"NB1RGB 人皮膚成纖維細胞系
細胞背景資料：皮膚；成纖維細胞；男性 
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣 
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
NB1RGB 人皮膚成纖維細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細胞生長特性：貼壁 
NB1RGB 人皮膚成纖維細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度？冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
CMT 167細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK(1)細胞、VERO76細胞、RL95-2細胞 
H1650_CO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNGM細胞、SW948細胞、H295R細胞 
CHO/dhFr-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK細胞、NOK細胞、HT 115細胞 
CL1-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、NCIADR.RES細胞、PK(15)細胞 
MKN-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHSY-5Y細胞、HPB/ALL細胞、MCF-7細胞 
MRASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、EC9706細胞、CCD-18Co細胞 
LoMeT-ccRcc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMCs細胞、EoL-1細胞、OVCAR.5細胞 
NCI-H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 1細胞、HuH-6細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞 
COR-L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞 
LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2347細胞、DSL-6A-C1細胞、RIMEC細胞 
PL-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞 
BXPC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞 
Vx-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞 
HLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC細胞、D10G41細胞、NB4細胞 
H4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M1細胞、RPMI-2650細胞、SNU761細胞 
SW 948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGc80-3細胞、U-87-MG細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞 
SW 948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGc80-3細胞、U-87-MG細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞 
Detroit 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞 
NB-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-125細胞、HCC-1438細胞、HT clone H9細胞 
SUM-190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1355細胞、FL62891細胞、Oka-C1細胞 
NB1RGB 人皮膚成纖維細胞系
MLM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1581細胞、NPA-87細胞、GM03320D細胞 
H-358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞 
Emory University-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME 180細胞、MDA-MB-157細胞、HIT clone T15細胞 
Sp2/O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-AG 8.653細胞、OUMS-23細胞、SCC4細胞 
SKNBE(2c)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細胞、HCA 7細胞、NCI-H522細胞 
AML 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225 K6細胞、NCI-H1882細胞、NCIN87細胞 
SK-N-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 274.T細胞、IM-95細胞、SW 1271細胞 
Pt K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞 
SMMC-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞 
NCIH1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1573細胞、OCIAML5細胞、MDCC-MSB1細胞 
A-2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2-OS細胞、MC-3T3細胞、PK15細胞 
LTPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH244細胞、HT-55細胞、NCIH1299細胞 
NCI-H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞 
Adeno-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-LCD細胞、TSCC1細胞、8402細胞 
SK RC 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-10細胞、NCI-BL2141細胞、H-322細胞 
NCIH1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞 
BRL 3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞 
RK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞 
HLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC細胞、D10G41細胞、NB4細胞 
HCC-9204細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNGHOS細胞、Sp2/0-Ag-14細胞、FTC-133細胞 
CLONE M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞 
P3X63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、HHL-5細胞、MDA231-LM2-4175細胞 
SNB19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV21細胞、PFSK-1細胞、H748細胞 
N-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞 
SNT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E-6細胞、HPAEC細胞、HET-1A細胞 
MH-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞 
NR 8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH-30細胞、SF 539細胞、PLC8024細胞 
ARH77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-9細胞、SNU407細胞、P19細胞 
LAN-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10細胞、HCC941122細胞、HEM-L細胞 
H-740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 812細胞、H-1436細胞、HNE-2細胞 
KALS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞 
MDA MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255_DA細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HFF-1細胞 
Hs819T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞 
HEp-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-E6細胞、HCC38細胞、beta TC6細胞 
HLEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：50.B1細胞、HEK293A細胞、KE-39細胞 
SK-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞 
SK-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞 
MN-9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac6細胞、BT549細胞、H-2405細胞 
NBL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no. 8226細胞、PL-12細胞、32D clone 3細胞 
OCI AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞 
BT-549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H719細胞、Karpas-422細胞、Dami細胞 
NB1RGB 人皮膚成纖維細胞系
TE 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞 
ATDC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞 
SW 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD18Co細胞、UMUC-14細胞、CAOV4細胞 
RERFLCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC-1細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞 
B16/F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞 
HCC1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞 
MOLT 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞 
EPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059J細胞、SPCA1細胞、HCC1419細胞 
P3 (Jiyoye)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞 
NCI-H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel28細胞、L132細胞、Hs 683.T細胞 
HNSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCASMC細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞、MGH-U3 (RN)細胞 
CHO/dhFr-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK細胞、KALS-1細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞 
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