"HTR-8/SVneo Thawing人絨毛膜滋養(yǎng)層細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HTR-8/SVneo Thawing人絨毛膜滋養(yǎng)層細胞系
細胞生長：貼壁
造成實驗室細胞污染常見情況總結：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下。【違規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HTR-8/SVneo Thawing人絨毛膜滋養(yǎng)層細胞系
細胞生長特性：貼壁
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
ARH 77細胞系相關產(chǎn)品：UMUC-14細胞、MDA-453細胞、HET1A細胞
NP69細胞系相關產(chǎn)品：H-2023細胞、LM(TK-)細胞、NCI-H1573細胞
HS5細胞系相關產(chǎn)品：huH 1細胞、PLB985細胞、COLO829細胞
COLO-205細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1105細胞、COV 434細胞、NMCG-1細胞
HBVP細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞
Neuro 2a細胞系相關產(chǎn)品：A10細胞、HCC-95細胞、OLN 93細胞
TNC-1B12B4細胞系相關產(chǎn)品：Pa18C細胞、G-402細胞、U373MG細胞
huH 1細胞系相關產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細胞、D283 Med細胞、343MG細胞
NCIH2171細胞系相關產(chǎn)品：CAL-148細胞、NCI-H2073細胞、LICR-LON-HN6細胞
NCI H345細胞系相關產(chǎn)品：TOV112D細胞、Earles's cells細胞、PATU-S細胞
C17細胞系相關產(chǎn)品：MDA-453細胞、SK-MEL-31細胞、Tn5B1-4細胞
A549-Taxol細胞系相關產(chǎn)品：MLM細胞、KYSE410細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞
VERO76細胞系相關產(chǎn)品：AN3CA細胞、SCC090細胞、CAKI.1細胞
M1細胞系相關產(chǎn)品：VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞
H220細胞系相關產(chǎn)品：H-676細胞、NCIH1694細胞、GM07404A細胞
AR4-2J細胞系相關產(chǎn)品：Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、P-36細胞、P3J細胞
NCIH2405細胞系相關產(chǎn)品：H-865細胞、SHG 44細胞、143TK-細胞
NCI-H1238細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1668細胞、BAC1.2F5細胞、SKMEL-31細胞
HEL-92_1_7細胞系相關產(chǎn)品：SKG-IIIa細胞、H4-IIE-C3細胞、NCI H226細胞
Caki-1細胞系相關產(chǎn)品：NPA-87細胞、NCIH929細胞、GM-3573細胞
COLO 357細胞系相關產(chǎn)品：MB-49細胞、PC 61-5-3細胞、AR42J細胞
COLO 357細胞系相關產(chǎn)品：MB-49細胞、PC 61-5-3細胞、AR42J細胞
HuH-1細胞系相關產(chǎn)品：NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞
ECV304細胞系相關產(chǎn)品：H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞
NCIH1299細胞系相關產(chǎn)品：H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞
SW-48細胞系相關產(chǎn)品：COLO 16細胞、H-2030細胞、B16 F1細胞
HTR-8/SVneo Thawing人絨毛膜滋養(yǎng)層細胞系
BALB/3T3 clone A31細胞系相關產(chǎn)品：CHO-ori細胞、RC-2細胞、LS-174細胞
COS-1細胞系相關產(chǎn)品：OACP4C細胞、H-2172細胞、CL-34細胞
SKml2細胞系相關產(chǎn)品：P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞
U266S細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3-E1細胞、NCI-H2198細胞、SNU-449細胞
HR1K細胞系相關產(chǎn)品：JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
MUG-Chor1細胞系相關產(chǎn)品：Mv1.Lu細胞、L細胞、SW 1783細胞
U937細胞系相關產(chǎn)品：Kasumi-6細胞、Rat Lung-65細胞、SF 126細胞
