"Calu-1細(xì)胞：人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：消化１０分鐘。１：２。３-４天長(zhǎng)滿
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
接收細(xì)胞相關(guān)問題：如不能在收到細(xì)胞后及時(shí)操作細(xì)胞，T２５及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時(shí)將細(xì)胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請(qǐng)即刻復(fù)蘇細(xì)胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時(shí)使部分因運(yùn)輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細(xì)胞在運(yùn)輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細(xì)胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞(絕大部分１min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-３細(xì)胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個(gè)細(xì)胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
BHK 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-1細(xì)胞、LLC細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞
F56 [Human neoplasm]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-11細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞
HuLEC-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-M細(xì)胞、OCI-AML-5細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞
NB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HREC細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞、F98細(xì)胞
NT2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GAK細(xì)胞、NL20SV細(xì)胞、D10細(xì)胞
D-283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS1細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞
CAL-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 678細(xì)胞、WM451細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞
PLA801D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388-D1細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞
A-375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647ell細(xì)胞、A.704細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞
FCCH1018細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP 229細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞
High Five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLN-205細(xì)胞、SW-48細(xì)胞、D-341細(xì)胞
Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-8細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞
HCC-4006細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU869細(xì)胞、H-841細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞
BSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta-519細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞、H69/P細(xì)胞
NCI-H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMDC細(xì)胞、HOS-TE85細(xì)胞、M619細(xì)胞
U-CH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL33細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞
U-CH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL33細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞
Hs 274.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU.812細(xì)胞、HECV細(xì)胞、NCIH23細(xì)胞
Hs 737.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 F細(xì)胞、BT細(xì)胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞
KYSE450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM 6細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞、KMBC細(xì)胞
N1S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2 cl.D1細(xì)胞、373MG細(xì)胞、RCF細(xì)胞
H 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
EM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb-1細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞、CNE-2細(xì)胞
Vx2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：697細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞
L-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L02細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞、HOS-143B細(xì)胞
SK-N-BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB157細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞、J-111細(xì)胞
High Five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLN-205細(xì)胞、SW-48細(xì)胞、D-341細(xì)胞
Hela-Ap-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2/ad細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞、MKN1細(xì)胞
RIN-m 14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1783細(xì)胞、SHG44細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞
FHs74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRC-99細(xì)胞、Med 283細(xì)胞、LO2細(xì)胞
SK-N-MC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-02細(xì)胞、TE354T細(xì)胞、MDA-MB231細(xì)胞
HO8910細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1B細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞、H-2330細(xì)胞
Hs 739.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138-MG細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞
L02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1651細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞、B958細(xì)胞
SKOV-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1703細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞、MC-26細(xì)胞
NCI-H1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26-clone 25細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC PRF 5細(xì)胞、HuT-102細(xì)胞、GM02219細(xì)胞
kms 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hopkins-92細(xì)胞、293-EBNA1細(xì)胞、H-1155細(xì)胞
PLA-801C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL124細(xì)胞、BTT739細(xì)胞、PC-3細(xì)胞
MC 3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE1細(xì)胞、WBF344細(xì)胞、OE19細(xì)胞
Ku812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：159PT細(xì)胞、GC-2細(xì)胞、CD-18細(xì)胞
U138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT3細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞
hTERT-HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA細(xì)胞、HGF-1細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞
HCC1187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARIP細(xì)胞、BNL.CL2細(xì)胞、MM6細(xì)胞
CAL851細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPA 47細(xì)胞、SNU216細(xì)胞、hTERT-RPE-1細(xì)胞
KBM7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3A細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞
C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSF細(xì)胞、SW-962細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞
HEC1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 2細(xì)胞、MIMVEC細(xì)胞、OE-21細(xì)胞
CO115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.5細(xì)胞、PECAPJ34細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞
ME 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、RD 2細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞
LNCaP.FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-19細(xì)胞、B10BR細(xì)胞、SW-1417細(xì)胞
DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-1細(xì)胞、CAL-51細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞
SK-MES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：624-mel細(xì)胞、BBE細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞
NCIH2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE細(xì)胞、CFPAC1細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞
LNCaP-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL26細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞、RA 1細(xì)胞
H-865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7.5細(xì)胞、A20細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞
LIM 1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87細(xì)胞、DF1細(xì)胞、H1573細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM TK negative細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞
WIL2S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW細(xì)胞、HOC細(xì)胞、SF-539細(xì)胞
CaES-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA453細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞、H211細(xì)胞
P3-X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac 6細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞
TE3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266B1細(xì)胞、HOSEpiC細(xì)胞、A172細(xì)胞
NTera 2/cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1155細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞
EAhy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86_86細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞、huH 1細(xì)胞
BIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1563細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞
EOMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞、H-548細(xì)胞
Functional Liver Cell-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OK-WT細(xì)胞、BC-3H-1細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞
SUDHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F-81細(xì)胞、Porcine Kidney-13細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞
H69/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo 59J細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞、HFT-8810細(xì)胞
OS-732細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6T-CEM細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞、M-1細(xì)胞
SNU387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3L1細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞、PLA802細(xì)胞
Colon 26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye (P-2003)細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞、Neukoplast細(xì)胞
Huh-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCM細(xì)胞、HS-940-T細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞
SKMEL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞、OAW42細(xì)胞、Ly3細(xì)胞
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