"A-375 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：A３７５源自一位５４歲女性，是Giard DJ等人建立的一系列細胞株中的一株。該細胞可在免疫抑制小鼠上成瘤，在瓊脂上形成克隆。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
A-375 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
細胞生長：貼壁
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復雜，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過程錯誤；冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心；懸渾細胞誤認為死細胞；培養(yǎng)溫度使用錯誤；細胞置于-８０℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離；rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來表示單位。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞株(系)的使用，為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍，細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變，使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細胞死亡。因此，細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分，減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細胞，可以使冰點下降，提高細胞膜對水的通透性，且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會，從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
A-375 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
SKNBE(2c)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細胞、HCA 7細胞、NCI-H522細胞
GM03320D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK.10細胞、HLEB3細胞、RH35細胞
L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PMVEC細胞、DU-4475細胞、NCI-SNU-668細胞
H3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1693細胞、KYSE 410細胞、WSU-DLCL(2)細胞
SCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 201細胞、SMA 560細胞、Pt K2細胞
C2C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC 316細胞、COLO-HSR細胞、RPE D407細胞
HREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1672細胞、J.E6-1細胞、PLC-PRF-5細胞
EB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞
AR4-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、HNEpC細胞、HS0578T細胞
P36細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞
NCI-H1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLMVEC細胞、Colon 38細胞、RIN Cl-5F細胞
McCoy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞
Hmy.2 CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞
MM1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞
A2780S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-33細胞、FCCH1018細胞、MAC1細胞
SW-837細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR-1細胞、HuT-78細胞、NCI-H460細胞
Vero C1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206F細胞、SU 86.86細胞、TW01細胞
253J-BV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2/E6E7細胞、RPE-1細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞
P3X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞
174xCEM.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H446細胞、GA10細胞、H-460細胞
PNT1-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL4細胞、GC-1細胞、MSTO-211細胞
7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4-1st細胞、Hs 706.T細胞、Hs 821.T細胞
SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞
IMR 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細胞、MDA-MB-134 VI細胞、H1048細胞
NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
FAK+/+細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞
A-375 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
BEL 7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SVneo細胞、SW403細胞、NT-2細胞
MCA-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293 c18細胞、NCI-SNU-1040細胞、Nb2a細胞
NCI-H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞
COV504細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞
H2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGE細胞、3AA細胞、MC 3T3-E1細胞
HR8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞
HuH6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞
KTC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226細胞、UMC11細胞、A 375細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞
HS-294細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞
JROECL19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1/Sq細胞、U118細胞、BT483細胞
Molm 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞
RH-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
MHCC 97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞
H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu-1細胞、SVEC 4-10細胞、SK Mel 1細胞
A2780/CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGC-27細胞、Hs-746T細胞、SNU-601細胞
293T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-64細胞、HL-60 clone15細胞、SMA560細胞
EJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL2細胞、OVCA 433細胞、SW-1463細胞
SW 1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2817細胞、CBRH7919細胞、MDA231細胞
ETCC007細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP303細胞、Panc 08.13細胞、RCS細胞
OKAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3JHR1細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、MC57細胞
HeLa S-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa 229細胞、RFL 6細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞
MDCK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR-3細胞、PNEC30細胞、293/EBNA-1細胞
NCI-H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S3-HeLa細胞、Glioma 261細胞、NCI-H865細胞
3LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-22細胞、PA-TU S細胞、SH-SY5Y Parental細胞
HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞
Ej138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞
IGR-OV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞
MEF (CF-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE6c7細胞、RMG-I細胞、1301細胞
RL95-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 166細胞、GM03570細胞、Molm 13細胞
RBL-2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192B細胞、KB細胞、C4-2 Bone metastatic細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
Walker/LLC-WRC256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞
A-375 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
HT 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC5細胞、H2171細胞、KYSE520細胞
WM 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-OV-1細胞、N-2a細胞、BT325細胞
Pro-5WgaRI3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞
B4G12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUM2B細胞、PCI:SG231細胞、Hs-578Bst細胞
KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞
MM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 4;11細胞、Tregs細胞、NIH-3T3細胞
HBZY 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-MNNG細胞、HEK-293F細胞、REC1細胞
AN3 CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞
H-1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCO細胞、CHP 212細胞、MCFs細胞
DMS 273細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN-3細胞、OCI-Ly7細胞、Hs940-T細胞
NTERA-2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RM-1細胞、H-520細胞、MAVER-1細胞
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