"BT-474 人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
常見(jiàn)培養(yǎng)細(xì)胞預(yù)防污染的有效措施：體外培養(yǎng)的細(xì)胞受到嚴(yán)重污染時(shí)，有時(shí)即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)的始終，才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手：１)添加抗生素：各種抗生素性質(zhì)不同，對(duì)各種微生物的作用也不同，聯(lián)合應(yīng)用比單用效果好，預(yù)防性應(yīng)用比污染后使用好(但迄今尚無(wú)對(duì)抗支原體特效抗生素)。但反復(fù)使用抗生素會(huì)使微生物產(chǎn)生耐藥性，且對(duì)細(xì)胞本身也有一定影響，因此為避免誘導(dǎo)抗藥細(xì)菌，應(yīng)定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素，或盡可能不用抗生素處理；２)從物品、用品消毒滅菌著手：細(xì)胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底，各種溶液滅菌除菌要仔細(xì)，并在取樣檢菌一周后確認(rèn)無(wú)菌才能使用。同時(shí)，在無(wú)菌過(guò)濾操作中，隨著濾過(guò)體積的增大，濾膜破損的可能性增加，故應(yīng)選擇最后過(guò)濾的液體進(jìn)行檢測(cè)。定期對(duì)二氧化碳培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒。具體操作：７５%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后，使用可移動(dòng)的紫外燈至少消毒３０min，加入高壓滅菌過(guò)的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制３００ml的飽和酸銅加３L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。 
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁 
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源 
BT-474 人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
可以這樣說(shuō)，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過(guò)這個(gè)問(wèn)題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開(kāi)始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過(guò)幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞不行了，狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問(wèn)題，可以非?？隙ǖ卣f(shuō)，你的消化環(huán)節(jié)出問(wèn)題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過(guò)程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問(wèn)題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒(méi)有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣的，大家爭(zhēng)取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來(lái)。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過(guò)的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開(kāi)始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比)4)然后把前面剛吸出來(lái)的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開(kāi)來(lái)的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況把握）。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分 
BT-474 人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中相關(guān)問(wèn)題總結(jié)：懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無(wú)法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái)，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動(dòng)物細(xì)胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過(guò)高之轉(zhuǎn)速，將造成細(xì)胞死亡；細(xì)胞之接種密度為何？依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)之一重要原因；細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來(lái)細(xì)胞生長(zhǎng)用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級(jí)和無(wú)菌過(guò)濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級(jí)，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無(wú)菌狀況，次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機(jī)會(huì)。若要過(guò)濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細(xì)胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(shí)(或隔夜)→液氮槽vaporphase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。-２０°C不可超過(guò)１小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細(xì)胞欲冷凍保存時(shí)，細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度？冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細(xì)胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細(xì)胞污染？細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí)，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書 
Ketr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA19細(xì)胞、VE細(xì)胞、RPMI7666細(xì)胞 
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2 (2-1)細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞、M059K細(xì)胞 
Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCLCD細(xì)胞、Hs940.T細(xì)胞、Verda reno細(xì)胞 
Sup T-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、MC116細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞 
MOLP8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341MD細(xì)胞、LX-2細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞 
LS 174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 445T細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L 540細(xì)胞 
NKL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞、C4-2 B細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞 
MDA MB 361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255_DA細(xì)胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、HFF-1細(xì)胞 
BT20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-90細(xì)胞、MDAMB361細(xì)胞、PANC-04-03細(xì)胞 
Panc-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC3細(xì)胞、LC-2 ad細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞 
PA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2a細(xì)胞、EJ-1細(xì)胞、K-562細(xì)胞 
NKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZYM-SVEC01細(xì)胞、SCL-1細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞 
Scott and White No. 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H735細(xì)胞、MCF-7ADR細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞 
B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57/B6-L細(xì)胞、HHL5細(xì)胞、C166細(xì)胞 
SNK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1882細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞 
HT(H9)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6-1細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞、CG-4細(xì)胞 
HT(H9)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6-1細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞、CG-4細(xì)胞 
Kasumi 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2-11細(xì)胞、PC.3細(xì)胞、SK_N_FI細(xì)胞 
LS-174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN-93細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞 
KM H-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1838細(xì)胞、Kit 225細(xì)胞、AZ521細(xì)胞 
BT-474 人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞系
KY70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、SNU398細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞 
OCILY3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞 
Hos TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS1細(xì)胞、H650細(xì)胞、ACC3細(xì)胞 
BCECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC403細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞 
RCC 7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-205細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞 
CAL 12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-TE85細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞 
Sp2/0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞 
HANK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-38細(xì)胞、H-1781細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞 
C41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-A細(xì)胞、C2A細(xì)胞、EMT6細(xì)胞 
MOLT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL92.1.7細(xì)胞、RGC-5細(xì)胞、SNU668細(xì)胞 
L-cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-090細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞 
MDAMB435S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2/BBe 1細(xì)胞、TOV21細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞 
PA12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R-1059-D細(xì)胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞 
NCIH1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST 486細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞、H-1299細(xì)胞 
NIH:OVCAR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC TERT1細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞 
RIN m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2141細(xì)胞、ROS-17/2.8細(xì)胞、SF 295細(xì)胞 
MFM-223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU-1細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞 
EFM192A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8-653細(xì)胞、HSC（Human Schwann）細(xì)胞、SU-DHL-8細(xì)胞 
Huh-7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-H細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞、MA104細(xì)胞 
D-283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 Ad5細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞 
FDCP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M21細(xì)胞、HCC1599細(xì)胞、GT1-1細(xì)胞 
YH-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEp-2細(xì)胞、NT2細(xì)胞、SHEE細(xì)胞 
DoTc2-4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS-751細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞、SG231細(xì)胞 
ST2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R D細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞、Hs675細(xì)胞 
IPLB-Sf21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H378細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞、hFOB細(xì)胞 
U2-OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEnd3細(xì)胞、SK-RC-52細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞 
NCIH1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650_CO細(xì)胞、JS1細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞 
KNS-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞 
LK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZ-CRC-1細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞、J774 A1細(xì)胞 
Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S-3細(xì)胞、RPMI-8402細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞 
CCD-841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPF細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞 
Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞、SW-13細(xì)胞 
SKNBE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C17細(xì)胞、ECV細(xì)胞、JiyoyeP-2003細(xì)胞 
Hs729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 08.13細(xì)胞、HONE1細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞 
HCC-2279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAEC細(xì)胞、UMRC2細(xì)胞、UO31細(xì)胞 
NCI-H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEM細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞 
DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞 
RIN-m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIN87細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞、639V細(xì)胞 
MyLa 2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma細(xì)胞、KYSE 520細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞 
NCI-H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO.31細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞 
PANC-10-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-878細(xì)胞、TGBC11TKB細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞 
BT-474 人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞系
NCI-H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞、KPL4細(xì)胞 
PF382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞 
HO1-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143TK-細(xì)胞、NCIH847細(xì)胞、YD15細(xì)胞 
Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞、SW-13細(xì)胞 
Vero 76 clone E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO 27細(xì)胞、HMCB細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞 
beta-TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCPAP細(xì)胞、TE3細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞 
HOS-MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB1細(xì)胞、HUC細(xì)胞、H187細(xì)胞 
J82COT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MES 1細(xì)胞、P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞、SJCRH30細(xì)胞 
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3M細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞、MLM細(xì)胞 
NCI-SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-330細(xì)胞、OE21細(xì)胞、BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞 
RC-K8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-FT細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞、DrG細(xì)胞 
Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCLCD細(xì)胞、251 MG細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞 
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