"143B 人骨肉瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
143B 人骨肉瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。 
細胞傳代方法：１：２—１：５傳代；每周換液２-３次 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁生長 
143B 人骨肉瘤細胞系
有關實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設計的，現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應用于各種細胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的，現(xiàn)在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設計的，現(xiàn)在已廣泛應用于懸浮細胞的培養(yǎng)。 
細胞形態(tài)特性：混合型 
COLO320DM細胞系相關產(chǎn)品：GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞 
SN4741細胞系相關產(chǎn)品：Tb1.Lu細胞、Tn-5細胞、Fetal Human Lens-124細胞 
ZR75_1細胞系相關產(chǎn)品：AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞 
H1781細胞系相關產(chǎn)品：MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞 
DK-MG細胞系相關產(chǎn)品：CAL-12T細胞、NRCC細胞、OCI-LY-18細胞 
751細胞系相關產(chǎn)品：SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞 
NTERA2-D1細胞系相關產(chǎn)品：TGBC11TKB細胞、H378細胞、BT-549細胞 
Psi2-DAP細胞系相關產(chǎn)品：Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞 
J82細胞系相關產(chǎn)品：Y1細胞、SW-480細胞、CAKI 1細胞 
FHL124細胞系相關產(chǎn)品：GCT0404細胞、MADISON LUNG TA-109細胞、HeLa-229細胞 
OCI-AML3細胞系相關產(chǎn)品：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞 
TCC-PAN2細胞系相關產(chǎn)品：Suzhou Human Glioma-44細胞、LMH細胞、IOSE-Van細胞 
NCI-H2073細胞系相關產(chǎn)品：Gerner 7666細胞、HS-68細胞、B35細胞 
HSAEC1-KT細胞系相關產(chǎn)品：SW-403細胞、Duke University 4475細胞、H-1623細胞 
Hs27F細胞系相關產(chǎn)品：LWnt3A細胞、IPLB-Sf21-AE細胞、HLEpiC細胞 
SK-Col-1細胞系相關產(chǎn)品：H-1838細胞、NIE-115細胞、TYK-nu細胞 
SK-Col-1細胞系相關產(chǎn)品：H-1838細胞、NIE-115細胞、TYK-nu細胞 
PG-4(S+L-)細胞系相關產(chǎn)品：F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞 
T-HSC細胞系相關產(chǎn)品：SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞 
TE 354.T細胞系相關產(chǎn)品：NFHIOSE-80細胞、EB-1細胞、RPMI 7951細胞 
143B 人骨肉瘤細胞系
JROECL 21細胞系相關產(chǎn)品：KATOIII細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、MeT5A細胞 
NCIH847細胞系相關產(chǎn)品：SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞 
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞 
Nb2細胞系相關產(chǎn)品：C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞 
NCIH810細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2126細胞、NFHIOSE-29細胞、LS513細胞 
NCI-H920細胞系相關產(chǎn)品：HLEC-B3細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、CORL279細胞 
HM06.A1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H847細胞、H2029細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞 
NCI-SNU-398細胞系相關產(chǎn)品：SCC-9細胞、MDA 231-LM2-4175細胞、SNU423細胞 
PaTu 8988 S細胞系相關產(chǎn)品：Panc 02細胞、PLC細胞、NCTC clone 929細胞 
HCC366細胞系相關產(chǎn)品：L-363細胞、KYSE70細胞、GM00637H細胞 
MDCKII-WT細胞系相關產(chǎn)品：MMAc-SF細胞、HRGEC細胞、JVM2細胞 
SK-Hep1細胞系相關產(chǎn)品：Hepatoma 22細胞、YH細胞、Mink Lung細胞 
