"NIT-1 Thawing小鼠胰腺β細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NIT-1 Thawing小鼠胰腺β細胞系
細胞生長：貼壁
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代，每周換液１-２次
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NIT-1 Thawing小鼠胰腺β細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因實驗需要，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
R.K.13細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-134-VI細胞、Microbiological Associates-104細胞、OCI AML5細胞
M-O7e細胞系相關產(chǎn)品：HCE-T細胞、EFO27細胞、NCIH548細胞
MDA-MB-453細胞系相關產(chǎn)品：H-2444細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞、HS-729細胞
HL7702細胞系相關產(chǎn)品：HPAFII細胞、MCAEC細胞、H-1373細胞
NH-6細胞系相關產(chǎn)品：SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞
HuH7細胞系相關產(chǎn)品：CAL-120細胞、MeT 5A細胞、M 1細胞
QSG7701細胞系相關產(chǎn)品：SKUT-1細胞、CCRF-SB細胞、PGBE1細胞
CAL 12細胞系相關產(chǎn)品：PTK2細胞、HO8910/PM細胞、IPLB-SF 21細胞
NCIH1781細胞系相關產(chǎn)品：Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞
BL6細胞系相關產(chǎn)品：UO-31細胞、MC-38細胞、NIH:OVCAR-8細胞
BRL3A細胞系相關產(chǎn)品：WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞
1301細胞系相關產(chǎn)品：L cell line細胞、CoCL2細胞、PSN-1細胞
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL4細胞、HT細胞、HCEC-B4G12細胞
H82sclc細胞系相關產(chǎn)品：Y 1細胞、SCC-4細胞、Pro-5WgaRI3C細胞
QSG-7701細胞系相關產(chǎn)品：SW 626細胞、Calu 3細胞、C2A細胞
C518細胞系相關產(chǎn)品：MES-SA/Dx-5細胞、CCD 966SK細胞、SKO-007細胞
HCC1171細胞系相關產(chǎn)品：Wistar Institute-38細胞、MiaPaCa-2細胞、DSL-6A/C1細胞
H-4-II-E細胞系相關產(chǎn)品：8505C細胞、SNUC2A細胞、U-373-MG細胞
H-157細胞系相關產(chǎn)品：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
SF-539 BT細胞系相關產(chǎn)品：SCL1細胞、Liver-02細胞、RMC細胞
CEM-CCRF細胞系相關產(chǎn)品：PLC-8024細胞、A7r5細胞、COLO 320HSR細胞
SK-N-BE(2)-M17細胞系相關產(chǎn)品：MAntle cell VERona-1細胞、Mono-Mac-1細胞、J111細胞
Pfeiffer細胞系相關產(chǎn)品：L-Wnt-3A細胞、OCILY7細胞、MFHL-2細胞
H647細胞系相關產(chǎn)品：DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞
RA細胞系相關產(chǎn)品：T47D細胞、NCIH2291細胞、MV522細胞
BC-020細胞系相關產(chǎn)品：C-8161細胞、Vero E6細胞、B-16細胞
NIT-1 Thawing小鼠胰腺β細胞系
NP69細胞系相關產(chǎn)品：H-2023細胞、LM(TK-)細胞、NCI-H1573細胞
SKNF1細胞系相關產(chǎn)品：HAC-84細胞、SNU638細胞、AtT-20細胞
OCIAML3細胞系相關產(chǎn)品：BetaTC6細胞、GM2132細胞、HS-5細胞
Institute for Medical Research-32細胞系相關產(chǎn)品：MDA-415細胞、HCC1187細胞、COLO357細胞
NCI-H716細胞系相關產(chǎn)品：GM 637細胞、NT2-D1細胞、PK13細胞
Swiss3T3細胞系相關產(chǎn)品：3T6-Swiss albino細胞、NCI-BL6細胞、NCIH661細胞
C643細胞系相關產(chǎn)品：VCaP細胞、CL1細胞、Hepa1-6細胞
SJSA1細胞系相關產(chǎn)品：L2細胞、CL34細胞、SHG44細胞
RL95細胞系相關產(chǎn)品：MMVECs細胞、P30/0HK細胞、OCI/AML-2細胞
PK15細胞系相關產(chǎn)品：WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞
Mono Mac6細胞系相關產(chǎn)品：138 MG細胞、KATOIII細胞、SCC-9細胞
Panc04.03細胞系相關產(chǎn)品：NK92細胞、NF639細胞、Rabbit Kidney 13細胞
OV-1063細胞系相關產(chǎn)品：C127細胞、SKMES1細胞、HCT-15細胞
UPCI-SCC-090細胞系相關產(chǎn)品：U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞
SNU16細胞系相關產(chǎn)品：CAL39細胞、FL 62891細胞、RIN14B細胞
CCD-966SK細胞系相關產(chǎn)品：P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞
NCI-H727細胞系相關產(chǎn)品：T-ALL 1細胞、NCI-H1993細胞、KG-1細胞
RIN14B細胞系相關產(chǎn)品：CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
SK-N-SH細胞系相關產(chǎn)品：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、DMS-79細胞、STC-1細胞
HET-1A細胞系相關產(chǎn)品：GM3190細胞、Caco2-BBE細胞、LX-2細胞
RPMI #8226細胞系相關產(chǎn)品：He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞
NCI H548細胞系相關產(chǎn)品：HCC 38細胞、MDAMB175VII細胞、AQ-Mel細胞
Pa017C細胞系相關產(chǎn)品：PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞
PCI-4B細胞系相關產(chǎn)品：GDM-1細胞、NUGC4細胞、HUT125細胞
MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關產(chǎn)品：P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞
GFP-Olig2細胞系相關產(chǎn)品：hTERT-RPE細胞、AML 12細胞、NCIH1618細胞
OC-3-VGH細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL-6細胞、PJ34細胞、SUD-4細胞
ARO-81細胞系相關產(chǎn)品：CT-26細胞、RCC4細胞、SK-N-BE(1)細胞
NCI-H-69細胞系相關產(chǎn)品：DHL-8細胞、HCT116細胞、Fao細胞
RBSMC細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP-C4-2細胞、MDA MB231細胞、HFT 8810細胞
A2008細胞系相關產(chǎn)品：OsACL細胞、AU-Mel細胞、H-35 Reuber細胞
COLO 320F細胞系相關產(chǎn)品：G-402細胞、IAR-20細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞
NIH 3T6細胞系相關產(chǎn)品：CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞
NIT-1 Thawing小鼠胰腺β細胞系
Pa14C細胞系相關產(chǎn)品：DLD 1細胞、HL7702細胞、RPMI no. 8226細胞
McCoy B細胞系相關產(chǎn)品：SNU16細胞、NCIH1373細胞、BEL-7405細胞
H1417細胞系相關產(chǎn)品：Jiyoye細胞、GM03671C細胞、GM2131細胞
3LL細胞系相關產(chǎn)品：HT-22細胞、PA-TU S細胞、SH-SY5Y Parental細胞
H-1395細胞系相關產(chǎn)品：A549-Taxol細胞、NCI-322細胞、UO-31細胞
DOK細胞系相關產(chǎn)品：GM12878細胞、Nthy ori 3.1細胞、NB-19細胞
U373 MG細胞系相關產(chǎn)品：D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞
TKB1細胞系相關產(chǎn)品：Anip[973]細胞、GM05862細胞、NCI-H1694細胞
NCIH1395細胞系相關產(chǎn)品：C2-C12細胞、MH-S細胞、BJAB-1細胞
P3 NS1 Ag4/1細胞系相關產(chǎn)品：OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞
COLO-394細胞系相關產(chǎn)品：H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞
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