"NCI-H441細胞：人肺腺癌細胞系
細胞背景資料：NCI-H４４１建系于１９８２年（A.F.Gazdar，etal.)。該細胞分離自一名肺腺癌患者的心包液。該細胞能在半固體瓊脂糖中形成克隆，并能表達肺泡表面活性蛋白A。該細胞在有血清培養(yǎng)基中倍增時間為５８小時，在無血清培養(yǎng)基中倍增時間為９９-１３８小時。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３傳代,２-３天傳一代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
解凍細胞出現(xiàn)大量細胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下：１)冷凍時細胞密度過低：推薦的解決方案：縮短解凍過程中的時間。將細胞取出后，立即將凍存管浸入在３７℃的水浴中，并震蕩至全部融化，然后迅速地轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的培養(yǎng)基中；２)不適當?shù)睦鋬鲞^程：推薦的解決方案：解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當?shù)募夹g(shù)，并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下：１)培養(yǎng)瓶的大小：一般解決方案是一些細胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中，使細胞密度上升；如，根據(jù)培養(yǎng)基的體積，從T７５培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到２或３個T２５培養(yǎng)瓶中；２)細胞密度過低：通常解決方案是提高未來冷凍物種細胞的凍存密度，或使用較小的培養(yǎng)容器，或解凍多個試管來進行培養(yǎng)。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
EAC-E2G8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR3細胞、TM-3細胞、A9 (Hamprecht)細胞
OVISE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954BL細胞、H2087細胞、HM細胞
N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞
hTERT-RPE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA'87細胞、MEG-01細胞、Adeno-293細胞
KYSE-270細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA 38細胞、NCI-H2108細胞、GM02132C細胞
Kit 225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
AML-EOL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS1細胞、FAK+/+細胞、NCI-H2009細胞
Colo320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF/5細胞、RBL-I細胞、TERT-RPE1細胞
Capan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-1細胞、SNU-520細胞、RPMI1846細胞
KS-1 [Human glioblastoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7405細胞、BC-021細胞、TE-7細胞
Calu6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ra #1細胞、RPMI8402細胞、HEK-A細胞
PC 61 5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞
JEG-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-295R細胞、GM02131A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞
HOP 92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr/S細胞、624mel細胞、DI-TNC1細胞
NCIH748細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375S2細胞、Central Adrenergic TH-expressing a細胞、SUDHL-10細胞
OCI/AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞
OCI/AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞
OVCA5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-10-05細胞、ML2細胞、MDA-MB-134-VI細胞
Fetal Bovine Heart Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT22細胞、U 266細胞、PLCPRF5細胞
Human Microglia Clone 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2108細胞、SCL2細胞、32Dcl3細胞
NCIH524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SDBMSC細胞、MDA-415細胞、Kit225細胞
SHG 44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD-LM-2細胞、Hs840T細胞、RT4-D6P2T細胞
HPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW780細胞、Hs-600-T細胞、PAMC82細胞
2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T241細胞、1301細胞、SK-Col-1細胞
751-NA-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA-560細胞、SW 480細胞、KYSE 70細胞
NCIH1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞
Hs 746.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞
PTK 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 699細胞、NS1-Ag4/1細胞、hCMEC/D3細胞
hCMEC/D3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞
PL 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK 13細胞、HC-11細胞、Human Embryo Lung-1細胞
T173細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-G2/C3A細胞、GOS3細胞、SUNE-1細胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
Hepa 1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2122細胞、UCH-1細胞、OCM1細胞
Hi5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞
CAL-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞
NIE-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRASMC細胞、Hs852細胞、L5178Y細胞
DR2R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞
OSC-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2_C細胞、MDA 1386細胞、CL 1-0細胞
MM1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞
Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞
HEP3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞
KS-SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-668細胞、Mink Lung細胞、Nthy-ori 3-1細胞
NCI-H1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞
NK-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞
OVCAR8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLA4 Ig-24細胞、RBL-2H3細胞、LN229細胞
HepaRG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/O細胞、HRVEC細胞、HEMCSS細胞
SW 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD18Co細胞、UMUC-14細胞、CAOV4細胞
IOSE80UBC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL1細胞、SW 962細胞、NCIH2141細胞
Namalwa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 253細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞、Mc Ardle 7777細胞
H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 299細胞、87MG細胞、MA 104細胞
Clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1Lu細胞、HET1A細胞、N1E-115細胞
H-2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞
3 LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞
NCIADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞
HCT/Taxo1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞
Caco2-BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞
Caco2-BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞
Caco-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1 myeloid leukemia細胞、HLF細胞、J774細胞
SW 1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2817細胞、CBRH7919細胞、MDA231細胞
Farage Original Line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞
NE1-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU668細胞、H-1105細胞、MOLT 4細胞
C4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE80UBC細胞、HeLa S 3細胞、COR-L88細胞
NB-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-125細胞、HCC-1438細胞、HT clone H9細胞
RCM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-82細胞、RMS 1598細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞
Adeno-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-LCD細胞、TSCC1細胞、8402細胞
MDA157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mink Lung細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、UCLA NPA-87-1細胞
CNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPBALL細胞、SUSM1細胞、IA-LM細胞
GM00346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞
RCC10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞
H-524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04細胞、FC33細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞
KYSE 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2108細胞、PT67細胞、OVCAR 432細胞
KLN 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175細胞、NCIH661細胞、HCC-38細胞
N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDSMC細胞、TM3細胞、HCC 2185細胞
BEL 7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 837細胞、HPaSteC(HPSC)細胞、H460細胞
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