"B16-F0 小鼠黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預熱；③超凈臺臺面應(yīng)整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關(guān)閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
B16-F0 小鼠黑色素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
貼壁細胞傳代實驗準備事項：將15mL離心管、T25細胞培養(yǎng)瓶、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA從4℃冰箱中取出后，復溫至室溫，備用。貼壁細胞傳代實驗步驟：將準備好的培養(yǎng)基等物品用酒精消毒后放入安全柜中；從培養(yǎng)箱中取出待處理的細胞，在顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)；用酒精消毒培養(yǎng)瓶，放入安全柜中；輕輕吸去細胞上清；加入2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次，吸去上清；加入1mL(0.25%胰酶-0.02%EDTA)，輕輕晃勻、覆蓋所有細胞后，置于37℃培養(yǎng)箱靜置消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；按比例將細胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中；在顯微鏡下觀察傳代后的細胞密度及狀態(tài)；將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意事項：培養(yǎng)過程中需維持細胞處于對數(shù)生長期，80%左右即可傳代，傳代比例請參照說明書建議；消化時間不宜過長，大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化，難消化的細胞可分次消化，每次時間不超過5min；培養(yǎng)過程中需要定期換液，一般細胞建議2~3天換液一次。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分 
B16-F0 小鼠黑色素瘤細胞系
細胞培養(yǎng)實驗相關(guān)問題總結(jié)：支原體(mycoplasma)污染的細胞，是否能以肉眼觀察出異狀？不能。除極有經(jīng)驗之專家外，大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株，無法以其外觀分辨之；支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響？支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù)，代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前，必須確認細胞為mycoplasma-free，實驗結(jié)果之數(shù)據(jù)方有意義；偵測出細胞株有支原體污染時，該如何處理？直接滅菌后丟棄，以避免污染其它細胞株；CO２培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔？定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之；為何培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，顏色會偏暗紅色，且pH值會越來越偏堿性？培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，培養(yǎng)基內(nèi)之CO２會逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果，將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時，可以通入無菌過濾之CO２，以調(diào)整pH值；購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；收到之冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
CMK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411細胞、CV-1細胞、NCI-H128細胞 
Med 341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：373MG細胞、HG2855細胞、U-87 MG細胞 
GM00215A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOSEpiC細胞、H2122細胞、GM02219D細胞 
JurkatE6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-256-TC細胞、NR8383.1細胞、28SC細胞 
HELF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAR-T細胞、MBT-2細胞、CAL-120細胞 
SW-780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞 
MIA-Pa-Ca-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞 
Capan 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞 
Walker256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞 
H-650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞 
Capan-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞 
MC-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞 
MDA-MB-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2444細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞、HS-729細胞 
RGM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞 
Mv.1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞 
HCC-827細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7B細胞、NCI-H1341細胞、SW 527細胞 
HCC-827細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7B細胞、NCI-H1341細胞、SW 527細胞 
KMM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF12F細胞、RPMI 2650細胞、CCRFCEM細胞 
EVSAT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB49細胞、HCC0044細胞、PVEC細胞 
DHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞 
B16-F0 小鼠黑色素瘤細胞系
OsACL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞 
HFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞 
HEK-293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV-304細胞、U-373 MG細胞、KPL-4細胞 
MC 3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞 
SKNDZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞 
MDA MB 175 VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞 
KYSE-450細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHHCALL2細胞、LA-N-1細胞、SW480細胞 
OB2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞 
TI-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2.1-7細胞、KS-SLK細胞、P3J.HR1K細胞 
MUTZ-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1915細胞、NCIH1734細胞、DV-90細胞 
SKUT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞 
NCI-H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K1細胞、NPC-TW 039細胞、Detroit 562細胞 
KU1919細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC9細胞、NMC-G1細胞、Panc 04.03細胞 
NK-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞 
IOSE-Van細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞 
JCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞 
H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIHA細胞、H-1437細胞、HS-695T細胞 
KMS-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH-77細胞、H-2110細胞、HME1細胞 
WEHI231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-HN6細胞、McA-RH 7777細胞、VMRC-RCZ細胞 
MDA-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞 
MN-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞 
H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV 2008細胞、6T-CEM細胞、OVCAR8細胞 
bEND.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞 
H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞 
SK-MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞 
DMS-114細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞 
A 375細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 746T細胞、MCF-7/ADR細胞、451Lu細胞 
LM TK negative細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞 
VP303細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞 
MCF7-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS-1細胞、SW 1353細胞、CCRF-CEM C1細胞 
52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc04.03細胞、BT-20細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞 
H.Ep. No. 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞 
293S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞 
SuDHL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578.Bst細胞、LS-411細胞、ChaGo K-1細胞 
786O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞 
H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUASMC細胞、JHH-2細胞、Daudi細胞 
H-358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞 
102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMH2細胞、COLO 16細胞、C2C12細胞 
NCI-H1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2110細胞、KYSE 510細胞、CNE1細胞 
U-hth74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL-526細胞、HuT-78細胞、P3HR1細胞 
H-1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-42細胞、CAL-78細胞、Hs 766.T細胞 
B16-F0 小鼠黑色素瘤細胞系
L5178-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞 
P388-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞 
Hs819T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞 
CCK-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H6c7細胞、MA-c細胞、Mouse Colon 38細胞 
KMS18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞 
MCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞 
NCIH1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-1細胞、NCI-H1395細胞、SW-403細胞 
SW-1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞 
UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCFB（HCF）細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞 
Clone 15 HL-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578Bst細胞、PCI:SG231細胞、MDA MB 436細胞 
IOSE 80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2330細胞、HEK293-F細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞 
GM00215A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOSEpiC細胞、HEK 293FT細胞、4T1細胞 
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