"HOP-92 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
HOP-92 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長:貼壁
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HOP-92 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
Hs 746.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞
Human podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L(TK-)細胞、ECC12細胞、Daoy細胞
Glioma-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞
PC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞
MHCC97H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Melanoma 14細胞、M-O7e細胞、H2030細胞
JURKAT E-6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEL細胞、NCIH647細胞、Balb/c3T3細胞
IEC 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H865細胞、alpha-TC1-6細胞、CL-40細胞
YES 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞
BpRcl細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV neo細胞、NCI-H508細胞、ARH 77細胞
BRL3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞
Kasumi 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2-11細胞、PC.3細胞、SK_N_FI細胞
MDAMB175VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV-29細胞、CT-26細胞、WM451細胞
NCIH2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295R細胞、CD-18細胞、Hs 822.T細胞
GM02132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM TK negative細胞、PC3細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞
NBL-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT-K75細胞、NPC-TW039細胞、X63-Ag8-653細胞
PA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2a細胞、EJ-1細胞、K-562細胞
RFL 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞
ECC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10細胞、SCL1細胞、Lec1細胞
Walker256-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞
MDST8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2286細胞、A-704細胞、MBdSMC細胞
H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ADR-RES細胞、U 138 MG細胞、H-1819細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞
Jiyoye(P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞
HOP-92 Thawing人小細胞肺癌細胞系
HEEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、BE(2)-C細胞、JCA1細胞
3T3NIH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LX-2細胞、HCC1395細胞、OV1-P細胞
C3H 10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA 46細胞、H2126細胞、HCC44細胞
H-1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD15細胞、H-2135細胞、OCI/AML2細胞
624-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、aNK細胞、NUGC-2細胞
SKUT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞
OCI-AML-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294T細胞、MHCC-97細胞、UMUC3細胞
NCIH548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
BpRc1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME1細胞、H1048細胞、IM-9細胞
SK-N-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDCP-1細胞、NCI N87細胞、CCRF細胞
BCECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC403細胞、MCF-7/ADR-RES細胞、MDA-MB 468細胞
Becker細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞
NPC-TW039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞
SW756細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M14細胞、7860細胞、CAL120細胞
GM637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞
Panc 10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373-MG細胞、CMT-93細胞、SNUC2A細胞
NB-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HREC細胞、PGLH7細胞、F98細胞
HPF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2B4-L細胞、SVHUC細胞、Hepatoma-22細胞
McArdle RH-7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞
RKOAS451細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2(174 x CEM.T2)細胞、H-2141細胞、H-820細胞
NCI-SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞
K422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞
HEK 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞
DH-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞
PF-382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT-102細胞、Hs888 Lu細胞、SNU-398細胞
H820細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-100細胞、PC 61細胞、IAR-20細胞
HOS/MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞
L 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP10-3細胞、NCI-SNU-5細胞、NCI-H2073細胞
OE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞
NTera-2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH7細胞、NALM-6-M1細胞、TKB1細胞
Psi-2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFT 8810細胞、SJRH 30細胞、HCC1954 BL細胞
DMS-114細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞
OVCAR 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞
HOP-92 Thawing人小細胞肺癌細胞系
CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1734細胞、GM01232E細胞、NTera-2D1細胞
CL34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞
JM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞
H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLCPRF5細胞、HMy2.CIR細胞、GTL-16細胞
T-ALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞
NIH 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR42J細胞、KYSE-150細胞、RPMI-2650細胞
HFLS-RA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Evsa-T細胞、J774 A.1細胞、RAW 264.7細胞
KU-812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E304細胞、LAN-6細胞、BpRc1細胞
LM(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞
OCM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-173細胞、GM03320D細胞、Mv1.Lu細胞
NCI-SNU-119細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK clone 49F細胞、MDAMB134細胞、H-2172細胞
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