"Fao Thawing小鼠肝癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
Fao Thawing小鼠肝癌細胞系
細胞生長:貼壁
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Fao Thawing小鼠肝癌細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
MPC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-HSR細胞、CCRF.CEM細胞、H-2052細胞
SF763細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H510A細胞、MONO-MAC 6細胞、PBMC細胞
T8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞
Li-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC clone 929細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞、VM-CUB-I細胞
P3/NS1/1-Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞
BE(2)M-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG8-653細胞、GM00637B細胞、50.B1細胞
MLE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO 3細胞、Hs 606.T細胞、SK-ES1細胞
PTK 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 699細胞、NS1-Ag4/1細胞、hCMEC/D3細胞
PCI-04B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 39細胞、SUM 190PT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞
H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞
JIMT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞
RMS 1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞
MCF10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞
KE37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2107細胞、J111細胞、M14細胞
B16-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5.1細胞、HM1900細胞、MDAPCa2b細胞
MLA144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCA7細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、PL12細胞
SCLC21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞
PLC-8024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞
Strain V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NeHepLxHT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、SUDHL6細胞
SLMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、SNU1細胞、BV173細胞
HFL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
HFL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
BMU-S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco 2細胞、NCI-H1781細胞、SW 982細胞
Hs895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMU-S1細胞、D10細胞、H1395細胞
Jurkat E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH-2細胞、P3J-HR-1細胞、MOLM13細胞
OCM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-173細胞、GM03320D細胞、Mv1.Lu細胞
Fao Thawing小鼠肝癌細胞系
HLFa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1563細胞、SNU-398細胞、H2196細胞
S180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)細胞、HT clone H9細胞、NCI-H1975細胞
T8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞
CCC-HHM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL40細胞、NCIH2171細胞、CCD19-Lu細胞
SUM149-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞
130 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞
OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE10細胞、SW1417細胞、LN-382細胞
H-295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-182細胞、HCMEC細胞、UCH1細胞
3D4/21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D CL3細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞、TFH細胞
TE-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat clone A3細胞、HOS (TE85)細胞、NRK細胞
MCMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IB-RS2細胞、HUT28細胞、PC-3/M細胞
BC-025細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos G6.C10細胞、Human Microglia Clone 3細胞、NCI-H748細胞
UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCFB(HCF)細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞
UMUC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCAEC細胞、NS-20Y細胞、CTLL2細胞
PLA801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT-2細胞、CCD-19Lu細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞
Soleus clone 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Glomerular Endothelial細胞、HT 1080細胞、OCI-LY-10細胞
H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-1細胞、U20-S細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞
PL9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞
MB49細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC細胞、SF-763細胞、Mhh-Call 2細胞
Pt K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞
PT-67細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞
GP2d細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD19Lu細胞、GM2131細胞、GM637細胞
OP-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB-106細胞、RERF-LCMS細胞、Y3-Ag1.2.3細胞
tdott細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0813細胞、PC-3M-2B4細胞、U-2932細胞
SKCO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAT細胞、EU-3細胞、293GP細胞
HNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞
SCaBER細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞
NR8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAPI細胞、WM 451-Lu細胞、HEK293細胞
FM-88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM H-2細胞、MC26細胞、N1E115細胞
HL-7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞
CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA-Pa-Ca-2細胞、BV-2細胞、GM03320細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
HUCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO細胞、SUD-4細胞、HT-29/CX-1細胞
Fao Thawing小鼠肝癌細胞系
OCI-AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-94細胞、F36P細胞、Colo320細胞
HcerEpic細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-596細胞、Hepa1-6細胞、hUC-MSC細胞
MC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QG56細胞、H-1238細胞、OCM1A細胞
U-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-WRC 256細胞、TE-12細胞、McArdle RH-7777細胞
C22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 420細胞、Ca759細胞、NCIH1417細胞
H-920細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM3細胞、SNU475細胞、NCIH2052細胞
C2BBe1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
KYSE 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC細胞、Pt-K1細胞、Kit225-K6細胞
H-4-II-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8505C細胞、SNUC2A細胞、U-373-MG細胞
H-1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCO細胞、CHP 212細胞、MCFs細胞
H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞
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