"HeLa 229 Thawing人宮頸癌細胞系
細胞背景資料：宮頸癌；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HeLa 229 Thawing人宮頸癌細胞系
細胞生長：貼壁
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HeLa 229 Thawing人宮頸癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
253J-BV細胞系相關產(chǎn)品：VK2/E6E7細胞、RPE-1細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞
WB F344細胞系相關產(chǎn)品：T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞
HCEC-12細胞系相關產(chǎn)品：GM-637細胞、HSF2細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞
NL20SV細胞系相關產(chǎn)品：MA-c細胞、NCI-SNU-398細胞、Jiyoye細胞
PLB 985細胞系相關產(chǎn)品：SHI1細胞、OEC33細胞、FRH-0201細胞
U373-MG細胞系相關產(chǎn)品：Human Melanoma Cell Bowes細胞、HCC1954細胞、Me-Wo細胞
NCI-H295細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2141細胞、HUC-1細胞、Keio University-19-19細胞
RPTC細胞系相關產(chǎn)品：MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞
VeroC1008細胞系相關產(chǎn)品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、CEMO-1細胞、EST81細胞
HT144mel細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB435細胞、HPAF細胞、CHL1細胞
HPAEpiC細胞系相關產(chǎn)品：Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞
SK Col 1細胞系相關產(chǎn)品：KOSC-2細胞、NCIH2228細胞、NCI H929細胞
VSMC細胞系相關產(chǎn)品：Hce8693細胞、Calu3細胞、IGROV 1細胞
hTERT-HPNE細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞
CAL851細胞系相關產(chǎn)品：CPA 47細胞、751-NA-15細胞、WM-451Lu細胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞系相關產(chǎn)品：Y3M細胞、WM266mel細胞、VMCUB-1細胞
L-1210細胞系相關產(chǎn)品：Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞
CACO2細胞系相關產(chǎn)品：PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞
B-16細胞系相關產(chǎn)品：SU-86-86細胞、U-2 OS細胞、H1975細胞
H82細胞系相關產(chǎn)品：FRTL-5細胞、H596細胞、OCM-1細胞
207細胞系相關產(chǎn)品：CHOS細胞、Panc-03.27細胞、HEC1-A細胞
KP4細胞系相關產(chǎn)品：NS653細胞、F9細胞、VP229細胞
FL-83B細胞系相關產(chǎn)品：SW954細胞、Hi-5細胞、MDA175細胞
KMST6細胞系相關產(chǎn)品：MH7A細胞、SUM102PT細胞、NB19-RIKEN細胞
H2085細胞系相關產(chǎn)品：Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞
MCF-12F細胞系相關產(chǎn)品：COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞
HeLa 229 Thawing人宮頸癌細胞系
SUD6細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1623細胞、RCS細胞、Walker-256-TC細胞
L細胞系相關產(chǎn)品：PMVEC細胞、DU-4475細胞、NCI-SNU-668細胞
SW 620細胞系相關產(chǎn)品：H-650細胞、SKMEL2細胞、Hs695細胞
NG108-15細胞系相關產(chǎn)品：MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
CEM T4細胞系相關產(chǎn)品：DHL5細胞、Douglas Foster-1細胞、NPA 87細胞
WBF344細胞系相關產(chǎn)品：HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
GS-9L細胞系相關產(chǎn)品：BC-028細胞、Neukoplast細胞、OAW42細胞
H-498細胞系相關產(chǎn)品：NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞
Ly10細胞系相關產(chǎn)品：SK-LU-1細胞、NRK 52E細胞、HT 144細胞
RC-K8細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-FT細胞、Molm 14細胞、KLN205細胞
H2122細胞系相關產(chǎn)品：HTR-8/SV-neo細胞、H2023細胞、RMa-bm細胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞系相關產(chǎn)品：GH3細胞、DrG細胞、Hs 819.T細胞
SNU-1細胞系相關產(chǎn)品：MDA436細胞、U-138MG細胞、U373-MG細胞
IM-95細胞系相關產(chǎn)品：A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞
HT1197細胞系相關產(chǎn)品：190PT細胞、MKN1細胞、A-375細胞
PC-3M-2B4細胞系相關產(chǎn)品：GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞
NTC-200細胞系相關產(chǎn)品：Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞
SUPB-15細胞系相關產(chǎn)品：CCD-841-CoN細胞、HCT-8細胞、NCI-H446細胞
CFSC-8B細胞系相關產(chǎn)品：L-6 myoblast細胞、HCAEC細胞、M20 [Human melanoma]細胞
OVCA 420細胞系相關產(chǎn)品：IOSE 80細胞、RT-112細胞、NK92MI細胞
D10G41細胞系相關產(chǎn)品：SUM-102細胞、AR4IP細胞、bEnd3細胞
CHL-IU細胞系相關產(chǎn)品：KU-812-F細胞、SK-BR3細胞、QGY-7703細胞
HLMVEC細胞系相關產(chǎn)品：MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞
MDA 1386細胞系相關產(chǎn)品：LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞
GM07404細胞系相關產(chǎn)品：639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞
NPC-TW-039細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞
HEK293A細胞系相關產(chǎn)品：NK62a細胞、Panc 4.03細胞、L-540細胞
10RGB細胞系相關產(chǎn)品：OCM1A細胞、TKB-1細胞、CEM-T4細胞
hFOB 1.19細胞系相關產(chǎn)品：HTR8細胞、MiaPaCa2細胞、THP-1(ATCC)細胞
KTCTL-140細胞系相關產(chǎn)品：C518細胞、COLO 684細胞、H-1954細胞
Tu-177細胞系相關產(chǎn)品：MUG-Chor1細胞、NIH:OVCAR-10細胞、WM2664細胞
RH8994細胞系相關產(chǎn)品：SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
Y3-Ag123細胞系相關產(chǎn)品：C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞
HeLa 229 Thawing人宮頸癌細胞系
ME16C細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞
D-341Med細胞系相關產(chǎn)品：MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞
NCIH322細胞系相關產(chǎn)品：SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞
BMSC/hBMSCs細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-398細胞、H-820細胞、251MG細胞
NIH-3T3-L1細胞系相關產(chǎn)品：Sup T-1細胞、B4G12細胞、RM1細胞
DLD-1細胞系相關產(chǎn)品：HCC1419細胞、BGC-823細胞、LS1034細胞
ECC10細胞系相關產(chǎn)品：HCT116細胞、AM-38細胞、UPCISCC090細胞
MLA 144細胞系相關產(chǎn)品：ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞
CCD19-Lu細胞系相關產(chǎn)品：UCD-MLA-144細胞、NG 108-15細胞、AAV-293細胞
BHT101細胞系相關產(chǎn)品：NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞
HEH2細胞系相關產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞
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