"BIU-87 Thawing人膀胱癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
BIU-87 Thawing人膀胱癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見(jiàn)情況總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢？我們根據(jù)常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時(shí)間，有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí)，不開(kāi)紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開(kāi)始試驗(yàn)；２)器材或者溶液很久沒(méi)用，未檢測(cè)是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈；點(diǎn)了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗(yàn)；４)不帶手套，徒手操作；５)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專(zhuān)用儀器設(shè)備以及專(zhuān)用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋，未定期消毒。專(zhuān)用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面，東西太多太亂：超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)！這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買(mǎi)來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞！一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里，細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好，啥時(shí)候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染，如果有而且好幾個(gè)板子都有類(lèi)似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒(méi)了要記得加，還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤(pán)?！緜鞔?xì)胞人多口雜，難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細(xì)胞污染；超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí)，喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn)，要是還不帶口罩，里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢！
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類(lèi)、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時(shí)，從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和，對(duì)細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì)，對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。４、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大，但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。５、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。６、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理，我想是因細(xì)胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是：對(duì)細(xì)胞損傷小，不需要中止或洗細(xì)胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過(guò)程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺(tái)上，很快細(xì)胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細(xì)胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
BIU-87 Thawing人膀胱癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
冷凍細(xì)胞解凍程序：依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類(lèi)、血清種類(lèi)和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類(lèi)，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同時(shí)，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對(duì)細(xì)胞而言差異極大，請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類(lèi)培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過(guò)冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類(lèi)和濃度，于無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)取１０ml培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言，１%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
C-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC9細(xì)胞、JIMT細(xì)胞、GM-637細(xì)胞
SkMel31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R-V1細(xì)胞、LS-174細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞
624 MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC1細(xì)胞、CCD-841CoN細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞
Hx147細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：343 MG細(xì)胞、BJAB細(xì)胞、COLO 394細(xì)胞
NCIH1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 1034細(xì)胞、IEC18細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞
NCIH226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-524細(xì)胞、LTPA細(xì)胞、COLO320DM細(xì)胞
IFRS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-423細(xì)胞、GM06141細(xì)胞、TE13細(xì)胞
OVCAR-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-HN-6細(xì)胞、MDA435細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞
MMQ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞
F9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞、A-1847細(xì)胞
HCC-1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN229細(xì)胞、PA I細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞
HSC（Human Schwann）細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HHM-2細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞、GM17219細(xì)胞
Jurkat-FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-1細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞、H-508細(xì)胞
2PK3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T6細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞
2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN8細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞
CCD19-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCD-MLA-144細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞、NFHIOSE-29細(xì)胞
NCI-H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL2H3細(xì)胞、RA細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞
H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm14細(xì)胞、CALU1細(xì)胞、L 1210細(xì)胞
OC-3-VGH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-6細(xì)胞、PJ34細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞
HEK-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTPA細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞
Hs 729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA175細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞、SW1463細(xì)胞
COLO320/DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-Lec1.3C細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞、GOTO細(xì)胞
3T3-A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBE細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、SupB15WT細(xì)胞
LS1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-52E細(xì)胞、NCL-H548細(xì)胞、SK-N-F1細(xì)胞
COLO-680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293FT細(xì)胞、KP 4細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞
RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、H-1793細(xì)胞、HFLS細(xì)胞
BIU-87 Thawing人膀胱癌細(xì)胞系
RTE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-1細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞、H-250細(xì)胞
SL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22 (Clara)細(xì)胞、H-2342細(xì)胞、HBL100細(xì)胞
MCF-7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6.1細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞
P3 (Jiyoye)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hMSC-BM細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞
Sup T-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、MC116細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞
KYSE0410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H929細(xì)胞、GTL-16細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞
HF-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-7細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞
WPMY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226細(xì)胞、K7M2-WT細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞
C-33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PVEC細(xì)胞、293c18細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞
BSC40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 82細(xì)胞、HCC-1599細(xì)胞、751-NA細(xì)胞
SKCO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAT細(xì)胞、EU-3細(xì)胞、293GP細(xì)胞
H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABC1細(xì)胞、BHK21細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞
XWLC-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1770細(xì)胞、V79-1細(xì)胞、Hela-mock細(xì)胞
U-CH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL33細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞
D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL1細(xì)胞、SAS細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞
SKMEL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca-83細(xì)胞、SW1353細(xì)胞、GM04679細(xì)胞
MUTZ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM1細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞
G422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT2細(xì)胞、B16F1細(xì)胞、H-2170細(xì)胞
8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB1細(xì)胞、BMDC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞
NS-1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H661細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞
KAT-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2030細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞、CMT93細(xì)胞
MV4II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞
LA-795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR 8383細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞、DHL6細(xì)胞
MDAMB453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-436細(xì)胞、H-1651細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞
HUTU80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LMS-1細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞
BC-3-H-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP126細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det. 562細(xì)胞、MV522細(xì)胞、MAC1細(xì)胞
HEK293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK62a細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞、L-540細(xì)胞
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：18G3.cl 1細(xì)胞、NCIH226細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞
HUT-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-815細(xì)胞、Hut292細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞
H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE19細(xì)胞、TW01細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞
BT20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-90細(xì)胞、MDAMB361細(xì)胞、PANC-04-03細(xì)胞
HBE135-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERIRb1細(xì)胞、NFS 60細(xì)胞、GalK1細(xì)胞
BIU-87 Thawing人膀胱癌細(xì)胞系
BC-019細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 8細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞
Ca-Ski細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM1215細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞、L-1210細(xì)胞
95C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT474細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞、UO.31細(xì)胞
T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC.1細(xì)胞、H295R細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞
Panc-03.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320F細(xì)胞、NKT細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞
NCIH1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C1498細(xì)胞、NR-8383細(xì)胞、ES2細(xì)胞
NCI-H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82細(xì)胞、CPAE細(xì)胞、A-427細(xì)胞
Hs 895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 79細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞
BC3H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T9細(xì)胞、OC 316細(xì)胞、NS-20Y細(xì)胞
OVCA8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞、hA549細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-FGC細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞
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