"HEL 299 人紅白細胞白血病細胞系
細胞背景資料：紅白細胞白血病 
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣 
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。 
細胞生長：懸浮 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
HEL 299 人紅白細胞白血病細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不好，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進行預吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意，結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：懸浮 
HEL 299 人紅白細胞白血病細胞系
細胞消化過程總結：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了，細胞之間的附著也已經消失了，細胞已經獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
Hep 2細胞系相關產品：RA細胞、HEK 293FT細胞、HOSEpiC細胞 
SW 403細胞系相關產品：NBL_S細胞、4T1-LUC細胞、A375細胞 
Hs 343.T細胞系相關產品：TN5B14細胞、HKC細胞、V79-1細胞 
Lu99A細胞系相關產品：B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞 
Anip-973細胞系相關產品：D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞 
MES-SA Dx5細胞系相關產品：Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞 
Earles's cells細胞系相關產品：BC3 H1細胞、OCI-LY-8細胞、NCI-SNU-C2B細胞 
NCI-H2107細胞系相關產品：MCF-7/ADR-RES細胞、COLO206F細胞、K422細胞 
H1836細胞系相關產品：H-1581細胞、MUGCHOR1細胞、GM00215A細胞 
H-446細胞系相關產品：U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞 
hRMECs細胞系相關產品：HSAS4細胞、LSECs細胞、NCI-H1672細胞 
FAK+/+細胞系相關產品：NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞 
BAR-T細胞系相關產品：HEK-293F細胞、H22-H8D8細胞、CWR-22rv1細胞 
NCI-SNU-1細胞系相關產品：HCC-78細胞、MGSMC細胞、MH7A細胞 
HS-294細胞系相關產品：KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞 
SK-BR3細胞系相關產品：MKN-74細胞、DMS-114細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞 
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HCC827細胞系相關產品：CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞 
NCIH1395細胞系相關產品：C2-C12細胞、MH-S細胞、BJAB-1細胞 
HT144-mel細胞系相關產品：MDA MB 436細胞、C6細胞、IHH細胞 
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TR-146細胞系相關產品：MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞 
T2(174 x CEM.T2)細胞系相關產品：PANC.1細胞、H295R細胞、CNE2Z細胞 
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NCTC 3960細胞系相關產品：MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、HOS/MNNG細胞、JAR細胞 
COLO206F細胞系相關產品：TC7細胞、INS1細胞、MonoMac6細胞 
FU-97細胞系相關產品：NCl-H157細胞、MAD109細胞、Hs819T細胞 
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Karpas-299細胞系相關產品：HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞 
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Lewis-Lung細胞系相關產品：NCIH187細胞、CCRF細胞、HCC-1954細胞 
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BC-024細胞系相關產品：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞 
CSQT-2細胞系相關產品：Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞 
Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞系相關產品：NCIH1755細胞、NCI H69細胞、WEHI-3B細胞 
H-2029細胞系相關產品：NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞 
BEL-7405細胞系相關產品：H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞 
HS940細胞系相關產品：Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞 
Detroit562細胞系相關產品：NALM-6細胞、OE-33細胞、UCD-MLA-144細胞 
MKN-7細胞系相關產品：KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞 
TC-1[JHU-1]細胞系相關產品：OCI/AML5細胞、BEL/FU細胞、MLA 144細胞 
SF-763細胞系相關產品：CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞 
C4 I細胞系相關產品：Alexander cells細胞、CWR-22rv1細胞、CC-LP-I細胞 
HPAF-2細胞系相關產品：L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞 
Vero細胞系相關產品：H3255細胞、A-375SM細胞、32D.3細胞 
NCI-H661細胞系相關產品：MDA-MB-231細胞、NCI H295R細胞、RetroPack PT67細胞 
DMS 273細胞系相關產品：AN-3細胞、OCI-Ly7細胞、Hs940-T細胞 
RKO細胞系相關產品：WM451Lu細胞、SKML-28細胞、HSC（Human Schwann）細胞 
16-HBEo細胞系相關產品：Normal Rat Kidney-49F細胞、OSC-19細胞、NCIH1915細胞 
G361-mel細胞系相關產品：KBM-5細胞、TK-1細胞、REC 1細胞 
OVCA-432細胞系相關產品：MRC-5細胞、NCI-H209細胞、SCC90細胞 
Case 3細胞系相關產品：NCIH2106細胞、BGC823細胞、H1666細胞 
H2110細胞系相關產品：COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞 
HEL 299 人紅白細胞白血病細胞系
A-2780細胞系相關產品：H9c2細胞、SCL-2細胞、BALL1細胞 
CAMA1細胞系相關產品：HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞 
OCI-Ly 10細胞系相關產品：IEC 18細胞、HLE B-3細胞、WILL-2細胞 
Malme-3 M細胞系相關產品：KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞 
OCI-Ly 8細胞系相關產品：K562/ADP細胞、MOLT3細胞、MDA-MB-436細胞 
SW839細胞系相關產品：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞 
MNNGHOS細胞系相關產品：BIC1細胞、V 79細胞、H28細胞 
PFSK細胞系相關產品：NCI H548細胞、RAW264細胞、SUSM-1細胞 
Caco-2/ATCC細胞系相關產品：NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞 
HUASMC細胞系相關產品：HC11細胞、SKNFI細胞、Panc327細胞 
CHL1細胞系相關產品：MBMEC細胞、A-704細胞、HSCT6細胞 
Hs 294T細胞系相關產品：NTERA-2 clone D1細胞、KRC/Y細胞、SP2/0 Ag-14細胞 
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