"HT-1197 Thawing人膀胱癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HT-1197 Thawing人膀胱癌細胞系
細胞生長：貼壁
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：５-１：１０傳代，２天換液１次。
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HT-1197 Thawing人膀胱癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結構，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
HBE 135-E6/E7細胞系相關產(chǎn)品：FHL-124細胞、SCC 9細胞、HPMC細胞
T-98細胞系相關產(chǎn)品：SKml2細胞、MKN-28細胞、MDCK Type II細胞
TNC-1B12B4細胞系相關產(chǎn)品：Pa18C細胞、G-402細胞、U373MG細胞
VB細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H526細胞、H-2452細胞、CCC-HEH-2細胞
MCFs細胞系相關產(chǎn)品：HEK (AD293)細胞、PG-4 S+L-細胞、Ramos.G6.C10細胞
AML-12細胞系相關產(chǎn)品：HEL 299細胞、H1672細胞、CEF細胞
CoCL2細胞系相關產(chǎn)品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、143BTK-細胞、J774A.1細胞
U-251細胞系相關產(chǎn)品：Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞
MDA-MB415細胞系相關產(chǎn)品：VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞
Wistar Institute, Susan Hayflick細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-EBNA1細胞、RPMI-1846細胞、JROECL 21細胞
M21細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞
2780CP細胞系相關產(chǎn)品：KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞
MASMC細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞
COLO320 DM細胞系相關產(chǎn)品：RCC 7860細胞、A431/P細胞、MDA-1386細胞
SKG-3a細胞系相關產(chǎn)品：TALL1細胞、SKCO-1細胞、Hs746T細胞
SKNBE細胞系相關產(chǎn)品：PZ-HPV-7細胞、NCIH2073細胞、MGH-UI細胞
HONE-1細胞系相關產(chǎn)品：PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞
Roswell Park Memorial Institute 8402細胞系相關產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-39細胞、NCI-H378細胞、CAL-33細胞
L-cell細胞系相關產(chǎn)品：MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞
HOS-TE85細胞系相關產(chǎn)品：SkMel31細胞、MS1細胞、OCI/AML-4細胞
KY180細胞系相關產(chǎn)品：SW1353細胞、SW 1088細胞、RKO-E6細胞
KY180細胞系相關產(chǎn)品：SW1353細胞、SW 1088細胞、RKO-E6細胞
aNK細胞系相關產(chǎn)品：OVCA8細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞、NALM-6-M1細胞
HEH2細胞系相關產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞
B16 F10細胞系相關產(chǎn)品：A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞
MOLT.4細胞系相關產(chǎn)品：H295細胞、A2780S細胞、DCS細胞
HT-1197 Thawing人膀胱癌細胞系
Madin-Darby Bovine Kidney細胞系相關產(chǎn)品：C3H/10T1/2細胞、WM 239-A細胞、U-266 AR1細胞
OCI AML4細胞系相關產(chǎn)品：CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞
HEC151細胞系相關產(chǎn)品：Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞
CCD 966 SK細胞系相關產(chǎn)品：A2780 CP70細胞、149PT細胞、BE2-C細胞
CCD-966SK細胞系相關產(chǎn)品：P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞
Jurkat clone A3細胞系相關產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
VSC4.1細胞系相關產(chǎn)品：UCH-1細胞、KE-37細胞、118 MG細胞
H4細胞系相關產(chǎn)品：M1細胞、RPMI-2650細胞、SNU761細胞
LIM 1215細胞系相關產(chǎn)品：U-87細胞、DF1細胞、H1573細胞
HCFB（HCF）細胞系相關產(chǎn)品：WEHI-231細胞、MG63細胞、OVCAR 420細胞
P31-FUJ細胞系相關產(chǎn)品：801-D細胞、HCT 15細胞、SL-29細胞
HPAF細胞系相關產(chǎn)品：Hs 729細胞、SKMEL-24細胞、SNK1細胞
Colon-26細胞系相關產(chǎn)品：LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞
TGBC11TKB細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞
MCAEC細胞系相關產(chǎn)品：GM15452細胞、293T細胞、McA-RH 7777細胞
BEL-7405細胞系相關產(chǎn)品：H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關產(chǎn)品：NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞
BPH-1細胞系相關產(chǎn)品：H711細胞、HEK;293細胞、Hs-746T細胞
Fu97細胞系相關產(chǎn)品：KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞
SK-N-BE2C細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB468細胞、TE 32.T細胞、OVCAR-432細胞
CCK-81細胞系相關產(chǎn)品：H6c7細胞、MA-c細胞、Mouse Colon 38細胞
HT 144細胞系相關產(chǎn)品：CNE1-LUC細胞、UMC-11細胞、PC-9細胞
SW-48細胞系相關產(chǎn)品：COLO 16細胞、H-2030細胞、B16 F1細胞
B16 subline B78細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL-2細胞、DMS-273細胞、CALU1細胞
KU 812F細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞
OCI-LY-10細胞系相關產(chǎn)品：Tb1Lu細胞、OAW 42細胞、Tn-5細胞
NBL-3細胞系相關產(chǎn)品：RL952細胞、H-2085細胞、WSUDLCL2細胞
BE(2)-M17細胞系相關產(chǎn)品：H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
174xCEM.T2細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H446細胞、GA10細胞、H-460細胞
Duke University 145細胞系相關產(chǎn)品：M619細胞、D-283 Med細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞
RPMI1788細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞
H4IIEC3細胞系相關產(chǎn)品：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、MM1-S細胞、HCC2108細胞
Hopkins-92細胞系相關產(chǎn)品：SKBr3細胞、H1650細胞、Panc 4.03細胞
HT-1197 Thawing人膀胱癌細胞系
B-3細胞系相關產(chǎn)品：COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞
Madison lung細胞系相關產(chǎn)品：WEHI-279細胞、CFPAC-1細胞、K 562細胞
EOC20細胞系相關產(chǎn)品：COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
OAW-42細胞系相關產(chǎn)品：SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞
CCF-STTG1細胞系相關產(chǎn)品：MT-2J細胞、ME 180細胞、NCI-H1184細胞
GS-9L細胞系相關產(chǎn)品：BC-028細胞、Neukoplast細胞、OAW42細胞
BV2細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 520細胞、HCC-2108細胞、SKG3A細胞
HK-2 [Human kidney]細胞系相關產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞
Hs895.T細胞系相關產(chǎn)品：BMU-S1細胞、D10細胞、H1395細胞
COLO357細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H810細胞、WM-239-A細胞、Anip-973細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關產(chǎn)品：Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞
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