"MHCC97-H細胞：高轉(zhuǎn)移人肝癌細胞系
細胞背景資料：來源于中山醫(yī)院，用人肝癌細胞株MHCC９７-H接種裸鼠，進行３次肺轉(zhuǎn)移篩選，取肺轉(zhuǎn)移瘤建成皮下接種后高度自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移的肝癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?br /> 在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
PC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞
Panc 5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WBF344細胞、CA-OV-3細胞、MESSA Dx5細胞
KYSE 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞
Hs-343-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL83B細胞、RCK-8細胞、HCT FET細胞
KLN205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S 3細胞、ES-2細胞、H9c2 (2-1)細胞
High-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH446細胞、CL-40細胞、HCC-1359細胞
MILE SVEN 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞
2BS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞
639 V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD18細胞、V-79-4細胞、FCCH1024細胞
H-3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1080細胞、RL95細胞、B16-F10--RED細胞
SK-UT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-14細胞、3-LL細胞、HPAEpiC細胞
U-343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞
NOMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-O細胞、CII細胞、HEK293T/17細胞
SAOS 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞
MDA-MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-126細胞、NCI-H1184細胞、TW-039細胞
CA922細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞
CA922細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞
Jiyoye (P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1299細胞、COS1細胞、HMCB細胞
B16-F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/mIL-6細胞、HEK293-A細胞、EU-4細胞
Hs888T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4 I細胞、LPC-H12細胞、GOS3細胞
HSC-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69細胞、Co 205細胞、HKC細胞
B95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 32.T細胞、CoC1細胞、118MG細胞
TSCC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-756細胞、M4e細胞、HuP-T4細胞
Strain KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-T CEM細胞、RPMI 8226細胞、H-1792細胞
NCI-H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 88 D1細胞、MCF.10A細胞、BCAP37細胞
C3H10T1/2 clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-1細胞、MCF10A細胞、NCIH322細胞
U937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi-6細胞、Rat Lung-65細胞、SF 126細胞
HSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2081細胞、Nb2細胞、HUCEC細胞
alpha TC1.6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1N1細胞、MIN-6細胞、BC-024細胞
BC-025細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos G6.C10細胞、Human Microglia Clone 3細胞、NCI-H748細胞
YES 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞
NCI-H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞
GCT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL-3A細胞、M1細胞、EFM-192B細胞
MAVER1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞
MDA157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mink Lung細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、UCLA NPA-87-1細胞
NCIH1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 1034細胞、IEC18細胞、Opossum Kidney細胞
X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H187細胞、SW 1783細胞、H1930細胞
PMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H1細胞、FM-88細胞、RMS1598細胞
RD-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 675.T細胞、MDA453細胞、MES-13細胞
BE2M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞
NCI-H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
JROECL 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BI-Mel細胞、KRC Y細胞、HBSMC細胞
EFM192C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞
COLO-699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞
BHP 10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
H-1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞
RPMI-7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQP1細胞、SBC-3細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞
GM0637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞
MIN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC090細胞、DCS細胞、Caov-4細胞
Adeno-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-LCD細胞、TSCC1細胞、8402細胞
TE-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien-133細胞、Daudi細胞、Wien 133細胞
OCI-Ly 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
Hs 888Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞
L-428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLS細胞、SKGIIIA細胞、SNU-638細胞
SCLC21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞
ES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML5細胞、ChaGo-K1細胞、32D/cl3細胞
NRK49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN4741細胞、GM04678細胞、3T3-L1 ad細胞
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞
Tb 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF.10A細胞、BEL 7402細胞、NHRF細胞
MAVER1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞
TFK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞
H1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFSF細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、HBE細胞
HCC-2935細胞系相關(guān)產(chǎn)品：746T細胞、MOLT4細胞、253JBV細胞
RPMI 1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca Ski細胞、BIU-87/Adr細胞、GM637A細胞
MLMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞
184A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞
Hep-G2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1-6細胞、BJA-B-1細胞、aTC1-6細胞
LNCaP-FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL26細胞、NCI-H250細胞、RA 1細胞
LTEP-sm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H146細胞、293/EBNA細胞、HFL-I細胞
SF-539細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCCVII細胞、HCC4006細胞、UMR 106細胞
MOLP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231細胞、Ly18細胞、MG-63細胞
B16 BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC2細胞、NCIH1581細胞、KMS-11細胞
KYSE 270細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP92細胞、LY-R細胞、EB2細胞
GA-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ball 1細胞、FRO細胞、HEL 299細胞
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