"SK-RC-20 人腎癌細胞系
細胞背景資料：腎癌 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞培養(yǎng)實驗基本操作：①進無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人獨立進行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，的優(yōu)點是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉，熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
SK-RC-20 人腎癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁 
SK-RC-20 人腎癌細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
NCI-UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-115細胞、H1623細胞、NK-92 MI細胞 
P3/NS1/1-Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞 
BT-474細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-47-D細胞、Ly10細胞、BC-028細胞 
SUM 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞 
TOV-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞 
Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：451Lu細胞、BNL CL.2細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞 
MIHA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS-2/8細胞、NPC-039細胞、PaTu8988s細胞 
LTPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH244細胞、HT-55細胞、NCIH1299細胞 
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676B細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞、RIN-m 14B細胞 
T8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞 
HEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞 
578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME1細胞、MES 23.5細胞、HT 29細胞 
HCC-2218細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL 68細胞、SCC4細胞、RT-BM 1細胞 
HEK-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞 
PANC 327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2/C3A細胞、PC-3M IE8細胞、2E8細胞 
COV 434細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞 
COV 434細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞 
Pa17C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-345細胞、2B4-L細胞、HT 1197.T細胞 
Daudi細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 837細胞、SK-Mel 1細胞、NKM1細胞 
PaTu-8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞 
SK-RC-20 人腎癌細胞系
HCT GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ISHI細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、T_T_細胞 
MAVER1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞 
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞 
Panc-3_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr細胞、SUIT 2細胞、PC3M-2B4細胞 
LTEP-sm 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono-Mac-6細胞、UPCI-SCC-090細胞、SNU-475細胞 
HCC1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞 
ChaGo-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118 MG細胞、MDA-330細胞、alpha TC1.6細胞 
NPA-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC92A細胞、H-4細胞、SUPT-1細胞 
HCC-1954BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞 
H1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Opossum Kidney細胞、SUP-T1細胞、JEKO細胞 
RTMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞 
NCI522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞 
BIU-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 28細胞、COLO320DM細胞、MDA-MB-468-RED細胞 
Jiyoye(P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞 
OCIAML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemia 1210細胞、HS-294細胞、HEL-92-1-7細胞 
WEHI 164 TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs683T細胞、OVCA 432細胞、MARC 145細胞 
UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細胞、TSCCa細胞、SNU-620細胞 
MES-SA-Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-39細胞、3T3細胞、38C13細胞 
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞 
B-95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-cell細胞、CAMA細胞、KTC-1細胞 
MFD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞 
Hep 3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JKT-1細胞、CCD-841-CoN細胞、769-P細胞 
DMS 53細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C7細胞、VB細胞、Eca 109細胞 
HCC-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCaBER細胞、MOLP8細胞、HO1-N1細胞 
Earle's L cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGECs細胞、NCI-SNU-620細胞、JHH7細胞 
Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GH3細胞、DrG細胞、Hs 819.T細胞 
NCIH1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞 
T47D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR-42J細胞、Hs895T細胞、Hs888T細胞 
Calu 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN6細胞、H220細胞、K299細胞 
Kato-III細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 1細胞、Mel-RM細胞、ME180細胞 
H-1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431/P細胞、SC1細胞、LTEP-sm細胞 
BNL-HCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞 
NS20Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-782細胞、bEnd.3[BEND3]細胞、Mc Coy細胞 
MMQ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 2細胞、PANC0504細胞、EBTr (NBL-4)細胞 
CCD-841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fao細胞、NuTu 19細胞、UPCI-SCC-090細胞 
130T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞 
130T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞 
GM00346B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞 
MDA1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞 
MDAMB134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R2C細胞、HCC0015細胞、RPMI 1846細胞 
PA I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞 
SK-RC-20 人腎癌細胞系
NCIH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH 30細胞、Tu 177細胞、3 LL細胞 
RPTEC TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786O細胞、H2591細胞、CF PAC-1細胞 
GMK,BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞 
OVCAR 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb-2細胞、MTC-TT細胞、SW527細胞 
MPC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞 
As-PC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435-S細胞、U373細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞 
HCS2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM-1細胞、CHP126細胞、H-2227細胞 
RKO_AS45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCL-H548細胞、X63-Ag8.653細胞、Saos2細胞 
H-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP-1細胞、UPCI-SCC090細胞、CPAE細胞 
SW-48細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 16細胞、PTK 2細胞、OVMANA細胞 
Kit225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-M17細胞、SKUT-1細胞、M2-10B4細胞 
BT-474細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-47-D細胞、MRAEC細胞、HCC38細胞 
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