞、ACC2細胞
RPMI1846細胞系相關產(chǎn)品：KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
SKNBE(2c)細胞系相關產(chǎn)品：Melan-a細胞、HCA 7細胞、NCI-H522細胞
KYSE-510細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞
SW-1222細胞系相關產(chǎn)品：SEG1細胞、GTL 16細胞、RCK-8細胞
MDA MB 175 VII細胞系相關產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞
NIH:OVCAR-4細胞系相關產(chǎn)品：HTori:3細胞、HLE-B3細胞、ECC-1細胞
MCCAR細胞系相關產(chǎn)品：TGHAVSMC細胞、U266 B1細胞、H1437細胞
SNU601細胞系相關產(chǎn)品：KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞
L 428細胞系相關產(chǎn)品：SNU475細胞、HCC-1833細胞、QGP1細胞
MOLT3細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H660細胞、P3 (Jiyoye)細胞、293 c18細胞
CX1細胞系相關產(chǎn)品：RH7777細胞、SW 1417細胞、H-716細胞
SK HEP-1細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293-H細胞、HTR8細胞、HTori 3細胞
U-226AR1細胞系相關產(chǎn)品：H-1417細胞、U-937細胞、WML2細胞
HUCEC細胞系相關產(chǎn)品：RKO細胞、SUD-4細胞、HT-29/CX-1細胞
SNU354細胞系相關產(chǎn)品：NCI522細胞、PK (15)細胞、BN-CL2細胞
OCI/AML2細胞系相關產(chǎn)品：BrCL18細胞、CORL26細胞、MDA415細胞
OK-WT細胞系相關產(chǎn)品：BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞
Opossum Kidney細胞系相關產(chǎn)品：SK RC 52細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NHA細胞
Jurkat-77細胞系相關產(chǎn)品：Human fetal lung fibroblast 1細胞、CP-70細胞、686LN-M4e細胞
OE19細胞系相關產(chǎn)品：Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞
Line 870 Emory University-4細胞系相關產(chǎn)品：CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞
SNU484細胞系相關產(chǎn)品：Hs819T細胞、NCIH64細胞、OV-2008細胞
SK-N-BE(2C)細胞系相關產(chǎn)品：MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞
COR L279細胞系相關產(chǎn)品：LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
QSG-7701細胞系相關產(chǎn)品：SW 626細胞、Y3-Ag1.2.3細胞、RPTC細胞
NK10a細胞系相關產(chǎn)品：HuTu 80細胞、UMUC14細胞、SN12PM6細胞
VE細胞系相關產(chǎn)品：GC-2spd(ts)細胞、LM3細胞、EA.Hy926細胞
H-2291細胞系相關產(chǎn)品：SuDHL 4細胞、BCaP-37細胞、HeLa/DDP細胞
BEL-7402細胞系相關產(chǎn)品：5-8F細胞、P-36細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞
C1498細胞系相關產(chǎn)品：EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞
C1498細胞系相關產(chǎn)品：EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞
L-M(TK-)細胞系相關產(chǎn)品：GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞
SLK細胞系相關產(chǎn)品：SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞
KPL4細胞系相關產(chǎn)品：GT1-1細胞、WML2細胞、ABC1細胞
OVCAR-8/ADR細胞系相關產(chǎn)品：Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞
T1-73細胞系相關產(chǎn)品：PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞
HRPEpiC細胞系相關產(chǎn)品：HDQ-P1細胞、RSC-364細胞、QBI-HEK 293A細胞
Anip[973]細胞系相關產(chǎn)品：B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞
DoTc2細胞系相關產(chǎn)品：Hs 688(A).T細胞、FU-OV-1細胞、MV4:11細胞
HN13細胞系相關產(chǎn)品：16-HBEo細胞、B16 F10細胞、R 1610細胞
SK-MEL-2細胞系相關產(chǎn)品：SNU638細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞、CCD 841 CoN細胞
PMVEC細胞系相關產(chǎn)品：BC3H1細胞、FM-88細胞、RMS1598細胞
HCC-1833細胞系相關產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
HSC 3細胞系相關產(chǎn)品：P1-Raji細胞、YES2細胞、SNU368細胞
VE細胞系相關產(chǎn)品：GC-2spd(ts)細胞、ID8細胞、CCD 966 SK細胞
KYSE 140細胞系相關產(chǎn)品：KU19-19細胞、HCC1954-BL細胞、PC3細胞
Mv.1.Lu細胞系相關產(chǎn)品：YAC細胞、YES 2細胞、UWB1-289細胞
SNU-668細胞系相關產(chǎn)品：GM03571細胞、SKO3細胞、SKM-1細胞
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