"UO-31 Thawing人腎癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
UO-31 Thawing人腎癌細胞系
細胞生長:貼壁
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:3-1:6傳代;2-3天換液1次。
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
UO-31 Thawing人腎癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-T細胞、MV4:11細胞、ID8/MOSEC細胞
6-10B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞
MX1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BXPC3細胞、ASH-3細胞、Lu-65細胞
LSECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞
Y-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT2細胞、DITNC1細胞、CX-1細胞
SUM52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT-20細胞、451Lu細胞、JM1細胞
ZR75-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1522細胞、SCC VII細胞、HEC1-B細胞
HT22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos細胞、Kato-III細胞、MDA-MB453細胞
DoTc2 4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO201細胞、SACC-83細胞、T-47-D細胞
alphaTC clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L細胞、PK(15)細胞、Hs 683.T細胞
NCI-SNU-886細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA-1細胞、MGC-803細胞、R 2 C細胞
Tb1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞
KCL22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC9811-P細胞、EC-GI細胞、Hs27F細胞
H-1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HIE-2細胞、BERH-2細胞、UCLA NPA871細胞
373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624 MEL細胞、Tu-177細胞、H1650細胞
CCC-ESF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1781細胞、LO2細胞、EC-109細胞
QGY 7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞
PG [Human lung carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2009細胞、LWnt3A細胞、CL11細胞
CHP212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTV1細胞、T-98細胞、Farage Original Line細胞
G401細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞
PZ-HPV-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-216細胞、174xCEM.T2細胞、HEK-293FT細胞
PZ-HPV-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-216細胞、174xCEM.T2細胞、HEK-293FT細胞
H2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、N87細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞
JIMT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞
H-2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK 15細胞、NuTu-19細胞、HCC-1569細胞
OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞
UO-31 Thawing人腎癌細胞系
TOV-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞
NPC-TW039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞
REC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-82細胞、MDA-MB 361細胞、SY5Y細胞
JTC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞
SV40-MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC Y細胞、G519細胞、149 PT細胞
TMK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU3細胞、SF 295細胞、BOWES細胞
253J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3569細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞、RT4P細胞
NCI-SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-02-03細胞、Madison細胞、BHP-10細胞
SCL I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞
MDA-MB-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H23細胞、QSG7701細胞、H-1930細胞
MuM-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG細胞、KYSE 70細胞、CL34細胞
IPLB-Sf21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-2008細胞、HNTEC細胞、KYSE-510細胞
CT26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-EMC-SS細胞、GM03569B細胞、H-526細胞
639-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
HSC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578-T細胞、EPC細胞、MPC-11細胞
MDA 231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞
H-510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2 ad細胞、FHL124細胞、SK-BR3細胞
SN12-PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc08.13細胞、CNE-1細胞、108CC15細胞
SUDHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB-1細胞、HPAC細胞、MDA-MB415細胞
H-660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63細胞、WM266mel細胞、Y3-Ag123細胞
SW 1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2029細胞、T. T細胞、CAL 51細胞
JVM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-L1 ad細胞、Caco-2 BBe細胞、SaOS-2細胞
COR-L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞
HUT28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320 HSR細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞、QSG7701細胞
Cattle chondrocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178YR細胞、S37細胞、P3JHR1細胞
MS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞
Sci-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞
PTK 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 699細胞、NS1-Ag4/1細胞、hCMEC/D3細胞
Mel-624細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCK81細胞、OCI-Ly8細胞、KYSE-30細胞
NS1-Ag4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2196細胞、OCI-Ly 3細胞、SW-626細胞
HANK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞
LCLC103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-S細胞、OAC-P4C細胞、MDA-MB-134細胞
NRK52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞
UO-31 Thawing人腎癌細胞系
DV90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞
GM00346細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞
GM00346細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞
KU-812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E304細胞、LAN-6細胞、BpRc1細胞
OVMANA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞
Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞
P3/NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-3細胞、GM 2132細胞、SHP-77細胞
NB1RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2-LUC細胞、H-1819細胞、SHIN-3細胞
PNT-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞
MEG-01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H165細胞、CAL 33細胞、LOU-NH91細胞
RD-ES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC1細胞、H-810細胞、OCI-AML-4細胞
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