"TE-11 Thawing人食管癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
TE-11 Thawing人食管癌細胞系
細胞生長：貼壁
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
TE-11 Thawing人食管癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
H-647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225/K6細胞、P3X63 AG 8.653細胞、NRK49F細胞
MyLa 2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma細胞、KYSE 520細胞、mRTEC細胞
HCAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH522細胞、H.Ep.-2細胞、PLC細胞
H-1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI.8226細胞、CCC-HSF-1細胞、HTR-8細胞
HCT116/L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 1005細胞、LAC細胞、U-2-OS細胞
BT474細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-727細胞、McA-RH8994細胞、MS-751細胞
COLO 320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞
MDAMB330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sarcoma OSteogenic-2細胞、OsA-CL細胞、MADISON LUNG TA-109細胞
DITNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GES-1細胞、LU165細胞、HEK-AD293細胞
OCI-LY-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞
HRIF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞
NCIH1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888Lu細胞、LLC1細胞、NCI-H676細胞
NCI-H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO.31細胞、YTMLC-90細胞、GM03573A細胞
RSC 96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞
NK-92.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D-Cl3細胞、R-1059-D細胞、NCI-H1694細胞
CT26WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW-264.7細胞、Lung cancer-1/squamous細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞
Strain KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-T CEM細胞、RPMI 8226細胞、H-1792細胞
CCD-1112sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞
Hs688(A)T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266-4細胞、mousepodocyte細胞、HTR8/SVneo細胞
NCI-H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞
OCI-AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JURKAT E-6.1細胞、HCe-8693細胞、GM07404A細胞
NRK 49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA205細胞、YAC-1細胞、T-CAM2細胞
MDCC-MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞
SKLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel1細胞、WEHI 3細胞、D283-MED細胞
H4-II-EC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞
MDA-MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-126細胞、NCI-H1184細胞、TW-039細胞
TE-11 Thawing人食管癌細胞系
A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
8305-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞
CORL279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞
TOV-21G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22-H8D8細胞、H865細胞、SNU-251細胞
HFT 8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-85-1細胞、MPC 11細胞、HEC-151細胞
H8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM1A細胞、TKB-1細胞、CEM-T4細胞
RF/6A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞
DoTc2-4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS-751細胞、RPMI no. 8226細胞、SG231細胞
LS 513細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞
Epithelioma Papulosum Cyprini細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOMA細胞、McCoy B細胞、MES-SA Dx5細胞
Hi-five細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞
SW1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JEKO細胞、MOLM-16細胞、Hs1.Tes細胞
G-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞
BEAS 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞
NHA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP-89細胞、CNE細胞、NIE 115細胞
Panc-03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞
U138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT3細胞、Y3.AG.1.2.3細胞、MSTO-211 H細胞
Bac12F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LCMS細胞、WEHI 164細胞、H-28細胞
Panc2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2-C8細胞、U266BL細胞、C 6細胞
TH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞
KYSE-140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-453細胞、PCI-SG231細胞、BV-2細胞
H-2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞
FHs74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341細胞、KP-N-RT-BM細胞、CAL85-1細胞
Glioma-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞
HT 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM4細胞、G361-mel細胞、SRA01/04 (HLE)細胞
H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞
HIT.T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M3 Clone M-3細胞、H7721細胞、Capan 1細胞
SUPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞
HD-LM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC 20細胞、GM04679細胞、FU-MMT-1細胞
NCI-H146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10細胞、HCC1143細胞、DLD-1細胞
H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo16細胞、BRL 3A細胞、NCI-H1666細胞
TE-11 Thawing人食管癌細胞系
LNCaP.FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞
BT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞
KTCTL-140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C518細胞、COLO 684細胞、H-1954細胞
Panc-813細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IA-LM細胞、PCI:SG-231細胞、OE-19細胞
NCI-H1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞
KMST6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH7A細胞、SUM102PT細胞、NB19-RIKEN細胞
MDA MB 453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-G63細胞、T47D:A細胞、C32-mel細胞
hEM15A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞
T-CAM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52PE細胞、Clone Y1細胞、H1993細胞
143TK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)C細胞、SK Hep1細胞、WRL-68細胞
Sci-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞
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