"HECV 人血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕?xì)胞】１)選對數(shù)增生期細(xì)胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液，計數(shù)，使細(xì)胞密度達(dá)５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細(xì)檢查，一定要蓋緊，做好標(biāo)記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷。【復(fù)蘇細(xì)胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達(dá)到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。 
細(xì)胞生長：貼壁 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
HECV 人血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分 
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如何把細(xì)胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。１.不同的細(xì)胞，喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同，還有就是細(xì)胞生長的空間密度問題。有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點細(xì)胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞，這樣細(xì)胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細(xì)胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。２.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細(xì)胞，如果細(xì)胞形態(tài)不好，（或者細(xì)胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入３ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培養(yǎng)基，進行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細(xì)胞我們只吹打，不消化的）；其次，把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細(xì)胞貼壁情況。１０分鐘觀察一次，２０分鐘，３０分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入３ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞完美形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點的時候再傳。反之亦然。３.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細(xì)胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些細(xì)胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細(xì)胞形態(tài)會長得比較好。（可能也是競爭很大，有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。）對于生長速度快的細(xì)胞，易生長的細(xì)胞加少一點培養(yǎng)基細(xì)胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。４.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細(xì)胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細(xì)胞，在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細(xì)胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細(xì)胞如果想要更漂亮的細(xì)胞狀態(tài)，比玻璃瓶會好，對于生長速度慢的細(xì)胞，玻璃瓶則會更好。同樣，對于同一種細(xì)胞，在其生長速度慢的時候，會好一點，比如剛剛復(fù)蘇的時候，或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候，玻璃瓶則相對會好一點。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書 
HuPT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU165細(xì)胞、624-mel細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞 
Ketr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA19細(xì)胞、VE細(xì)胞、RPMI7666細(xì)胞 
RBSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-C4-2細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞、HFT 8810細(xì)胞 
Caco-2/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1944細(xì)胞、R D細(xì)胞、SUD4細(xì)胞 
MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：451-LU細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞 
OVCAR-432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE細(xì)胞、SKMEL24細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞 
SW 48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCe-8693細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞、Detroit-562細(xì)胞 
MDA-MB-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H28細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞 
HCC0015細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV434細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞 
TCCPAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞、OP9細(xì)胞 
NWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H2106細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞 
HT-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE353.SK細(xì)胞、SK-N-BE2細(xì)胞、WM-239細(xì)胞 
SK-MEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU638細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞 
Oregon J-111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC6細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞、ARIP細(xì)胞 
Mink細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/28細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞 
NCI H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞 
KOSC-2 cl3-43細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu6細(xì)胞、MDCC-MSB1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞 
HFT8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 3細(xì)胞、Bac12F5細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞 
hTERT-HPNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞 
IOSE-Van細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM Cub 1細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、HMO6細(xì)胞 
HECV 人血管內(nèi)皮細(xì)胞系
MDA-MB-435-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225-K6細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞 
R1800[RA]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192A細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞 
ROS 17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-427細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞、Ly19細(xì)胞 
SKNEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuLEC-5a細(xì)胞、KM-12細(xì)胞、786-O細(xì)胞 
OCI-LY-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/2.8細(xì)胞、MCA38細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞 
H1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS細(xì)胞、AD293細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞 
LAN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞 
NCI-H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2110細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞、CNE1細(xì)胞 
SNU-869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 3 HR 1細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞、T-98細(xì)胞 
NCIH2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FD-LSC-1細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞 
SK-N-BE-2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1915細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞 
RSC 96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ej138細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞 
LTEP-a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S37細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞、WRL68細(xì)胞 
OE-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon26細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞、H250細(xì)胞 
OKa-C-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1788細(xì)胞、C33細(xì)胞、N-87細(xì)胞 
MLE12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO 3細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞 
UMRC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞 
3T3-L1 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283 Med細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞、H2009細(xì)胞 
H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV 2008細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞、OVCAR8細(xì)胞 
V79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN5細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞 
F98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-CAR細(xì)胞、YES 2細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞 
MDA-MB-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-226AR1細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞、HLE B-3細(xì)胞 
CCRF SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1355細(xì)胞、KTCTL-140細(xì)胞、A101D細(xì)胞 
SW 962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly07細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞 
BaF3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV304細(xì)胞、NCIH526細(xì)胞、H-1437細(xì)胞 
BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞 
WM115F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2S細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞 
Me Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB453細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞、SW 1417細(xì)胞 
HCCC9810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 840.T細(xì)胞、MEL細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞 
16-HBEo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞 
TE353.SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-3細(xì)胞、P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞、BC-021細(xì)胞 
SaOS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2058細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞 
H-735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/Ohkubo細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞 
Jurkat-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、CP-70細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞 
NCIH1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK (NBL-2)細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞、Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞 
P-36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT_116細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞 
SUM 52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKa-C-1細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞 
Neuro-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBSMC細(xì)胞、IOSE80細(xì)胞、Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞 
CHP-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC9細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞 
TE11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lung cancer-1/squamous細(xì)胞、OUMS-27細(xì)胞、U2OS細(xì)胞 
SV40-MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC Y細(xì)胞、G519細(xì)胞、149 PT細(xì)胞 
HECV 人血管內(nèi)皮細(xì)胞系
C518細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞 
SK-MEL-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2-0-Ag14細(xì)胞、Ly8細(xì)胞、NEC細(xì)胞 
RIN-m細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-13細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞 
L cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBMF-7細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞 
Panc02-H0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-08-13細(xì)胞、Y-1細(xì)胞、VA-ES-BJ細(xì)胞 
H748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MJ細(xì)胞、H-2009細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞 
32D clone3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞 
KU-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC14細(xì)胞、2008細(xì)胞、NKT細(xì)胞 
HAC-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-3_27細(xì)胞、KNS62細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞 
hTERT-RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs821T細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞 
SNB.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK2細(xì)胞、H2195細(xì)胞、H-1404細(xì)胞 
RBSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-C4-2細(xì)胞、CNE2細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞 
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