"NCI-H64 人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕?xì)胞】１)選對數(shù)增生期細(xì)胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液，計數(shù)，使細(xì)胞密度達(dá)５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細(xì)檢查，一定要蓋緊，做好標(biāo)記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出，太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細(xì)胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達(dá)到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。 
細(xì)胞生長：貼壁 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
NCI-H64 人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分 
NCI-H64 人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞的凍存：目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書 
SKNEP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138MG細(xì)胞、U14細(xì)胞、BIC1細(xì)胞 
HBZY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-3細(xì)胞、HSC1細(xì)胞、P-388細(xì)胞 
H-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC-1細(xì)胞、GM05384細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞 
HEY A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME-180細(xì)胞、H-2198細(xì)胞、CMK細(xì)胞 
CCRF CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO81-1細(xì)胞、MKN 7細(xì)胞、2PK-3細(xì)胞 
PC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-2細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞 
NCIH1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞 
HT115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-5細(xì)胞、SNU5細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞 
LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞、T-98G細(xì)胞 
Hopkins-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBr3細(xì)胞、H1650細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞 
NeHepLxHT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2A細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞、SNU449細(xì)胞 
PC14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LMTK-細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞、HOPC細(xì)胞 
Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2087細(xì)胞、DHBE細(xì)胞、H520細(xì)胞 
MN 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H719細(xì)胞、639-V細(xì)胞、MZCRC1細(xì)胞 
Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4I細(xì)胞、AR4-IP細(xì)胞、NCI-H2347細(xì)胞 
HEY-A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1395細(xì)胞、SNU520細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞 
HEY-A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1395細(xì)胞、SNU520細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞 
HCC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO81-2細(xì)胞、YD-38細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞 
MH-22a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High-5細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞 
ARO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2PK3細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞 
NCI-H64 人肺癌細(xì)胞系
H69/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo 59J細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞、HFT-8810細(xì)胞 
Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA157細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞、SNU119細(xì)胞 
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs600T細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞 
OAW 42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-I細(xì)胞、ME-180細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞 
SK-N-BE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/2.8細(xì)胞、CCD841CoN細(xì)胞、KYSE-410細(xì)胞 
ssMCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞 
Hep 3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JKT-1細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞、769-P細(xì)胞 
BEL-7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：5-8F細(xì)胞、P-36細(xì)胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞 
Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206F細(xì)胞、NB.4細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞 
MSTO-211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-748細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞 
MCF-10 Attached細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH929細(xì)胞、E6-1細(xì)胞、RL952細(xì)胞 
Hepatoma-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H522細(xì)胞、Colo320細(xì)胞、B-104細(xì)胞 
U251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、H-2444細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞 
MFE-296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIG1細(xì)胞、H-747細(xì)胞、A375mel細(xì)胞 
JOSK-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO-1細(xì)胞、Colo699細(xì)胞、HcaF細(xì)胞 
OCI-LY-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/2.8細(xì)胞、MCA38細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞 
FLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs68細(xì)胞、PC10細(xì)胞、SNU484細(xì)胞 
LK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZ-CRC-1細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞、J774 A1細(xì)胞 
COV 504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGBEC細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞、L-132細(xì)胞 
P 3 HR 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-31細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞、NCI-HUT-460細(xì)胞 
U-2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 839.T細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞 
BrCL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM2-4175細(xì)胞、HM06.A1細(xì)胞、EOL1細(xì)胞 
ZR75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB-1細(xì)胞、SF126細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞 
NK-92MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT1細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞 
KM-H2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC-1細(xì)胞、CaSki細(xì)胞、KP-2細(xì)胞 
EAHY-926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCPAN2細(xì)胞、RMS13細(xì)胞、RKOAS451細(xì)胞 
OCUM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-157細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞 
SK-ES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-5細(xì)胞、PSN1細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞 
RMS13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115-mel細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞、SP2細(xì)胞 
HITT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-1細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞、HR-1細(xì)胞 
SKNBE(2c)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞 
SK-ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR L279細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞、J 111細(xì)胞 
Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCaP 37細(xì)胞、H-1944細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞 
CCD18Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE B-3細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞 
LS-411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-87細(xì)胞、H1648細(xì)胞、MESSA細(xì)胞 
NCIH2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 100細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞 
2PK-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC-3-VGH細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞 
WM451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 1.Tes細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞、NK10a細(xì)胞 
GM05372E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU423細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞、L5178YR細(xì)胞 
UO-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Kidney-2細(xì)胞、PC2細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞 
SK-NMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T6細(xì)胞、PAI細(xì)胞、MAEC細(xì)胞 
NCI-H64 人肺癌細(xì)胞系
A2780/Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT112細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞 
KMS-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME.3M細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞 
MKN-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H820細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞 
IEC-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH7777細(xì)胞、CTV1細(xì)胞、Kit 225細(xì)胞 
H-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞 
University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 231細(xì)胞、HCC-1143細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞 
B 95.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS20Y細(xì)胞、KBM5細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞 
KMST6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH7A細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞 
H-1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-442A細(xì)胞、C 6細(xì)胞、OC316細(xì)胞 
TE-671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM8細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞、BC-025細(xì)胞 
NTERA-2cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHBE細(xì)胞、PL 5細(xì)胞、RGC6細(xì)胞 
H-524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞、OCI AML5細(xì)胞 
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