"L-5178-Y Thawing小鼠淋巴瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
L-5178-Y Thawing小鼠淋巴瘤細胞系
細胞生長：懸浮
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉數分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質濃度升高，并在細胞內形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內不致產生大的冰晶；相反，結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數生長期細胞，經胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
L-5178-Y Thawing小鼠淋巴瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞消化過程總結：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了，細胞之間的附著也已經消失了，細胞已經獨立分布了（雖然沒有呈現很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
HTR8細胞系相關產品：JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
RCK8細胞系相關產品：HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞
PCI:SG231細胞系相關產品：NCTC-1469細胞、NCI747細胞、A10細胞
KP-2細胞系相關產品：NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞
RPMI1788細胞系相關產品：NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞
COLO-HSR細胞系相關產品：H.Ep. #2細胞、HOC1細胞、rRTEC細胞
PC615.3細胞系相關產品：HCC827細胞、LIM1215細胞、BEL7402細胞
PT67細胞系相關產品：CWR22Rv1細胞、OCILY3細胞、CCD841CoN細胞
H69細胞系相關產品：KYSE-50細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞
GP2d細胞系相關產品：CCD19Lu細胞、GM2131細胞、GM637細胞
C2BBe 1細胞系相關產品：KYSE-510細胞、Hepa-RG細胞、130T細胞
Tn-5細胞系相關產品：MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞
B16 BL6細胞系相關產品：KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞
PANC-03-27細胞系相關產品：hTERT-HME-1細胞、G 401細胞、HEK.EBNA細胞
hTERT-RPE細胞系相關產品：NPA'87細胞、X63-Ag8-653細胞、NCI-446細胞
SNU-719細胞系相關產品：HcerEpic細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HCC1954-BL細胞
hA549細胞系相關產品：MOLT16細胞、OVCA420細胞、Hs863T細胞
SKRC-52細胞系相關產品：VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞
A549/DDP細胞系相關產品：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞
Medical Research Council cell strain-9細胞系相關產品：NCIH441細胞、T24(ECV304)細胞、H4-II-E-C3細胞
PaTu-8988s細胞系相關產品：8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞
PaTu-8988s細胞系相關產品：8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞
L M (TK-)細胞系相關產品：UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞
SUP-B1細胞系相關產品：RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞
MCF-7/ADR-RES細胞系相關產品：PT67細胞、B16-F0細胞、MDAMB-231細胞
NEC8細胞系相關產品：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Rca-B細胞、KYSE410細胞
L-5178-Y Thawing小鼠淋巴瘤細胞系
T HEECs細胞系相關產品：N1E-115細胞、NALM 6細胞、SHG-44細胞
MT4細胞系相關產品：B6Tert-1細胞、XWLC-05細胞、MRC-5細胞
HCC-1171細胞系相關產品：MCF-10A細胞、LNCaP.FGC細胞、FDC-P1細胞
K-562細胞系相關產品：GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞
Ketr3細胞系相關產品：HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞
DMS 114細胞系相關產品：MDAMB175VII細胞、BrCL12細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞
HFF1細胞系相關產品：BNL 1ME A.7R.1細胞、MB39細胞、H295R-S1細胞
MILE SVEN1細胞系相關產品：3T3-A31細胞、HuH7細胞、IFRS1細胞
BE(2)M17細胞系相關產品：Mhh-Call 2細胞、MPP-89細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞
Ocular Choroidal Melanoma-1細胞系相關產品：XuanWei Lung Cancer-05細胞、A375-SM細胞、CHP 212細胞
HuH6細胞系相關產品：Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞
NCI-H1876細胞系相關產品：H-647細胞、RBL細胞、RKO細胞
R 1610細胞系相關產品：E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
SCC9細胞系相關產品：NCI-H2135細胞、CCD-841-CoTr細胞、NIH:OVCAR-10細胞
LNCaP FGC細胞系相關產品：H446細胞、SMC-1細胞、H1092細胞
NB1-RGB細胞系相關產品：D10.G4.1細胞、SW 1116細胞、C-4 I細胞
KYSE270細胞系相關產品：2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞
SKml2細胞系相關產品：P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞
NPA87細胞系相關產品：DU 145細胞、Sc-1細胞、SHEP1細胞
NCIH2085細胞系相關產品：Hs840T細胞、Mino細胞、IEC6細胞
SK-Hep1細胞系相關產品：Hepatoma 22細胞、YH細胞、Mink Lung細胞
CEM-CCRF (CAMR)細胞系相關產品：H-358細胞、SKM-1細胞、Epstein-Barr-3細胞
5-8F細胞系相關產品：Hs852細胞、TE1細胞、NCI-H1417細胞
U-343 MG細胞系相關產品：MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞
X63-Ag8.653細胞系相關產品：LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞
526-mel細胞系相關產品：MMAc-Serum Free細胞、LLC-MK2細胞、JROECL 19細胞
HONE-1細胞系相關產品：PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞
BEAS2B細胞系相關產品：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞
CHP126細胞系相關產品：HC-11細胞、HCC2935細胞、LS174細胞
C2C12細胞系相關產品：OC 316細胞、COLO-HSR細胞、RPE D407細胞
NK-92細胞系相關產品：WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞
Hca-F細胞系相關產品：ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞
ACCM細胞系相關產品：Rat Skin 1細胞、143B細胞、SW626細胞
L-5178-Y Thawing小鼠淋巴瘤細胞系
WiDr細胞系相關產品：HPAF細胞、TOV-112細胞、L cell細胞
HcaF細胞系相關產品：H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞
HcaF細胞系相關產品：H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞
HCC-1187細胞系相關產品：High 5細胞、Wistar Institute-38細胞、OCI-Ly8細胞
YAC-1細胞系相關產品：THLE-3細胞、Hu-P-T3細胞、THP 1細胞
95D細胞系相關產品：OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞
NB19-RIKEN細胞系相關產品：MODE-K細胞、NCI-H2342細胞、IPEC-J2細胞
293細胞系相關產品：NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞
BE2C細胞系相關產品：H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞
MT-4細胞系相關產品：HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞
X63細胞系相關產品：MPASMC細胞、C8-D1A細胞、SU4細胞
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