"EC9706 cell line人食管癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時，易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化，對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化，細胞密度過高超過80%時，采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C，解凍在4°C進行，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟：消化過度細胞碎片增多，黑渣子增多，細胞會成片脫落，嚴重影響細胞活性，并有部分細胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下，反復(fù)吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同，胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲存時間，胰酶的儲存溫度，是否反復(fù)凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細胞的密度有關(guān)。對于新購買的細胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間，可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓，記錄消化時間，下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
EC9706 cell line人食管癌細胞系
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
貼壁細胞凍存注意事項：細胞凍存液需提前配制，不可直接將DMSO加入細胞懸液中；不同細胞消化時間有差異，以實際鏡檢結(jié)果為準，大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化，消化時間不宜過長；應(yīng)選擇匯合度80%-90%左右，細胞處于對數(shù)生長期時進行凍存操作，確保細胞凍存時狀態(tài)，凍存密度可根據(jù)細胞特性進行調(diào)整；凍存細胞保存溫度應(yīng)低于-130℃，不可在-80℃長期保存。貼壁細胞凍存操作步驟：從培養(yǎng)箱中取出準備凍存的細胞；顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)并拍照記錄；酒精消毒培養(yǎng)瓶后放入安全柜中；吸去多余的培養(yǎng)基，加人2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；將細胞懸液移入15ml離心管中離心，1000rpm/min（約200g）離心3-5min；吸去多余的液體，向細胞沉淀中加入適量的凍存液，輕輕吸打混勻；按比例分裝至凍存管中；貼好標(biāo)簽后放入梯度凍存盒中；將凍存盒放入-80℃，降溫過夜后，移入液氮中保存。貼壁細胞凍存實驗準備事項：將15mL離心管、凍存管、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、細胞凍存液等從4℃冰箱中取出后，復(fù)溫至室溫，備用；程序降溫盒復(fù)溫至室溫備用。
EC9706 cell line人食管癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
H847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO細胞、Huh 7.5.1細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞
H-1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-2細胞、CHG-5細胞、HSC4細胞
MMAc-Serum Free細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly18細胞、TE-4細胞、KTCTL140細胞
HSKMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞
PC3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO684細胞、Tu 212細胞、G361-mel細胞
Panc8.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04680細胞、Nb2a細胞、NCIH660細胞
RCC-10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞
RC-4B/C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-948細胞、BA/F3細胞、SK Mel28細胞
CCC-HEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF763細胞、MDA.MB.231細胞、WM-266-mel細胞
RBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞
SKOV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1703細胞、Hs 729.T細胞、MC-26細胞
SUPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞
QGY 7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞
EC9706 cell line人食管癌細胞系
HPMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FF-WT-BJ細胞、HEL-92_1_7細胞、RFL6細胞
Panc8.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04680細胞、Nb2a細胞、NCIH660細胞
VA-ES-BJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Col-1細胞、SW480細胞、H.Ep. No. 2細胞
NCI-H838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-RPE-1細胞、R1610細胞、Okayama University Medical School-23細胞
H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIHA細胞、H-1437細胞、HS-695T細胞
SR-786細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-4細胞、EFM-192B細胞、SK-RC-52細胞
HGF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAN 02細胞、SNU-869細胞、JIMT-1細胞
MDAMB453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-436細胞、H-1651細胞、SK-ML2細胞
CoC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324細胞、L540細胞、74Int細胞
U118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞
Kasumi-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1623細胞、HL-60 Clone 15細胞、NCI-H1155細胞
HEC151細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞
DHBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW900細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞、Hep 3B2_1-7細胞
H-1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞
9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZYM-DIEC02細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、HCC1008細胞
A-204細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 205細胞、P31/FUJ細胞、NCI H345細胞
COLO320/DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞
K562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞
KP-N-NS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV 1細胞、NTERA-2cl.D1細胞、OVCAR420細胞
MMVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 280細胞、MOLT16細胞、JIMT1細胞
TE9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569細胞、NCIH838細胞、RPMI-6666細胞
TALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VERO76細胞、293-H細胞、SHZ-88細胞
ARH-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RFL-6細胞、NCI-N87細胞、HEK/EBNA細胞
VMM39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A498細胞、SK-ML2細胞、KCL22細胞
HuH 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC812細胞、OE19細胞、NCI-SNU-601細胞
SUM 190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174T細胞、HeLaS3細胞、NE-1細胞
D-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8細胞、138 MG細胞、SNU1040細胞
MM-1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
NuTu-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B15細胞、WI 38細胞、Tb 1-Lu細胞
U20-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-12F細胞、OPM-2細胞、HuT-102細胞
HCC-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCaBER細胞、MOLP8細胞、HO1-N1細胞
MRMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOEC細胞、SNU-638細胞、CORL88細胞
HuT78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR1-K細胞、MHCC 97細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞
GM02131A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F10細胞、PLC-8024細胞、MDA MB 453細胞
3T3F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Microbiological Associates-104細胞、JB-6 Cl 30細胞、NWA細胞
HOMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES細胞、KYSE-510細胞、BEL 7404細胞
CCD-966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞
Me Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB453細胞、SUM 159PT細胞、SW 1417細胞
X63-AG 8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-5細胞、OVCAR433細胞、H-157細胞
JROECL 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATOIII細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、MeT5A細胞
SMMC-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞
HCT_116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞
ETCC-007細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92-1-7細胞、UT-7細胞、HCC1187細胞
EC9706 cell line人食管癌細胞系
Pro-5 Lec1.3c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH28細胞、VM Cub 1細胞、HS-294T細胞
NCI-H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞
Ball 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-H2細胞、HMEC1細胞、GM03569B細胞
D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
CEMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1395細胞、Sf-21細胞、Hs675細胞
Mouse Podocyte Clone-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL-6A/C1細胞、MiaPaCa-2細胞、Pro-Lec1.3C細胞
MMAc-Serum Free細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly18細胞、HT 1080細胞、GBCSD細胞
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