NU-GC-4細胞系相關產(chǎn)品：TK-1細胞、Ramos G6.C10細胞、BERH-2細胞
TOV112細胞系相關產(chǎn)品：SKHEP-1細胞、DU145細胞、Hs683細胞
HK2細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly 10細胞、2E8細胞、H-4-II-E細胞
A375-MEL細胞系相關產(chǎn)品：Hs 746.T細胞、SKLU-1細胞、Porcine Kidney-15細胞
M-O7e細胞系相關產(chǎn)品：HCE-T細胞、EFO27細胞、NCIH548細胞
H-1944細胞系相關產(chǎn)品：SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞
COLO 357細胞系相關產(chǎn)品：MB-49細胞、PC 61-5-3細胞、AR42J細胞
MOVAS-1細胞系相關產(chǎn)品：Human Liver-7702細胞、NCI-H460細胞、WM266細胞
HCC9204細胞系相關產(chǎn)品：BEL 7402細胞、RKO_AS45細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞
BJ [Human fibroblast]細胞系相關產(chǎn)品：H-2591細胞、PGBE1細胞、JCA-1細胞
Clone Y-1細胞系相關產(chǎn)品：C-Lu65細胞、H1666_DA細胞、CCLP1細胞
CHL1細胞系相關產(chǎn)品：MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞
RT-BM 1細胞系相關產(chǎn)品：B95.8細胞、SK MEL-28細胞、CemT4細胞
SNU119細胞系相關產(chǎn)品：MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞
NCIH2228細胞系相關產(chǎn)品：KCL-22細胞、FHL-124細胞、ZYM-SVEC01細胞
C4-I細胞系相關產(chǎn)品：BpRc1細胞、D-341 Med細胞、Hs 888.Lu細胞
451-LU細胞系相關產(chǎn)品：U-138 MG細胞、LY-R細胞、HOP92細胞
SK.MEL.5細胞系相關產(chǎn)品：Co 115細胞、HCT.116細胞、PLA801C細胞
X63.Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：NCIH211細胞、GC9811-P細胞、NCI-BL1339細胞
IPLB-Sf21AE細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H378細胞、NCI-SNU-520細胞、hFOB細胞
A375-SM細胞系相關產(chǎn)品：RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞
343 MG細胞系相關產(chǎn)品：SUD6細胞、alpha-TC1.6細胞、H-747細胞
L-cells細胞系相關產(chǎn)品：UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞
LC1/Sq細胞系相關產(chǎn)品：Hs 822.T細胞、Be-Wo細胞、HCC-1806細胞
Hs683T細胞系相關產(chǎn)品：H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞
QGY-7701細胞系相關產(chǎn)品：CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞
HTR-8/SVneo Thawing人絨毛膜滋養(yǎng)層細胞系
CCD-841CoN細胞系相關產(chǎn)品：HPF細胞、Tsup-1細胞、hTERT-RPE細胞
PANC-03-27細胞系相關產(chǎn)品：hTERT-HME-1細胞、G 401細胞、HEK.EBNA細胞
HOC細胞系相關產(chǎn)品：H-2073細胞、293S細胞、H1648細胞
FHC細胞系相關產(chǎn)品：HELA-GFP細胞、T-24細胞、S91細胞
Rat Basophilic Leukemia-1細胞系相關產(chǎn)品：Sp2/O-Ag14細胞、PG-LH7細胞、CAL-27細胞
GM00346B細胞系相關產(chǎn)品：ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞
BrCL15細胞系相關產(chǎn)品：Hep II細胞、Cates 1B細胞、P388-D1細胞
IBMF-7細胞系相關產(chǎn)品：HSC/mHSC細胞、SW954細胞、L5178-R細胞
NCI-H1092細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞
NCI-H2108細胞系相關產(chǎn)品：COLO 684細胞、D6P2T細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞
PL 45細胞系相關產(chǎn)品：RK 13細胞、HC-11細胞、Human Embryo Lung-1細胞
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