"NUGC-2 人低分化胃癌腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點(diǎn)：無菌意識要強(qiáng)：實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時(shí)放置，其它個(gè)人實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)立即拿出。實(shí)驗(yàn)用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻(xiàn)可能對相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時(shí)培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞，有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時(shí)，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計(jì)時(shí)，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因?yàn)闀斐沙恋砦镏@著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細(xì)胞的影響。 
細(xì)胞生長：貼壁 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
NUGC-2 人低分化胃癌腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細(xì)胞。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后37℃消化。比較難消化的細(xì)胞（潤洗方法5min還不能消化），這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會對你越來越不好。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分 
NUGC-2 人低分化胃癌腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個(gè)問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書 
H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞 
PLC8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-174T細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞、Panc3_27細(xì)胞 
LNT-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1435細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞、C-33A細(xì)胞 
HS688AT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM2細(xì)胞、COV 504細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞 
HEK293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4 C細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞、3AA細(xì)胞 
HSC（Human Schwann）細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HHM-2細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞、GM17219細(xì)胞 
alpha TC1.6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1N1細(xì)胞、MIN-6細(xì)胞、BC-024細(xì)胞 
SW1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA 19細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞 
EC-GI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-3細(xì)胞、PK13細(xì)胞、293-GP細(xì)胞 
KYSE510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eph4 1424細(xì)胞、AE1201細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞 
Sp2/mIL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPCa2b細(xì)胞、WM239A細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞 
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B10BR細(xì)胞、C-33A細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞 
3T3J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMRC2細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞 
CD-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma F10細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞、RAEC細(xì)胞 
ST細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGF-1細(xì)胞、THPI細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞 
SKMel-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00097細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞、HL-1細(xì)胞 
SKMel-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00097細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞、HL-1細(xì)胞 
CCD841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm 14細(xì)胞、Hep2細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞 
C3H/10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT-1細(xì)胞、SF763細(xì)胞、RTMC細(xì)胞 
SNU398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞 
NUGC-2 人低分化胃癌腺癌細(xì)胞系
SNU-638細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T4細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞 
Capan2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-460細(xì)胞、KMB 17細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞 
Adeno 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-824細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞 
GM03570細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Onda 11細(xì)胞、NIHOVCAR3細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞 
EJ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Functional Liver Cell-7細(xì)胞、FHCRC subclone 11細(xì)胞、Cor L88細(xì)胞 
SV40-HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Mar細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞 
SK MES 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.3細(xì)胞、D-283MED細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞 
SU-DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CII細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞、MCA38細(xì)胞 
Ramos 2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞 
C8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1238細(xì)胞、H196細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞 
GM02219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 10A細(xì)胞、Lec1細(xì)胞、RD 2細(xì)胞 
SK-MEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL 60細(xì)胞、EM-3細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞 
Karpas-422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon 38細(xì)胞、T.T細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞 
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tsup-1細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞 
JB 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1417細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞、FC33細(xì)胞 
AU 565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det 562細(xì)胞、OCM1細(xì)胞、WC00097細(xì)胞 
NCI-BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞 
Panc-3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞 
CNE-2Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM35細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞 
Th17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN-6細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞 
HM06.A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H847細(xì)胞、H2029細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞 
IGROV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞 
TNC-1B12B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa18C細(xì)胞、G-402細(xì)胞、U373MG細(xì)胞 
HPB/ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP-2/0-AG14細(xì)胞、H-1299細(xì)胞、HGBEC細(xì)胞 
MIO-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL12細(xì)胞、OCI/AML2細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞 
INS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALL1細(xì)胞、22Rv1細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞 
COLO-320-DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GEO細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞、SW1353細(xì)胞 
Opossum Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 52細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、NHA細(xì)胞 
P3J HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219C細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞 
LLCPK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NMC細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞、HBEpiC細(xì)胞 
Microbiological Associates-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR1K細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞、LN 382細(xì)胞 
Melanoma 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T. T細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞 
KRC-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、EAC細(xì)胞、Y3M細(xì)胞 
Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SSP-25細(xì)胞、H6c7細(xì)胞、HANK細(xì)胞 
E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK-4細(xì)胞、293 c18細(xì)胞、143 B細(xì)胞 
H2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS513細(xì)胞、293T/17細(xì)胞、HSC-4細(xì)胞 
SK-MES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：624-mel細(xì)胞、BBE細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞 
A549ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1435細(xì)胞、SJCRH30細(xì)胞、RGB細(xì)胞 
H-1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：5637細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞、OCI-Ly3細(xì)胞 
P3J-HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF1細(xì)胞、HIEC6細(xì)胞、MCF7-GFP細(xì)胞 
KU.812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-774A.1細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞 
NUGC-2 人低分化胃癌腺癌細(xì)胞系
OVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO-11細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞 
L-cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC116細(xì)胞、TW-039細(xì)胞、NCI-H1755細(xì)胞 
H774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR 20細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞、Functional Liver Cell-7細(xì)胞 
SDBMSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hSCC-25細(xì)胞、HSAS4細(xì)胞、VMM39細(xì)胞 
BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCK-8細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞 
NCI-H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sol8細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞、H-2135細(xì)胞 
OVCAR-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435 S細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞 
SKNBE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-433細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞、JS1細(xì)胞 
HTR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH2細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞 
OVCAR-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-HN-6細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、AE 1201細(xì)胞 
NKM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC 10細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞 
LNT-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1435細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞 
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