"ML-2 人急性髓單核細胞白血病細胞系
細胞背景資料：急性髓單核細胞白血病；男性 
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣 
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。 
細胞生長：懸浮 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
ML-2 人急性髓單核細胞白血病細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不好，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進行預吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：懸浮 
ML-2 人急性髓單核細胞白血病細胞系
細胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
BEL-7404細胞系相關產(chǎn)品：CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞 
KHYG-1細胞系相關產(chǎn)品：Y3細胞、GM00346細胞、BALB 3T3 clone A31細胞 
KYSE70細胞系相關產(chǎn)品：TF-1細胞、H-1838細胞、52PE細胞 
MRC-9細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞 
Colon-26細胞系相關產(chǎn)品：LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞 
Porcine Kidney-15細胞系相關產(chǎn)品：PLA801C細胞、LS-1034細胞、8305C_1細胞 
Colo-678細胞系相關產(chǎn)品：SupB15WT細胞、Hela-mock細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞 
746T細胞系相關產(chǎn)品：MNNG-HOS (Cl#5)細胞、PC3M-2B4細胞、VM-CUB1細胞 
OCI Ly19細胞系相關產(chǎn)品：H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞 
C-28I2細胞系相關產(chǎn)品：RPPVEC細胞、H-1650細胞、NCI-H1993細胞 
HA細胞系相關產(chǎn)品：HOS/MNNG細胞、UCW 100細胞、SCC VII細胞 
Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞系相關產(chǎn)品：CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞 
H146細胞系相關產(chǎn)品：NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞 
Tb 1-Lu細胞系相關產(chǎn)品：BNL-HCC細胞、NCIH1688細胞、GM07404D細胞 
CCLP1細胞系相關產(chǎn)品：HS0578T細胞、P3X63-Ag8.653細胞、F442-A細胞 
HCGC細胞系相關產(chǎn)品：BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞 
NOZ細胞系相關產(chǎn)品：H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞 
BAEC細胞系相關產(chǎn)品：C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞 
COLO 320F細胞系相關產(chǎn)品：G-402細胞、IAR-20細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞 
L-M(TK-)細胞系相關產(chǎn)品：GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞 
ML-2 人急性髓單核細胞白血病細胞系
Hep 3B2細胞系相關產(chǎn)品：JKT-1細胞、CCD-841-CoN細胞、769-P細胞 
RMG-I細胞系相關產(chǎn)品：HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞 
NCIH1793細胞系相關產(chǎn)品：D-324 Med細胞、GM04154B細胞、NCIH82細胞 
U-87-MG細胞系相關產(chǎn)品：MFHL-2細胞、A375細胞、T98 G細胞 
H-2228細胞系相關產(chǎn)品：VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞 
C6661細胞系相關產(chǎn)品：MOLP-8細胞、THLE-3細胞、NS1細胞 
MC57細胞系相關產(chǎn)品：NB19-RIKEN細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、NPA細胞 
IBMF-7細胞系相關產(chǎn)品：HSC/mHSC細胞、SW954細胞、L5178-R細胞 
HPMC細胞系相關產(chǎn)品：FF-WT-BJ細胞、HEL-92_1_7細胞、RFL6細胞 
MESSA細胞系相關產(chǎn)品：M109細胞、KYSE-70細胞、L1210細胞 
bEnd.3[BEND3]細胞系相關產(chǎn)品：H1819細胞、FL83B細胞、BC3 H1細胞 
Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關產(chǎn)品：IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞 
NCIH2052細胞系相關產(chǎn)品：G361mel細胞、A10細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞 
hCMEC/D3細胞系相關產(chǎn)品：SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞 
HaCaT細胞系相關產(chǎn)品：HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞 
MSTO-211細胞系相關產(chǎn)品：HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞 
UPCI-SCC090細胞系相關產(chǎn)品：L M (TK-)細胞、Panc 1細胞、NCI.H460細胞 
FHCRC-11細胞系相關產(chǎn)品：Metastatic Variant-522細胞、SupT1細胞、NCI-H2227細胞 
LN299細胞系相關產(chǎn)品：Rat1細胞、ROS 17/28細胞、EB-1細胞 
HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞系相關產(chǎn)品：QSG7701細胞、HOP62細胞、THPI細胞 
MKN-74細胞系相關產(chǎn)品：RMS 1598細胞、IHHA-1細胞、alpha-TC1-6細胞 
MA 104細胞系相關產(chǎn)品：IHHA-1細胞、NCIH1876細胞、NCI-H1568細胞 
Pa017C細胞系相關產(chǎn)品：PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞 
ASH-3細胞系相關產(chǎn)品：H-1703細胞、SW756細胞、NCI-H2342細胞 
KBM7細胞系相關產(chǎn)品：C3A細胞、MDA-MB-231-luc細胞、HS-766-T細胞 
TN5B14細胞系相關產(chǎn)品：MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞 
KY180細胞系相關產(chǎn)品：SW1353細胞、SW 1088細胞、RKO-E6細胞 
HSMC細胞系相關產(chǎn)品：NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞 
UM-UC-1細胞系相關產(chǎn)品：FM88細胞、YT細胞、C3H/10T1/2細胞 
H1105細胞系相關產(chǎn)品：CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞 
KM12 SM細胞系相關產(chǎn)品：Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞 
Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關產(chǎn)品：H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞 
Li-7細胞系相關產(chǎn)品：NCTC clone 929細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞、VM-CUB-I細胞 
BGC-823細胞系相關產(chǎn)品：Pa17C細胞、7404細胞、H-2106細胞 
A9 (Hamprecht)細胞系相關產(chǎn)品：HLF細胞、CFSC-2G細胞、HEK293S細胞 
SCC 15細胞系相關產(chǎn)品：VeroC1008細胞、NCI-H522細胞、MV4-11細胞 
32D-Cl3細胞系相關產(chǎn)品：FT-293細胞、Co 115細胞、H1581細胞 
SGC7901細胞系相關產(chǎn)品：Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞 
AU 565細胞系相關產(chǎn)品：Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞 
Panc-02細胞系相關產(chǎn)品：UM-UC3細胞、LC-2 ad細胞、MARC-145細胞 
HDF-a細胞系相關產(chǎn)品：MDA-330細胞、HCC-38細胞、MILE SVEN 1細胞 
ML-2 人急性髓單核細胞白血病細胞系
BL-6細胞系相關產(chǎn)品：CAL62細胞、Hs729細胞、HemECs細胞 
NG10815細胞系相關產(chǎn)品：P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞 
LIPF178C細胞系相關產(chǎn)品：NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞 
CCD-1112sk細胞系相關產(chǎn)品：Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞 
LU-65M細胞系相關產(chǎn)品：OE19細胞、LL/2細胞、NCIH1436細胞 
SU-DH-L5細胞系相關產(chǎn)品：PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞 
CFSC-8B細胞系相關產(chǎn)品：L-6 myoblast細胞、HCAEC細胞、M20 [Human melanoma]細胞 
TI-73細胞系相關產(chǎn)品：Hep 3B2.1-7細胞、KS-SLK細胞、P3J.HR1K細胞 
Cates-1B細胞系相關產(chǎn)品：BHK 21細胞、AAV-293細胞、DC 2.4細胞 
SK-NMC細胞系相關產(chǎn)品：Swiss 3T6細胞、32Dcl3細胞、NCI-H526細胞 
T9細胞系相關產(chǎn)品：PLA801D細胞、AML-193細胞、HCT GEO細胞 
KYSE-70細胞系相關產(chǎn)品：HEK/293細胞、BV-173細胞、HFL 1細胞 
"