"NRK Thawing大鼠腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：腎；自發(fā)永生；Osborne-Mendel
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
NRK Thawing大鼠腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇；３)將分裝上述細(xì)胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)：體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞，并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細(xì)胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中，細(xì)胞培增３～６次。細(xì)胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度，即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/１００個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細(xì)胞可達(dá)３～５％；細(xì)胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟：１.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞，如果細(xì)胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細(xì)胞懸液。３.將細(xì)胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細(xì)胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NRK Thawing大鼠腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞傳代的一般方法：開始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
RBL.2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT20細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞、GM346細(xì)胞
H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞、2T細(xì)胞
TGBC11TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2085細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞
McArdle RH-7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB F344細(xì)胞、786.O細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞
UMC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373-MG細(xì)胞、KRC/Y細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞
KM H-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1838細(xì)胞、Kit 225細(xì)胞、AZ521細(xì)胞
H-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1648細(xì)胞、NALM6細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞
BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2218細(xì)胞、SW 1573細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞
PC-3M IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、MRC-V細(xì)胞、AML-12細(xì)胞
KTCTL-140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C518細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞、H-1954細(xì)胞
PGBE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Simpson細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞、C6661細(xì)胞
624 MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC1細(xì)胞、CCD-841CoN細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞
B16-F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞、EU-4細(xì)胞
H1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-1細(xì)胞、U20-S細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞
DK-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-12T細(xì)胞、BE(2)-M17細(xì)胞、GM637A細(xì)胞
TE-671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM8細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞、BC-025細(xì)胞
H-1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo699細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞
SW1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0520細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞
UMUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞、H-2029細(xì)胞
HUCCT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-343-T細(xì)胞、MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞
MFD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC-4細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞
GOS-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-837細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞、OV-90細(xì)胞
GC-2spd(ts)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、TMD8細(xì)胞、SKNBE-1細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞
143B TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03571細(xì)胞、MH-22a細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞
MDA-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-RH30細(xì)胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞
NRK Thawing大鼠腎細(xì)胞系
SF767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780CP70細(xì)胞、TE14細(xì)胞、KE 37細(xì)胞
CL1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-1細(xì)胞、HEp-2細(xì)胞、SW 626細(xì)胞
RS(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞
AMJ2C8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan 2細(xì)胞、BE2C細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GH3細(xì)胞、DrG細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞
X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144mel細(xì)胞、Leydig細(xì)胞、SW-962細(xì)胞
SK Mel 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earle's L cells細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞
SK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-206F細(xì)胞、SW 756細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞
CAL-120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ishikawa細(xì)胞、RAT2細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞
C3H-10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ-3細(xì)胞、ATN1細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞
SKMES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-04B細(xì)胞、MDBK細(xì)胞、GES1細(xì)胞
JM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI No. 1846細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞、H7721細(xì)胞
CT 26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADR-RES細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞、GM-346細(xì)胞
DR2R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J細(xì)胞、50.B1細(xì)胞、Tregs細(xì)胞
Colo-206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、V-79細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞
KMS11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B 95-8細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞
OVCA5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-10-05細(xì)胞、ML2細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞
S3 HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 231細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞
HELF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAR-T細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞
EB-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、U251n細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞
MC38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG56細(xì)胞、H-1238細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞
HCC1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-829細(xì)胞、3T6細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞
Sp2/0-Ag-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1404細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞、MCAEC細(xì)胞
U-138-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-GT-2細(xì)胞、HNSC細(xì)胞、RIN-m5F細(xì)胞
H-548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHL-5細(xì)胞、BMSC/hBMSCs細(xì)胞、HR8348細(xì)胞
CAL78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-296細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞、OEC19細(xì)胞
NPA'87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis-Lung細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞、87 MG細(xì)胞
NEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U14細(xì)胞、H1355細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞
PC-9/GR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61-5-3細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞
H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC109細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞
HLEB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞、U266B1細(xì)胞
PA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Becker細(xì)胞、NUGC-2細(xì)胞、NCIH1819細(xì)胞
HCC70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1819細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞
NRK Thawing大鼠腎細(xì)胞系
PBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞、MA-782細(xì)胞
OCM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTV-1細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞、CL-11細(xì)胞
CCD 1112SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-432細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞、H-1650細(xì)胞
293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00044細(xì)胞、A-2058細(xì)胞、4175細(xì)胞
K-1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786.O細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-810細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞、MB39細(xì)胞
NS1-1 Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1238細(xì)胞、PANC1005細(xì)胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞
H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco2BBe細(xì)胞、MBVP細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞
Institute for Medical Research-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CACO2細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞
Hs 683.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC1細(xì)胞、RPTC細(xì)胞、HS5細(xì)胞
Ca9-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C643細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞、NCIH128細(xì)胞
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