Vero 76 clone E-6細胞系相關產(chǎn)品：SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞 
NCIH508細胞系相關產(chǎn)品：UACC893細胞、SUM-52PE細胞、Evsa T細胞 
HUVEC細胞系相關產(chǎn)品：QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞 
HuTu-80細胞系相關產(chǎn)品：Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞 
A 172細胞系相關產(chǎn)品：A427細胞、BEAS2B細胞、Tissue Culture-1細胞 
SKRC 39細胞系相關產(chǎn)品：JM1細胞、HOCF細胞、NCI H69細胞 
WEHI-3B細胞系相關產(chǎn)品：Okayama University Medical School-23細胞、H1385細胞、GA-10-Clone-4細胞 
CAL 12T細胞系相關產(chǎn)品：HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞 
SV40-HCEC細胞系相關產(chǎn)品：IOSE-Mar細胞、Capan 2細胞、Nthy ori 3.1細胞 
Roswell Park Memorial Institute 8402細胞系相關產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-39細胞、NCI-H378細胞、CAL-33細胞 
RC-4B細胞系相關產(chǎn)品：RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞 
SuDHL 8細胞系相關產(chǎn)品：ACC-M細胞、Duck embryo細胞、SK-MEL-28細胞 
Hs 274細胞系相關產(chǎn)品：CFPAC-1細胞、TK-10細胞、AML 12細胞 
Hs742T細胞系相關產(chǎn)品：Colo741細胞、CEM-C7細胞、SUM190PT細胞 
CCD-1112sk細胞系相關產(chǎn)品：Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞 
H6c7細胞系相關產(chǎn)品：Y-1細胞、253JB-V細胞、LL/2細胞 
hA549細胞系相關產(chǎn)品：MOLT16細胞、OVCA420細胞、Hs863T細胞 
RPE1-hTERT細胞系相關產(chǎn)品：H1993細胞、FRTL 5細胞、A2780S細胞 
MNNG/HOS細胞系相關產(chǎn)品：H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞 
UMNSAH-DF 1細胞系相關產(chǎn)品：EOL1細胞、SK.MEL.2細胞、H2052_MM細胞 
PaTu 8988 S細胞系相關產(chǎn)品：Panc 02細胞、PLC細胞、NCTC clone 929細胞 
ARO細胞系相關產(chǎn)品：2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞 
B16/BL6細胞系相關產(chǎn)品：ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞 
CCC-HEH-2細胞系相關產(chǎn)品：SK-GT-4細胞、Tn5 B1-4細胞、MESSADX5細胞 
HCC-38細胞系相關產(chǎn)品：KLM1細胞、KE39細胞、SW-756細胞 
Balb/c 3T3細胞系相關產(chǎn)品：ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞 
HuO9細胞系相關產(chǎn)品：SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞 
J774 A.1細胞系相關產(chǎn)品：SNU-1040細胞、F-81細胞、MCA205細胞 
VK2 (E6/E7)細胞系相關產(chǎn)品：COLO-320細胞、GM0637細胞、CNE1-LUC細胞 
143B 人骨肉瘤細胞系
H2023細胞系相關產(chǎn)品：SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞 
SKG-IIIa細胞系相關產(chǎn)品：IOSE80細胞、BC-019細胞、H-2196細胞 
IR983F細胞系相關產(chǎn)品：NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞 
SKCO1細胞系相關產(chǎn)品：PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞 
MV-4:11細胞系相關產(chǎn)品：SUM-159-PT細胞、FHs74 Int細胞、H-1755細胞 
National Medical Center-Glioma 1細胞系相關產(chǎn)品：HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞 
H-69細胞系相關產(chǎn)品：VK2 (E6/E7)細胞、E304細胞、NCI-H1048細胞 
Hs940-T細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2228細胞、SNU-886細胞、DMS 79細胞 
NCI-ADR-RES細胞系相關產(chǎn)品：Wayne State University-Head and Neck 13細胞、RPMI1846細胞、WEHI164細胞 
Vero細胞系相關產(chǎn)品：H3255細胞、Colo205細胞、IAR-20細胞 
0V-1063細胞系相關產(chǎn)品：A2780S細胞、FRTL 5細胞、Kelly細胞 
ZR75_1細胞系相關產(chǎn)品：AML193細胞、MDA-MB-175-VII細胞、SNB.19細胞 
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