"CX-1 人大腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。【凍存細(xì)胞】１)選對數(shù)增生期細(xì)胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液，計數(shù)，使細(xì)胞密度達(dá)５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點(diǎn)降低，使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細(xì)檢查，一定要蓋緊，做好標(biāo)記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出，太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細(xì)胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達(dá)到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。 
細(xì)胞生長：貼壁 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
CX-1 人大腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時，5~10℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細(xì)胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細(xì)胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細(xì)胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml）。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護(hù)劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分 
CX-1 人大腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細(xì)胞時把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書 
H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-78細(xì)胞、MV411細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞 
MX1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BXPC3細(xì)胞、ASH-3細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞 
HKBML細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-1細(xì)胞、8226細(xì)胞、SW 962細(xì)胞 
C32 [Human melanoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/GHA-VSMC細(xì)胞、WC00097細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞 
NS1-Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2196細(xì)胞、OCI-Ly 3細(xì)胞、SW-626細(xì)胞 
Simpson細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERFLCMS細(xì)胞、TE-9細(xì)胞、UMRC-2細(xì)胞 
PLA801-95C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-292細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞、H841細(xì)胞 
HuO9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1990細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞、BT.549細(xì)胞 
Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA435細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞、C17.2細(xì)胞 
NCI-H2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K1細(xì)胞、NPC-TW 039細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞 
SKMES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG63細(xì)胞、NU-GC-4細(xì)胞、SW-982細(xì)胞 
NCIH1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-10A細(xì)胞、Hs 683細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞 
GM02219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMY1022細(xì)胞、KP-2細(xì)胞、MDA 231-LM2-4175細(xì)胞 
HT 1376.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞 
U266 B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH727細(xì)胞、NHA細(xì)胞、H920細(xì)胞 
L-Wnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hk-2細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞 
L-Wnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hk-2細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞 
SKRC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2342細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞 
BJ [Human fibroblast]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2591細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞、JCA-1細(xì)胞 
B16-F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞、EU-4細(xì)胞 
CX-1 人大腸癌細(xì)胞系
MCF 10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly01細(xì)胞、HBdSMC細(xì)胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞 
SW1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-16細(xì)胞、Kuramochi細(xì)胞、L細(xì)胞 
GM03569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA NPA-87-1細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞、BV2細(xì)胞 
B78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI6666細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞、ASH3細(xì)胞 
P3X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM3570細(xì)胞、L6565細(xì)胞、TE 354.T細(xì)胞 
HS-294-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAEC1-KT細(xì)胞、TC-1[JHU-1]細(xì)胞、TALL1細(xì)胞 
PC3-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 611.T細(xì)胞、H-647細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞 
TE10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V-79-4細(xì)胞、GM12878細(xì)胞、MPC5細(xì)胞 
NCI-H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-8細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞 
P3-X63-Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H250細(xì)胞、JKT1細(xì)胞、SJSA細(xì)胞 
NP-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-4-II-E細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞、NCIH1105細(xì)胞 
HEK 293 EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rca-B細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞 
ST-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 756細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞 
HConEpic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76 clone E-6細(xì)胞、KP-N-RT細(xì)胞、NCIH929細(xì)胞 
WM35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172細(xì)胞、293F細(xì)胞、H-2286細(xì)胞 
HBE 135-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞 
A704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP229細(xì)胞、HFLS細(xì)胞、Hs606細(xì)胞 
GA-10-Clone-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U3細(xì)胞、NCIH2135細(xì)胞、SKLMS-1細(xì)胞 
HUCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞 
COR-L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1細(xì)胞、Caov-4細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞 
AML-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL 299細(xì)胞、H1672細(xì)胞、CEF細(xì)胞 
DLD 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞 
OLN93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Panc 02.03細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞 
Human Embryo Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251-MG細(xì)胞、JROECL 21細(xì)胞、C-26細(xì)胞 
Jurkat clone A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細(xì)胞、RTMC細(xì)胞、RIN m5F細(xì)胞 
JM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H929細(xì)胞、Pro-5WgaRI3C細(xì)胞、GM03190A細(xì)胞 
Colon 26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye (P-2003)細(xì)胞、Ramos細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞 
MKN-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHSY-5Y細(xì)胞、HPB/ALL細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞 
HO1-N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-8細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞、YH-13細(xì)胞 
Sc-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS 4;11細(xì)胞、SCI1細(xì)胞、D283MED細(xì)胞 
NCI-H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACHN細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、H2228細(xì)胞 
NCI-HUT-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR-1細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞、MF2059細(xì)胞 
ARO 81-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC-11細(xì)胞、MV-3細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞 
32Dc3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M(TK-)細(xì)胞、BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞 
COLO 320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 72細(xì)胞、OV90細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞 
Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEK細(xì)胞、HB 611細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞 
Colo205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7細(xì)胞、RAG細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞 
MGC803細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780-CP細(xì)胞、SK-GT-4細(xì)胞、CEM細(xì)胞 
1E8-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 7666細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞 
UK Pan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMEC細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞、RBE4細(xì)胞 
SCC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN 28細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞 
CX-1 人大腸癌細(xì)胞系
HO-8910細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2081細(xì)胞、LA-795細(xì)胞、SUM159PT細(xì)胞 
OLN93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Panc 02.03細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞 
IGR.OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1197細(xì)胞、C38細(xì)胞、GM17346細(xì)胞 
C-Li-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-780細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞、KU 812F細(xì)胞 
MV 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 140細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞 
Mel-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UK Pan-1細(xì)胞、K562細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞 
HS-695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV29細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞 
U937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi-6細(xì)胞、Rat Lung-65細(xì)胞、SF 126細(xì)胞 
FD-LSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI-TNC1細(xì)胞、DK-MG細(xì)胞、C127細(xì)胞 
OVCAR432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU-65M細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞、COV362細(xì)胞 
AN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi 1細(xì)胞、293 F細(xì)胞、TE671/RD細(xì)胞 
HK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 10細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞、NCI N87細(xì)胞 
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