"CL-40 人結(jié)腸癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
CL-40 人結(jié)腸癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
貼壁細胞傳代實驗準備事項：將15mL離心管、T25細胞培養(yǎng)瓶、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA從4℃冰箱中取出后，復(fù)溫至室溫，備用。貼壁細胞傳代實驗步驟：將準備好的培養(yǎng)基等物品用酒精消毒后放入安全柜中；從培養(yǎng)箱中取出待處理的細胞，在顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)；用酒精消毒培養(yǎng)瓶，放入安全柜中；輕輕吸去細胞上清；加入2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次，吸去上清；加入1mL(0.25%胰酶-0.02%EDTA)，輕輕晃勻、覆蓋所有細胞后，置于37℃培養(yǎng)箱靜置消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；按比例將細胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中；在顯微鏡下觀察傳代后的細胞密度及狀態(tài)；將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意事項：培養(yǎng)過程中需維持細胞處于對數(shù)生長期，80%左右即可傳代，傳代比例請參照說明書建議；消化時間不宜過長，大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化，難消化的細胞可分次消化，每次時間不超過5min；培養(yǎng)過程中需要定期換液，一般細胞建議2~3天換液一次。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分 
CL-40 人結(jié)腸癌細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻模〖毎坏┟撀淙霊乙豪锬愫茈y再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
ST 486細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞 
PLB 985細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI1細胞、OEC33細胞、FRH-0201細胞 
Hs895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細胞、D10細胞、H1395細胞 
Neuro2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞 
HUV-EC-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F0細胞、H1184細胞、H2444細胞 
Sp2/0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞 
NCI-H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞 
Hs 940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞 
H-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC-1細胞、GM05384細胞、Mono-Mac-1細胞 
BAR-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293F細胞、H22-H8D8細胞、CWR-22rv1細胞 
SJ-RH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞 
H-2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1197細胞、HUT 125細胞、J.E6-1細胞 
BCP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞 
MCA 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞 
L 363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞 
McA-RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞 
McA-RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞 
H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞 
3-LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞 
Hmy.2 CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞 
CL-40 人結(jié)腸癌細胞系
SUM 52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKa-C-1細胞、HT 1376細胞、NCI-H2198細胞 
SW-1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞 
P388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞 
Kasumi-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3B細胞、HS578細胞、OVCA 420細胞 
3T3NIH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LX-2細胞、HCC1395細胞、OV1-P細胞 
MIA-PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dakiki細胞、HSC3細胞、HCPEpiC細胞 
Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K-1細胞、Caco-2/BBe 1細胞、EOMA細胞 
NCIH740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞 
JM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞 
Rin-M-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T3細胞、HCC-1806細胞、EOC-20細胞 
BEL-7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞 
LNCaP-FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL26細胞、NCI-H250細胞、RA 1細胞 
SW-1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞 
IAR20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1222細胞、WIL2-S細胞、NCIH1573細胞 
HEC-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞 
RWPE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 643細胞、SF-539細胞、NT2D1細胞 
HOC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞 
SW1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞 
Madin-Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251細胞、CCC-HEL-1細胞、RERF-LC-MS細胞 
P3X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 48細胞、CMT-167細胞、Beta-TC-6細胞 
MLM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1581細胞、NPA-87細胞、GM03320D細胞 
Swiss/3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Fetal Thymocyte-8810細胞、LL/2 (LLC1)細胞、NCI-H2085細胞 
Ramos(RA1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-J2細胞、SK-Mel 2細胞、COLO320/DM細胞 
OCI AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞 
OVCA-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞 
WM 239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞 
MKN74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞 
OVCA432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 19-19細胞、REC-1細胞、H-838細胞 
Hs729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 08.13細胞、HONE1細胞、MC3T3-E細胞 
SK-MEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO cell clone K1細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞、PC 61.5.3細胞 
Jurkat77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞、H766T細胞 
Hs 604.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2073細胞、L(TK-)細胞、U266-B1細胞 
IOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、LO2細胞、H1781細胞 
HOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-893細胞、Normal Rat Kidney細胞、H209細胞 
HT-1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞 
CDC/EU.HMEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2227細胞、SKN-SH細胞、NCI-H209細胞 
NS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-889細胞、OVCAR-5細胞、AN3細胞 
Panc327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞 
G361-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-5細胞、TK-1細胞、REC 1細胞 
MH-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞 
NCI-H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gerner 7666細胞、HS-68細胞、B35細胞 
CL-40 人結(jié)腸癌細胞系
NOZAWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME180細胞、NCI-SNU-878細胞、HepaRG細胞 
Karpas-299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞 
H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞 
Mono-Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞 
HSC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞 
TCC-PAN2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Suzhou Human Glioma-44細胞、LMH細胞、IOSE-Van細胞 
NCI-H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231細胞、NCI H295R細胞、RetroPack PT67細胞 
TK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞 
SW900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞 
HOP-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK2細胞、SK MEL 28細胞、WM-266-4細胞 
ONS-76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3D4/21細胞、LS1034細胞、SW48細胞 
Hs888T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4 I細胞、SBC-5細胞、OCI-AML4細胞 
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