"OVCAR-3 Thawing人卵巢腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞1982年由T.C. Hamilton等建系,源自一位60卵巢腺癌的腹水,是卵巢癌抗藥性研究的模型。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
OVCAR-3 Thawing人卵巢腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2—1:4傳代,每周換液2—3次
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
OVCAR-3 Thawing人卵巢腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過(guò)程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無(wú)污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過(guò)程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無(wú)菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤,則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
SNUC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988 S細(xì)胞、H-727細(xì)胞、C-28/I2細(xì)胞
BEL-7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:5-8F細(xì)胞、P-36細(xì)胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞
HuPT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU165細(xì)胞、624-mel細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞
NG-108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、CL11細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞
G-292, clone A141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766.T細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞、MT4細(xì)胞
BEL 7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SVneo細(xì)胞、SW403細(xì)胞、NT-2細(xì)胞
EU-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FUOV1細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞
Leydig細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTSC-3細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞
PE CA PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-716細(xì)胞、H-2286細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞
TGW-I-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOK細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞
DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1細(xì)胞、CAL-51細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞
UPCISCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞、2PK-3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞
624mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206細(xì)胞、K-562細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞
FRH-0201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞、H-125細(xì)胞、SCLC-21H細(xì)胞
NCI-SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA1細(xì)胞、BC-3H-1細(xì)胞、A2780/CP70細(xì)胞
NCI-H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2110細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞、A-427細(xì)胞
MDAMB-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTCTL140細(xì)胞、SUM 149PT細(xì)胞、PC3-M細(xì)胞
SF17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2157細(xì)胞、OCI-Ly3細(xì)胞、SK-N-BE-2細(xì)胞
SL-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB39細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞、E0771細(xì)胞
SKNF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAC-84細(xì)胞、SNU638細(xì)胞、AtT-20細(xì)胞
4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞
4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞
IPAM-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mink細(xì)胞、Hs 822.T細(xì)胞、BEND細(xì)胞
ACC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1-LUC細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞
WEHI-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-23細(xì)胞、H1385細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞
SKN-AS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1238細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞
OVCAR-3 Thawing人卵巢腺癌細(xì)胞系
F56 [Human neoplasm]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-11細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞
NALM 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-1386細(xì)胞、BT-549細(xì)胞、EC-109細(xì)胞
BC3 H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-27細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、LAC細(xì)胞
NCIH2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA-Dx5細(xì)胞、OE-21細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞
NCIH1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG-1細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞
BGC-823細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa17C細(xì)胞、7404細(xì)胞、H-2106細(xì)胞
Opossum Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 52細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、NHA細(xì)胞
CEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS 2B細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞
HPAF-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM.12細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞
7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF II細(xì)胞、IMR90細(xì)胞、RS411細(xì)胞
UCLA-SO-M20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2935細(xì)胞、Henrietta Lacks cells細(xì)胞、BC-3H-1細(xì)胞
H-820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M IE8細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞、Onda 11細(xì)胞
IGR.OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1197細(xì)胞、C38細(xì)胞、GM17346細(xì)胞
PLC/PRF/5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos.G6.C10細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞、OS-RC-2細(xì)胞
751-NA-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA-560細(xì)胞、SW 480細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞
NCIH2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-865細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞、143TK-細(xì)胞
MG-63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEV-1細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞、FK81細(xì)胞
alphaTC clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞
OVISE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954BL細(xì)胞、H2087細(xì)胞、HM細(xì)胞
HCCLM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM3細(xì)胞、639 V細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞
GB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 680N細(xì)胞、HL1細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞
HeLa229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM-1細(xì)胞、CA-46細(xì)胞、OCI-Ly 7細(xì)胞
HTh-74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-MeWo細(xì)胞、HSC-I細(xì)胞、YD-15細(xì)胞
HCEC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-637細(xì)胞、HSF2細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞
HNE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOPN-8細(xì)胞、CL1.0細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞
SW 1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A1細(xì)胞、T-T細(xì)胞、COLO-699細(xì)胞
H-1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVG p12細(xì)胞、H1734細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞
H4IIE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1975細(xì)胞、M109細(xì)胞、C4I細(xì)胞
MN60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-679細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞、WISH細(xì)胞
HTh-74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-MeWo細(xì)胞、HSC-I細(xì)胞、YD-15細(xì)胞
WEHI-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-23細(xì)胞、H1385細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞
Bovine ENDometrial cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N9細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞
D407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-3細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞、Panc5.04細(xì)胞
OVCAR-3 Thawing人卵巢腺癌細(xì)胞系
HOP62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-RC-2細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞、Ku812F細(xì)胞
H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE19細(xì)胞、TW01細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞
TE 354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-80細(xì)胞、EB-1細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞
WIL2 Secreting細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-441細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞
SKMel-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00097細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞、HL-1細(xì)胞
OVCAR-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435 S細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞
NK10a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuTu 80細(xì)胞、UMUC14細(xì)胞、SN12PM6細(xì)胞
SCC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2135細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞
McA-RH 8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、SCL II細(xì)胞
Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞
HCT GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ISHI細(xì)胞、Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、T_T_細(xì)胞
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