"LS174T細胞：人結(jié)直腸腺癌細胞系
細胞背景資料：LS １７４T是LS １８０ (ATCC CL １８７)結(jié)腸腺癌細胞株的胰蛋白酶化變種。 它比親本更易傳代，象LS １８０一樣生成大量的癌胚抗原(CEA)。 電鏡研究表明有豐富的微絲和細胞質(zhì)粘液素液泡。 直腸抗原３陽性。 p５３抗原表達陰性，但mRNA表達陽性。 與ATCC CL-１８７來源于同一個腫瘤。LS １７４T細胞角蛋白染色陽性。 癌基因c-myc, N-myc, H-ras, N-ras, Myb, 和 fos的表達呈陽性。 癌基因k-ras和sis的表達未做檢測。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
解凍細胞出現(xiàn)大量細胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下：１)冷凍時細胞密度過低：推薦的解決方案：縮短解凍過程中的時間。將細胞取出后，立即將凍存管浸入在３７℃的水浴中，并震蕩至全部融化，然后迅速地轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的培養(yǎng)基中；２)不適當(dāng)?shù)睦鋬鲞^程：推薦的解決方案：解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當(dāng)?shù)募夹g(shù)，并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下：１)培養(yǎng)瓶的大?。阂话憬鉀Q方案是一些細胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中，使細胞密度上升；如，根據(jù)培養(yǎng)基的體積，從T７５培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到２或３個T２５培養(yǎng)瓶中；２)細胞密度過低：通常解決方案是提高未來冷凍物種細胞的凍存密度，或使用較小的培養(yǎng)容器，或解凍多個試管來進行培養(yǎng)。
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液。【分裝稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
BALB/c 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVHUC細胞、SUM-159細胞、H-1573細胞
BS-C-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87-MG細胞、RCC-4細胞、H-1693細胞
SF 763細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2131細胞、RD細胞、HT-29細胞
As-PC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435-S細胞、U373細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
Rat Lung-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞
HCC1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、NL-20細胞、MDCK-II細胞
D324 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL細胞、FHCRC-11細胞、PANC0504細胞
KU-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞
Intestinal Porcine Epithelial細胞：-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞
CCD-33Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞
Ls-174-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H87細胞、MC-CAR細胞、RMS13細胞
VP303細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞
NCIH522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞
VERO76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3CA細胞、SCC090細胞、CAKI.1細胞
CCD-841CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPF細胞、Tsup-1細胞、hTERT-RPE細胞
HFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞
HFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞
M14-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞
HR8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞
FAK+/+細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞
P3/X63/Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-5細胞、CTLL2細胞、CD18/HPAF細胞
KTCTL-140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C518細胞、COLO 684細胞、H-1954細胞
SUNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞
CL 1-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT-8810細胞、U373-MG細胞、NCI-H292細胞
BAC1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD-2細胞、HBVP細胞、VB細胞
LX-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞
Glioma-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞
293AD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AHH-1細胞、GC-1spg細胞、UCLA-SO-14細胞
HN4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞
E304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞
CHP-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞
KBM-7/Hap8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP3B2細胞、GCT0404細胞、4T1-A細胞
TE-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-20細胞、C33A細胞、HEC1A細胞
Case 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2106細胞、BGC823細胞、H1666細胞
786-O RCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA 560細胞、Murine Carcinoma-38細胞、VK2/E6E7細胞
HIEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04679細胞、SW1573細胞、RPMI2650細胞
NCI-Hut 125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R1800[RA]細胞、NMCG-1細胞、Strain V細胞
ZR75-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB-1細胞、SF126細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞
A 253細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31 FUJ細胞、HFLS-RA細胞、FOXNY細胞
NCIH1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-JF細胞、D283細胞、SK-OV-433細胞
ECV304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞
H-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
CHP100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞
3T3(A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞
FL-83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW954細胞、Hi-5細胞、MDA175細胞
SK-ChA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL細胞、PC-3細胞、TOV-112D細胞
RPMI 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC1細胞、A204細胞、Intestinal Epithelioid細胞： No. 18細胞
U-251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-962細胞、RPTEC TERT1細胞、Hs840T細胞
VP303細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞
U373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE85細胞、C127細胞、CHP126細胞
CT-26 WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 697細胞、CAL33細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial細胞：-19細胞
UACC 812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞
CL 1-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT-8810細胞、U373-MG細胞、NCI-H292細胞
H3255_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞
H-735細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/Ohkubo細胞、LS 1034細胞、IPAM-WT細胞
U87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F56 [Human neoplasm]細胞、Chinese Hamster Lung細胞、NCI-H929細胞
NIH:OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly8細胞、CHL-1細胞、DK-MG細胞
Wayne State University-Head and Neck 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-4細胞、ND7/23細胞、H1792細胞
QBC939細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA-19細胞、TE9細胞、C518細胞
HT 1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞
L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PMVEC細胞、DU-4475細胞、NCI-SNU-668細胞
Centre Antoine Lacassagne-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞
NR8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAPI細胞、WM 451-Lu細胞、HEK293細胞
GM07404A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU407細胞、HTori-3細胞、CTLL(2)細胞
ST2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R D細胞、RS4:11細胞、Hs675細胞
LY-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞
HSAS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hEM15A細胞、NSH細胞、rHSC-99細胞
HeLa/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞
HL-60 Clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞
H-2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-12細胞、LM2-4175細胞、PK (15)細胞
HSC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP 92細胞、SRA01/04細胞、D283MED細胞
SF 763細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2131細胞、GM03671C細胞、OCI-Ly10細胞
Hs606細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARAB細胞、AsPC-1細胞、Rat-1細胞
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