"DU145 Thawing人前列腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：DU １４５ 是從一位有３年淋巴細(xì)胞白血病史的前列腺癌患者的腦部轉(zhuǎn)移灶中建立的。該細(xì)胞系未檢測(cè)到激素敏感性，酸性酶陽性，單個(gè)的細(xì)胞可在軟瓊脂中形成集落。對(duì)此細(xì)胞和原始腫瘤的亞顯微結(jié)構(gòu)分析可見微絨毛、微絲、細(xì)胞橋粒、線粒體、發(fā)達(dá)的高爾基體和異質(zhì)溶酶體。該細(xì)胞不表達(dá)前列腺抗原。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
DU145 Thawing人前列腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
DU145 Thawing人前列腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
BT 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-460細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞
KM-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T8細(xì)胞、MZCRC1細(xì)胞、U-251 MG細(xì)胞
P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN93細(xì)胞、Panc 2.03細(xì)胞、H-740細(xì)胞
PCI-4M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE1細(xì)胞、52PE細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞
Hs746-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU 4475細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞、KY-270細(xì)胞
H1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞、GM2131細(xì)胞
RCC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO-1細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞
TE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC316細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞
SW 48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCe-8693細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞、Detroit-562細(xì)胞
NK-92 MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2291細(xì)胞、GP293細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞
NCI-H2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca761細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞、DSL6A/C1細(xì)胞
ARO81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞
SKMEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-20細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞
B 95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-4細(xì)胞、HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞
SNU354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI522細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞
NOMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Keio University-19-19細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞
BNL-CL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-MEL-38細(xì)胞、HSF細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞
CTSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞、SU-DHL-5細(xì)胞
MDA.MB.435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell with DC Morphology細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeWo細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞、H-520細(xì)胞
MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞
MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞
SNU-601細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2/D1細(xì)胞、PANC-03-27細(xì)胞、DSL-6A-C1細(xì)胞
CV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVISE細(xì)胞、HSC細(xì)胞、H-2110細(xì)胞
Hx-147細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB 985細(xì)胞、MES-23.5細(xì)胞、PG-4細(xì)胞
ARIP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-2J細(xì)胞、H1666細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞
DU145 Thawing人前列腺癌細(xì)胞系
RT4-D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye(P-2003)細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞
GM05862細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1404細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞、OVCA-433細(xì)胞
VERO76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3CA細(xì)胞、SCC090細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞
WEHI-279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31FUJ細(xì)胞、LICCF細(xì)胞、PC14細(xì)胞
KP-N-YN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-954細(xì)胞、Bovine ENDometrial cells細(xì)胞、COV504細(xì)胞
NCI-H1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP-1細(xì)胞、159PT細(xì)胞、XWLC-05細(xì)胞
RPMI1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1436細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1436細(xì)胞
CCC-HIE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293EBNA細(xì)胞、293 H細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞
U-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-WRC 256細(xì)胞、TE-12細(xì)胞、McArdle RH-7777細(xì)胞
U-138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH196細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞
HGBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS-2B細(xì)胞、MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞
BRL3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-164細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞
Panc02-H0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-08-13細(xì)胞、Y-1細(xì)胞、VA-ES-BJ細(xì)胞
4T1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92.1.7細(xì)胞、BT-325細(xì)胞、H650細(xì)胞
OCILY3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞
TALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VERO76細(xì)胞、293-H細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞
HEp-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-E6細(xì)胞、HCC38細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞
Kit-225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC8024細(xì)胞、ST486細(xì)胞、NCIH209細(xì)胞
HPAF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729細(xì)胞、SKMEL-24細(xì)胞、SNK1細(xì)胞
SCC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Douglas Foster-1細(xì)胞、ASH3細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞
H69/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo 59J細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞、HFT-8810細(xì)胞
293 H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC5細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞、H-125細(xì)胞
HCC-9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN299細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞、697細(xì)胞
JROECL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOCF細(xì)胞、BHK細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞
HSCT6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSECs細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞、SVGp12細(xì)胞
SNK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966SK細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-2085細(xì)胞
BN-CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1271細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞
L-132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL851細(xì)胞、EVSA/T細(xì)胞、OCI/AML5細(xì)胞
U373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASPC1細(xì)胞、BIC1細(xì)胞、Y-79細(xì)胞
FHCRC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant-522細(xì)胞、SupT1細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞
JeKo 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-2細(xì)胞、TE-8細(xì)胞、hOMF細(xì)胞
PC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 982細(xì)胞、DV90細(xì)胞、C33A細(xì)胞
A375-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 746.T細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞
DU145 Thawing人前列腺癌細(xì)胞系
SW480E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-361細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞
AC16 [Human hybrid]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86.86細(xì)胞、L2細(xì)胞、L23/P細(xì)胞
HIEC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo-1細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞
Jiyoye (P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1299細(xì)胞、COS1細(xì)胞、HMCB細(xì)胞
HPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FF-WT-BJ細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞、RFL6細(xì)胞
LIPF178C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC8細(xì)胞、GM04154細(xì)胞、C41細(xì)胞
CF-PAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2452細(xì)胞、P30/Ohkubo細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞
NPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rabbit Kidney 13細(xì)胞、JB-6細(xì)胞、GM16136細(xì)胞
HuP-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-6細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞、EL4細(xì)胞
HCT-FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 50細(xì)胞、H3255細(xì)胞、HCT-8細(xì)胞
K562/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCMS細(xì)胞、PG-4細(xì)胞、HSC-I細(xì)胞
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