"SNU-387細(xì)胞：人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞接收操作說明：請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說明及相應(yīng)的細(xì)胞說明書。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)來說，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細(xì)胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時(shí)T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會(huì)長(zhǎng)得很慢，嚴(yán)重的，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng)，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶?jī)?nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營(yíng)養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞(絕大部分１min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-３細(xì)胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個(gè)細(xì)胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-273細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞
NCI H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 38細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞
TOV-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-626細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞
SCCVII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG ATCC細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞、SiHa細(xì)胞
BRL 3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK細(xì)胞、UO.31細(xì)胞、HCC1954BL細(xì)胞
H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K1細(xì)胞、P388細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞
HTori 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.653細(xì)胞、MEC1細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞
PLMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞、HTh-74細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞
Calu 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-1-Lu細(xì)胞、SW780細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞
SN12PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO679細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞
Hs 675.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PanC1細(xì)胞、KYSE-270細(xì)胞、NHEK細(xì)胞
RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUC-1細(xì)胞、HCC1806細(xì)胞、GM 2132細(xì)胞
HEK/EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K 562細(xì)胞、HT3細(xì)胞、NCI-H1693細(xì)胞
Nb2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4I細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞
SNU761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1694細(xì)胞、H1755細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞
SNU449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、NCI-H1975細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞
SNU449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、NCI-H1975細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞
NCI H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159細(xì)胞、J82COT細(xì)胞、CCRF-CEM細(xì)胞
NCIH187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774.A1細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞
MDA-MB-134-VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB436細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞
Hs 888.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT細(xì)胞、PL12細(xì)胞、P3J細(xì)胞
KBM7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3A細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞
MFD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC-4細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞
RAT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat 2細(xì)胞、Walker256細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞
SW-1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞、MODE-K細(xì)胞
AR42J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L88細(xì)胞、TI-73細(xì)胞、HeLa S 3細(xì)胞
HEK-293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F10細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞、High 5細(xì)胞
MiaPaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW-039細(xì)胞、FET細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞
HCC1806細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA420細(xì)胞、GM03569細(xì)胞、COV-434細(xì)胞
SJSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12T細(xì)胞、MHCC-LM3細(xì)胞、Th17細(xì)胞
T1-73細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PM6細(xì)胞、C12細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞
LL/2(LLc1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL/IU細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞
NSC-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMK細(xì)胞、FRhK-4細(xì)胞、SKRC 39細(xì)胞
BIC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1048細(xì)胞、TR 146細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞
Panc327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-1細(xì)胞、BEL-7402細(xì)胞、COLO-320HSR細(xì)胞
T-HEECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-HEK 293A細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞、MDA134細(xì)胞
SUP-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 7951細(xì)胞、Hep-G2細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞
H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAKIKI Clone 1細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞、CACO2細(xì)胞
LA795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero from pool #76細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞
SKCO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-1E8細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞、RBVEC細(xì)胞
HGBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS-2B細(xì)胞、MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞
H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞
SUDHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H345細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞、H-676B細(xì)胞
EBTr (NBL-4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep3B細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、HHL5細(xì)胞
HK-2 [Human kidney]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞、H-522細(xì)胞
QBI-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G401細(xì)胞、C33-A細(xì)胞、Hs729細(xì)胞
P3/ag細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECCL-1細(xì)胞、NCI-HUT-292細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞
Hi-five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh-74細(xì)胞、CAL851細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞
Walker256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細(xì)胞、kms 11細(xì)胞、624mel細(xì)胞
3 LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞、GM03671細(xì)胞
HTSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM-1215細(xì)胞、Ej138細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞
COLO 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192C細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞
NCI-H1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2141細(xì)胞、MV 3細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞
NCTC 3960細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞、JAR細(xì)胞
H-2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-11細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞
C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLM8細(xì)胞、TE13細(xì)胞、RPMI-8226細(xì)胞
C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLM8細(xì)胞、TE13細(xì)胞、RPMI-8226細(xì)胞
CATH-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M210B4細(xì)胞、HCFB（HCF）細(xì)胞、Hs-688A-T細(xì)胞
C-Li-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-780細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞、KU 812F細(xì)胞
LL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF 1細(xì)胞、HL-60細(xì)胞、SW 1116細(xì)胞
RMG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-280細(xì)胞、NCI-H2110細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞
ACHN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV 29細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞
R 2 C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841-CoTr細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞、HCEC-12細(xì)胞
MDA.MB.231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 203細(xì)胞、VP267細(xì)胞、KY70細(xì)胞
SKMEL28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 05.04細(xì)胞、Pt K1細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞
Calu 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-1-Lu細(xì)胞、SW780細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞
R 2 C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841-CoTr細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞、HCEC-12細(xì)胞
GLC-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2C12細(xì)胞、NCI-H292細(xì)胞、1E8-H細(xì)胞
293/EBNA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_FI細(xì)胞、Ly3細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞
MONO-MAC 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2135細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞
130 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2106細(xì)胞、D407細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞
Kuramochi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-4細(xì)胞、GM00215細(xì)胞、MiaPaCa2細(xì)胞
TOV-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-626細(xì)胞、143B細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞
GM637A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2171細(xì)胞、MLE12細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞
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